血清低水平乙肝病毒表面抗原的临床意义分析

目的:探讨血清中低水平乙肝病毒表面抗原(HBsAg)与乙肝病毒(HBV)DNA载量及肝功能指标的关系。方法:选取2020年6月—2021年12月在宁波市镇海区人民医院就诊的低水平HBsAg患者408例,检测所有纳入患者的乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒e抗体(抗-HBe)及乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)、HBV DNA载量检测及相关肝功能指标。结果:408例低水平HBsAg患者中,抗-HBe和抗-HBc均为阳性,且抗-HBs和HBeAg均为阴性的患者占比最高,共360例(88.24%);HBV DNA阳性共82例(20.10%),不同浓度HBsAg患者HBV DNA阳性率差异有统计学意义(P=0.041),HBsAg浓度在31~40 COI时,HBV DNA的阳性率最高(30.00%);不同浓度HBsAg时HBV DNA载量差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度HBsAg及HBV DNA对应的肝功能检测结果差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:低水平HBsAg患者中,抗-HBe和抗-HBc均为阳性,且抗-HBs和HBeAg均为阴性的患者占比最高;HBsAg浓度不同时,HBV DNA阳性率也不同,但并不影响HBV DNA载量;HBsAg浓度及HBV DNA载量不同并不影响患者的肝功能。

乙肝病毒DNA与乙型肝炎表面抗原含量关系的探讨

通过对乙肝病毒 DNA(HBV- DNA)和乙型肝炎表面抗原 (HBs Ag)的定量检测 ,以鉴别HBs Ag阳性人群中的具有传染性的部分 ,对乙型肝炎的预防和治疗提供帮助。方法 :测定 443例不同人群血清中的 HBV- DNA的同时应用酶联免疫吸附法对该血清进行 HBs Ag定量检测。结果 :HBs Ag含量在 1 0 ng/ ml水平以下时 ,HBV- DNA阳性率为 1 .4% ;当 HBs Ag含量大于 1 0 ng/ ml范围时 ,HBV- DNA阳性率随浓度的增加而增大。结论 :HBs Ag含量与 HBV- DNA在一定范围有关系。当 HBs Ag大于 1 ng/ml时 ,体内就可能有病毒复制。

影响乙肝病毒表面抗原阳性孕妇母婴阻断成功率的相关因素探析

目的分析影响乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性孕妇母婴阻断的相关因素,并制定针对性措施,为今后临床治疗提供依据。方法回顾性分析海南省妇女儿童医学中心2021年1月至2023年1月筛查出孕周为24~28周的305例HBsAg阳性孕妇(孕期服用抗病毒药)的临床资料,随访至新生儿7个月,根据HBsAg阳性孕妇母婴阻断是否成功分为成功组280例[新生儿HBsAg阴性、抗-乙肝表面抗体(HBs)阳性]和失败组25例(新生儿HBsAg阳性、抗-HBs阴性)。统计两组患者临床资料,采用单因素和多因素Logistic回归分析筛选影响HBsAg阳性孕妇母婴阻断的因素。结果单因素结果分析显示,与成功组比,失败组孕妇乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性、孕妇乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)水平>2×10^(5) IU/mL占比更高;新生儿乙肝疫苗(HepB)规范接种、新生儿HepB全程接种占比均更低;多因素Logistic回归分析结果显示,孕妇HBeAg阳性、新生儿HepB未规范接种、新生儿HepB未全程接种、孕妇HBV-DNA水平>2×10^(5) IU/mL均为HBsAg阳性孕妇母婴阻断失败的独立危险因素(均P<0.05)。结论影响HBsAg阳性孕妇母婴阻断失败的危险因素主要有孕妇HBeAg阳性、新生儿HepB未规范接种、新生儿HepB未全程接种、孕妇HBV-DNA水平>2×10^(5) IU/mL等,应对存在此类因素的孕妇予以重点关注并实施相应干预措施,以提高母婴阻断成功率,进而改善新生儿预后。

鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原含量检测方法的建立及验证

目的建立鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)含量检测方法,并进行验证。方法通过对壳聚糖酶的处理条件(反应温度、酶浓度和酶解时间)进行优化,建立鼻腔喷雾型重组乙肝疫苗中HBsAg含量检测方法,并对该方法进行特异性、线性范围、准确度、精密度(重复性、中间精密度)及耐用性验证。结果确定壳聚糖酶处理条件为:2 U/ml的壳聚糖酶于37℃水浴中孵育60 min,然后采用基于化学发光法的试剂盒定量检测HBsAg含量。壳聚糖酶的加入不会对疫苗中HBsAg含量检测产生干扰;HBsAg浓度在1.25~160 ng/ml之间与发光值具有良好的线性(r2≥0.95);高、中、低浓度疫苗的平均回收率分别为100.18%、103.54%和113.88%;重复性及中间精密度验证结果的变异系数(CV)均≤20%;壳聚糖酶浓度在1.5~2.5 U/ml之间以及酶解时间为60 min,测定值CV均符合≤20%的验证审定标准。结论建立了鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中HBsAg含量检测方法,该方法具有良好的特异性、准确度、精密度及耐用性,可用于该疫苗的质量控制。

中药联合干扰素对慢性乙肝患者血清乙肝表面抗原及乙肝病毒e抗原影响的系统评价

目的系统评价中药联合干扰素对慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清乙肝表面抗原(HBsAg)及乙肝病毒e抗原(HBeAg)的影响。方法根据系统评价的原则制定检索策略,收集符合纳入标准的文献,提取数据并应用RevMan 4.2软件进行分析。结果最终筛选出9篇文献,质量均不高。Meta分析结果显示:中药联合干扰素组的血清HBsAg阴转指标的相对危险度(RR)值为1.63[95%CI(1.04,2.55)],血清HBeAg阴转指标的RR值为1.37[95%CI(1.14,1.64)],与干扰素组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论就阴转血清HBsAg和HBeAg这两个指标来看,中药联合干扰素治疗的效果优于单用干扰素。

乙肝病毒融合表面抗原SA-28基因在酵母中的表达

利用基因工程技术，先将乙肝病毒表面抗原S－preSI融合基因SA－28置于酵母杂合启动子ADH2－SUC2的控制下，然后将SA－28基因的表达单元插入高稳定质粒PHCll的BamHI位点，构建成表达质粒YFD150和YFD150－o，并将其转化酿酒酵母Y19。对转化子表达SA－28基因的研究表明：表达受葡萄糖浓度调控；表达产物具有S和preS1双重抗原性，并形成密度为1．20—1．229／ml的颗粒。

中国肝癌死亡率和乙肝病毒表面抗原携带率的地理分布研究

目的描绘中国肝癌死亡水平地理分布图(未包括香港、澳门和台湾地区)和乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带水平地理分布图,描述中国肝癌死亡水平和HBsAg携带水平的地理分布特征。研究肝癌死亡水平和HBsAg携带水平之间的关系。方法使用全国疾病监测系统的死亡监测数据和全国肝炎血清学流调数据,分别绘出中国疾病监测点的肝癌死亡水平和各省HBsAg携带水平的地理图,比较两者的地理分布,并对各省肝癌死亡率和HBsAg携带率进行相关性检验。绘制监测点不同性别人群的肝癌死亡水平图,揭示不同性别人群的肝癌死亡率和HBsAg携带率的分布特点。结果中国肝癌死亡率和HBsAg携带率均表现为男性高于女性,肝癌死亡率分布特点为东高西低即东部沿海地带为高发区,西部(西北、西南)为低发区,HBsAg携带率的高发区为东南沿海一带以及内陆的西藏和宁夏。两者的地理分布特点有相似性,统计学结果显示肝癌死亡率和HBsAg携带率存在正相关关系。结论中国HBsAg携带率的高低和肝癌死亡率的水平存在相关关系。

MEIA法测定乙肝病毒表面抗原的评价及临床应用

目的 对微粒子酶免疫测定法(MEIA法)检测乙肝病毒表面抗原进行方法学评价并研究低含量乙肝表面抗原人群阳性检出率。方法 采用美国雅培公司的AXSYM型化学发光仪对乙肝病毒表面抗原卫生部质控物、高浓度乙肝病毒表面抗原标本进行稀释测定,同时与ELISA法检测乙肝表面抗原进行比较;对低浓度(HBsAg≤1μg/L)的标本进行中和确证试验与采用PCR-ELISA法定量测定HBV DNA。结果 微粒子化学发光法检测乙肝病毒表面抗原具有较高灵敏度,达0.1μg/L;有较好的重复性和特异性;低浓度(HBsAg≤1μg/L)在人群中分布率为0.53％。结论 微粒子酶免疫法对提高低含量乙肝表面抗原阳性检出率具有重要意义。

乙肝病毒表面抗原基因在人参细胞中的表达

为获得表达乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞系,构建携带HBsAg基因的植物细胞表达载体pBIBSa,采用以农杆菌LBA4404感染的方法,经G418筛选后得到13株具有抗性的人参细胞。提取基因组DNA进行PCR反应,其中8株得到约700bp的HBsAg基因片段;提取mRNA进行RT-PCR反应,其中6株得到约700bp的HBsAg基因片段;用ELISA方法检测HBsAg,6株均为阳性。每克人参细胞中最高含HBsAg184ng,占细胞可溶性蛋白的0.009%。免疫组化切片染色显示HBsAg主要分布在细胞膜上,少量位于细胞核中。这些结果表明人参细胞整合了HBsAg基因,并能稳定表达HBsAg。

PEG沉淀结合层析分离重组乙肝病毒表面抗原

应用聚乙二醇(PEG)沉淀结合层析技术纯化乙肝病毒表面抗原(HBsAg),对PEG浓度、pH值、离子强度等影响PEG沉淀的因素进行了正交实验研究.结果表明,浓度为0.12g/mL的PEG6000在4℃,pH9.0条件下沉淀HBsAg纯化效果比较理想,纯化倍数达3.7,回收率96.8%,有效地去除了生物大分子杂质和牛血清白蛋白(BSA),PEG在后续的凝胶过滤中可以除去,整个工艺的回收率可提高到41%.

乙肝病毒表面抗原基因在花生中的遗传转化及免疫原性检测

首次用花生半胚作为外植体,与农杆菌EHA105(含质粒p1301HBs)共培养5d,再生培养基中通过加入潮霉素进行抗性筛选,得到抗潮霉素的芽,经芽的伸长、诱导生根获得转化植株。经PCR、PCR-Southern杂交、Southern点杂交等分子检测,证实目的基因已整合到花生基因组中,ELISA检测证实了在花生中表达的HBsAg具有较好的活性。经初步定量,花生小芽的蛋白初提液中可溶性蛋白含量1.044g/L,HBsAg小蛋白的含量约占总可溶性蛋白的0.032%,每克转化植株小芽鲜重含HBsAg小蛋白约2.4×10-7g。转基因花生植株初提重组蛋白经HPLC纯化、浓缩后,注射初免一次的小鼠,有明显的特异性抗体产生。口服饲喂已免疫但抗体下降至0.025(HBsAbELISAD值)Balb/c小鼠,发现有较强的抗体回升,达3.54,表明转基因花生疫苗可以加强口服免疫。

表达乙肝病毒融合表面抗原基因SA-28的二倍体酵母工程菌的选育

将乙肝病毒融合表面抗原基因SA28的单倍体酵母工程菌Y19/YFD158和与其不同接合型的单倍体酵母菌Y95接合,筛选到二倍体酵母工程菌Y95xY19/YFD158。对两种工程菌的研究表明:二倍体工程菌发酵密度为单倍体工程菌的3倍;表达质粒在二倍体酵母中的稳定性明显高于单倍体工程菌;二倍体工程菌对融合抗原的表达量为单倍体的3倍以上;表达质粒在二倍体细胞中的平均拷贝数略低于单倍体工程菌。

一种乙肝病毒表面抗原和其单克隆抗体相互作用的SERS研究

利用银纳米粒子的表面增强拉曼散射(SERS)效应,研究了乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和其鼠源单克隆抗体(单抗,Ab HBsAg)的相互作用.SERS光谱结果表明,Ab HBsAg分子主要通过位于非抗原结合部位的去质子化羧基(COO-)实现与银纳米粒子的结合.HBsAg与Ab HBsAg相互作用形成免疫复合物后,HBsAg分子上的色氨酸(Trp)残基特征振动完全消失,表明Trp残基位于HBsAg抗原分子的活性区,是HBsAg与Ab

小鼠重组乙肝病毒表面抗原鼻腔黏膜免疫效果评价

目的评价小鼠重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)鼻腔黏膜免疫效果,寻找非注射乙肝免疫途径。方法 Balb/c小鼠分别经鼻腔、舌下及肌注给予重组HBsAg免疫3次,以支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清抗HBsAg抗体水平评价3种途径的免疫效果。结果经鼻腔免疫小鼠BALF可检测到IgA抗体,提示产生黏膜免疫;与肌注免疫类似,经鼻腔免疫小鼠血清IgG滴度大于1:500,提示产生体液免疫。结论重组HBsAg经鼻腔免疫小鼠可同时产生体液免疫和黏膜免疫,提示鼻腔黏膜免疫可能是有效的非注射乙肝免疫途径。

乙肝表面抗原阴性恶性肿瘤患者化疗后乙肝病毒再激活的影响因素

目的探讨乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBs Ag）阴性恶性肿瘤患者化疗后乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）再激活的相关危险因素。方法收集2006-01至2014-12在武警上海总队医院接受化疗的HBs Ag阴性恶性肿瘤患者570例。根据化疗后HBV是否出现再激活将患者分为再激活组25例及未被激活组545例,回顾性分析两组患者一般情况、化疗方案及实验室检查指标,对HBV再激活的潜在影响因素进行χ^2检验及Logistic回归分析。结果单因素分析表明两组患者在性别、乙肝表面抗体状态、e抗体状态、核心抗体状态及是否使用免疫抑制药方面差异有统计学意义（P〈0.05）,将其纳入多因素非条件Logistic回归分析,结果提示男性（OR=7.700,P〈0.001）、乙肝表面抗体阴性（OR=0.056,P〈0.001）、核心抗体阳性（OR=4.670,P〈0.01）及使用免疫抑制药（OR=7.978,P〈0.01）是导致化疗后HBV再激活的独立危险因素。结论对于男性、乙肝表面抗体阴性、核心抗体阳性及使用免疫抑制药的HBs Ag阴性的恶性肿瘤患者行化疗时,应密切监测HBV是否出现再激活或及早采取抗病毒治疗防止HBV再激活。

乙肝病毒表面抗原preS1与人肿瘤坏死因子α融合基因的表达

用ＰＣＲ法获得了ＨＢｓＡｇｐｒｅＳ１（１－６５）肽段基因，将该基因融合在肿瘤坏死因子（ｈＴＮＦα）之后，插入表达载体ＰＳＢ－９２中，使融合基因的５′端直接置于大肠肝菌ＰＬ启动子下游，采用３０℃培养，４２℃诱导，获得了ＴＮＦ与ｐｒｅＳ１（１－６５）融合蛋白的表达产物。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示表达产物为２５ｋＤ，约占细菌总蛋白的３５％。表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ验证，能分别特异地与ｈＴＮＦα抗体与ｐｒｅＳ１抗体结合，稀释复性后，该融合蛋白还具有ＴＮＦ的生理功能（对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性）。经ＤＮＡ序列测定，ｐｒｅＳ１（１－６５）肽基因正确地融合在ｈＴＮＦα基因之后。该结果提供了一种制备ｐｒｅＳ１的新方法，为进一步开展治疗肝癌和乙肝的导向药物打下基础。

表达乙肝病毒表面抗原人参细胞系统的建立

目的建立乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统。方法构建含有HBsAg基因的植物细胞表达载体质粒pBIBSb。采用农杆菌感染人参细胞的方法,经农杆菌培养、农杆菌与受体细胞共培养、受体细胞的脱菌培养以及转化体细胞的选择培养后,筛选在G418抗生素培养基上正常生长的细胞株。应用ELISA方法检测抗性细胞株的HBsAg表达;提取基因组DNA进行PCR扩增反应。结果质粒pBIBSb的酶切结果正确。经G418抗生素筛选得到8株正常生长的细胞株,其中5株能够表达HBsAg,提取基因组DNA进行PCR扩增反应,得到大小约700 bp的扩增片段。结论获得了整合HBsAg基因,并能够稳定表达HBsAg的人参细胞表达系统。

乙肝肝硬化患者血清乙肝病毒表面抗原定量水平的研究

目的分析不同Child-pugh分级的乙肝肝硬化患者血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)定量检测水平及其在各组间与HBV DNA含量之间的相关性。方法收集乙肝肝硬化患者血清,其中Child-pugh A级38例,B级46例,C级35例,采用雅培化学发光法进行HBsAg定量测定,采用荧光PCR定量法检测HBV DNA含量。结果 HBsAg定量值分别为Child-pugh A级[997.70(146.00～1717 12)IU/mL],Child-pugh B级[1158.78(345.82～1889.93)IU/mL],Child-pugh C级[613.76(120.78～1528 77)IU/mL],三组比较差异无统计学意义(P=0.464)。HBsAg定量与HBV DNA相关性分析:HBsAg定量水平、HBV DNA含量在乙肝肝硬化患者总体中呈正相关(r=0.353,P=0.000),其中Child-pugh A级相关性最高(r=0.410,P=0.011),Child-pugh B级次之(r=0.366,P=0.012),Child-pugh C级则无相关性(r=0.293,P=0.088)。在各组中HBsAg定量水平与ALT、AST和TBIL均无相关性。结论不同Child-pugh分级的乙肝肝硬化患者之间血清HBsAg定量水平无差异;HBsAg定量水平与HBV DNA在Child-pugh A级、B级组具有正相关性,C级组无相关性。

36175例高考学生血清谷丙转氨酶与乙肝病毒表面抗原检测结果分析

目的了解近几年高考体检中学生谷丙转氨酶(ALT)及乙肝病毒表面抗原(HBsAg)结果变化状况。方法用ELISA法进行血清HBsAg检测,ALT采用速率法测定,40U/L以上者为异常。结果36175名学生HBsAg阳性,阳性率6.3%,并呈逐年下降的趋势,各年度间差异比较有显著性意义(P<0.05);其中城区学校学生HBsAg阳性率5.54%,镇区学校学生HBsAg阳性率7.03%,差异有显著性意义(P<0.05)。结论要加强儿童乙型肝炎疫苗接种,尤其是镇区学校和外来工子女学生。