高职院校医学专业大学生乙肝表面抗原阳性携带率分析

目的通过检测某职业院校医学专业大学生乙型肝炎病毒(HBV)携带状况,分析乙肝表面抗原阳性的影响因素。方法针对某高职院校4 407名医学专业大二年级学生,用免疫胶体金试纸法测定其血液HBsAg标志物,通过Matlab 7.0软件进行统计分析。结果来自农村的学生乙肝表面抗原(HBsAg))阳性携带率明显高于城市学生(P<0.05);男生HBsAg携带率高于女生(P<0.05);母亲在孕育该生期间有乙型病毒性肝炎病史的,该生乙肝表面抗原(HBsAg)阳性携带率高于母亲健康的学生(P<0.05)。结论高职院校医学专业大学生乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性与乙肝疫苗接种、性别、母婴传播相关。

量子点与抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体的偶联研究

表面带羧基的量子点(QD)在活化剂作用下与羊抗HBsAg共价偶联。本研究考察了4种不同封闭剂[乙醇胺(EA)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、氨基聚乙二醇单甲醚(PEG2000-NH2)和牛血清蛋白(BSA)]对制备得到的量子点-抗体复合物(QD-Ab)的影响。使用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析复合物的电泳和粒径特征,斑点免疫杂交反应比较不同封闭剂制备的复合物的免疫特性。结果表明:量子点可以与HBsAg抗体共价偶联形成QD-Ab复合物,斑点免疫反应表明其中PEG2000-NH2封闭的复合物免疫特性较优,可以检测到1.57 ng的HBsAg斑点。

赤水市学生人群乙肝表面抗体监测结果分析

目的掌握赤水市学生人群接种乙肝疫苗的乙肝表面抗体产生情况,为开展乙肝疫苗接种提供科学依据。方法对全市中小学校内7-16岁学生,采集血样,应用胶体金法检测抗-HBs。结果实际检测人数2 906例,抗-HBs检出485例,抗体产生率为16.7%。结论赤水市乙肝表面抗体产生率较低,应对乙肝疫苗接种后免疫效果进行监测,提高乙肝疫苗接种效果。

抗乙型肝炎表面抗原Fab片段联合抗细胞核单抗为载体的肝癌放射免疫治疗实验研究

目的探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAgFab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供实验依据。方法荷瘤裸鼠分为五组,分别瘤内注射131I-抗HBsAgFab、131I-chTNT、131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT、131I-无关抗体(131I-IgG)及PBS。治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并测量肿瘤大小变化,计算肿瘤抑制率。结果研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为73.09%,明显高于131I-抗HBsAgFab组的47.8%和131I-chTNT组的54.26%。联合应用组标记抗体在肿瘤组织/非肿瘤组织内的放射活度比值(T/NT值)大于单独应用组。结论131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚,并能提高放射免疫治疗效果。

人源抗-HBs Fab优化表达条件的初步探讨

目的 利用含重组质粒pBAD/HBsFab的Top10大肠杆菌 ,优化表达人源抗 HBsFab。方法 选取含pBAD/HBsFab载体的Top10大肠杆菌单个克隆分级培养 ,将制备的二级种子液接种于摇瓶和KLF2 0 0 0发酵罐中 ,摇瓶培养表达采用不同的菌体诱导起始密度、诱导剂浓度、诱导表达温度和诱导表达时间。发酵罐培养表达采用不同的培养基和菌体诱导起始密度。诱导表达完毕后 ,纯化蛋白 ,比较表达量 ,并鉴定所获蛋白的抗原性和生物学活性。结果 用摇瓶优化表达后 ,Fab蛋白占菌体总蛋白的 6 % ,为 0 .8mg/g菌体 ,利用发酵培养可进一步增加菌量 ,使蛋白表达量达 80mg/L。所获蛋白经鉴定显示有较好的生物学活性。结论 用重组质粒pBAD/HBsFab ,Top10表达系统 ,可得到 80mg/L的具有较好生物学活性的人源抗 HBsFab蛋白 。

人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白制备和纯化

目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆菌落,通过制备一级及二级种液,按比例加入5L发酵罐中进行发酵,发酵过程中在菌体起始密度、诱导剂加入时机、诱导时间以及诱导温度等条件探索成熟的基础上,采用50L大型发酵罐进行批量发酵。所获菌体蛋白通过饱和硫酸铵粗提和Ni-NTA金属螯和层析获得较纯的表达产物,比较表达量,鉴定纯化后蛋白的抗原活性及生物学活性。结果:用5L及50L发酵罐能获得较高蛋白产量的大肠杆菌,经饱和硫酸铵粗提及Ni-NTA金属螯和层析纯化后可获得抗原性及生物学活性较好的抗体片段。结论:发酵罐发酵大肠杆菌,产量高,所获蛋白含量活性较稳定,为批量生产作了准备。

藻胆蛋白与单克隆抗体交联试剂的探索

目的选取浓度适宜的异双功能试剂用于藻胆蛋白荧光标记物的制备。方法选用 SPDP、SMCC及 2 - IT分别对 R-藻红蛋白和抗乙肝病毒表面抗原单克隆抗体进行处理 ,研究了不同浓度异双功能试剂对 R- PE荧光特性和 Ig G活性的影响。结果从保持 R- PE荧光特性和 Ig G活性的角度 ,异双功能试剂在修饰 R- PE或 Ig G时存在一个最佳浓度 :SPDP摩尔浓度小于 1.6 6 7m mol/ L ,SMCC摩尔浓度小于 0 .6 6 7m mol/ L ,2 - IT摩尔浓度小于 12 .5 mm ol/ L较适宜。结论须进一步考证异双功能试剂浓度对交联效率及交联物质量的影响以确定最佳的异双功能试剂组合及浓度。

IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4对乙型肝炎的诊断价值

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、乙型肝炎病毒表面抗原抗体(Anti-HBs)以及微环境因子白细胞介素-4(IL-4)对乙型肝炎的诊断价值,以期为临床治疗提供参考。方法本研究选择大连市第五人民医院2019年2月—2022年2月收治的71例乙型肝炎患者作为研究组研究对象,另选同期于该院进行体检的50例健康个体为对照组研究对象。比较2组研究对象IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平;采用绘制ROC曲线的方式分别计算IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平对乙型肝炎的诊断效能;通过Pearson相关分析探究乙型肝炎患者IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平的相关性。结果研究组患者IGF-Ⅰ及IL-4水平均高于对照组,而Anti-HBs水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。分别绘制IGF-Ⅰ、AntiHBs及IL-4水平诊断乙型肝炎的ROC曲线,结果显示IGF-Ⅰ、Anti-HBs及IL-4水平诊断乙型肝炎的AUC分别为0.9133(P<0.001)、0.9500(P<0.001)、0.7067(P=0.006)。Pearson相关分析结果显示,乙型肝炎患者IGF-Ⅰ、AntiHBs及IL-4呈明显相关性,其中IGF-Ⅰ与Anti-HBs呈负相关关系(r=-0.5363,P<0.001),与IL-4呈正相关关系(r=0.2826,P<0.001),Anti-HBs与IL-4呈负相关关系(r=-0.2408,P<0.001)。结论IGF-Ⅰ、Anti-HBs以及IL-4水平在乙型肝炎患者中呈现异常表达状态,且相互之间存在明显的相关性,可以考虑将它们应用于乙型肝炎的鉴别诊断中。

原发性肝脏鳞状细胞癌合并肝内胆管结石1例

1病历资料患者女性,61岁,因'发热1周'于2013年5月29日入院。30年前因'胆结石'行胆囊切除术,有'左右肝内胆管结石'病史10年。入院时体温40.0℃,畏寒,寒战。乙肝三系:乙肝表面抗原(H B s A b)、核心抗原(HBcAb)阳性。甲肝抗体、丙肝抗体、丙肝抗原阴性。肿瘤标志物CA199(稀释):2793.0U/ml。降钙素6.35ng/ml。

1338名中学生乙型肝炎病毒感染标志物调查分析

为了解学生乙肝病毒感染情况，１９９７年我们结合学生健康体检，对汕头市金园职业学校学生进行乙型肝炎标志物检测，现将结果分析如下：１对象和方法１１调查对象汕头市金园职业学校各年级学生。１２实验方法对体检学生，每人采集３ｍｌ静脉血样分离血清待测；用ＥＬ...

量子点标记快速免疫检测技术的研究

目的自制发光材料量子点,优化量子点与抗体的偶联方案,并对制备的量子点标记抗体进行免疫检测的可行性研究。方法采用高温热分解法制备得到镉硒(CdSe)量子点,用还原型谷胱甘肽(GSH)对量子点表面改性,使用双功能聚乙二醇(PEG)交联量子点表面的GSH,得到表面PEG化的水溶性量子点,该物质稳定性好。用抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体与量子点共价交联,采用斑点免疫反应验证HBsAg检测的可行性。结果成功制备量子点及其抗体标记物,检测HbsAg的敏感性可达1.6 ng/mL水平。结论量子点标记免疫检测呈现技术优势,有广阔的发展与应用前景。

樟树市2011年学龄前儿童乙型肝炎疫苗免疫接种效果分析

目的了解樟树市2011年学龄前儿童按0、1、6免疫程序接种乙型肝炎疫苗3剂后的乙肝免疫水平,为进一步做好乙肝防治工作提供依据。方法采用随机抽样的方法。以2011年樟树市疾病预防控制中心门诊(按0、1、6免疫程序接种乙型肝炎疫苗3剂)完成乙型肝炎疫苗接种的1 422名儿童作为研究组,以2000年在樟树市疾病预防控制中心门诊已预防接种乙型肝炎疫苗的1 629名儿童作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法、使用酶标分析仪检测2组儿童乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和抗乙肝病毒表面抗体(Anti-HBs)水平。结果 1 422名儿童中,Anti-HBs阳性率为83.68%(1 190/1 422)。<1岁儿童Anti-HBs阳性率为95.14%(196/206),最高;≥4～6岁儿童Anti-HBs阳性率为67.36%(291/432),最低;<1、≥1～<2、≥2～<4岁儿童Anti-HBs阳性率均显著高于≥4～6岁儿童(均P<0.05)。男性Anti-HBs阳性率与女性比较差异无统计学意义(P>0.05),城区儿童Anti-HBs阳性率显著高于农村儿童(P<0.05),已加强乙型肝炎疫苗接种儿童Anti-HBs阳性率显著高于未加强乙型肝炎疫苗接种儿童(P<0.05),研究组男、女性Anti-HBs阳性率均显著高于对照组(均P<0.05)。研究组男、女性HBsAg阳性率均显著低于对照组(均P<0.05),研究组男性Anti-HBs、HBsAg阳性率与对照组女性比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。研究组接种乙型肝炎疫苗的儿童Anti-HBs阳性率显著高于对照组(P<0.05),HBsAg阳性率显著低于对照组(P<0.05)。结论 Anti-HBs阳性率有随年龄增长而呈显著下降趋势,农村儿童Anti-HBs阳性率明显较城区儿童低。做好儿童乙肝表面抗体监测,适时加强乙型肝炎疫苗接种,可减少乙肝感染机会,保护儿童健康。

用噬菌体蛋白Ⅸ展示抗HBsAg分子Fab段

目的 用丝状噬菌体外壳蛋白Ⅸ (pⅨ )展示抗体Fab段 ,并与外壳蛋白Ⅲ (pⅢ )展示效果进行比较。方法 采用PCR方法钓取噬菌体蛋白Ⅸ基因 ,构建pⅨ展示抗乙肝表面抗原Fab的表达载体 ,制备噬菌体抗体 ,鉴定其抗原结合活性和Fab呈现水平 ,观察了噬菌体洗脱回收效率 ,并与pⅢ展示进行比较。结果 噬菌体pⅨ可以展示有功能活性的抗体Fab段 ,但对Fab的展示率低于pⅢ ,展示率的高低可能与pⅨ展示的外源蛋白分子量大小有关。“结合 洗脱 回收”实验显示 ,酸洗脱法回收的Fab pⅢ噬菌体的感染活性大为下降 ,而对Fab pⅨ噬菌体无影响。结论 pⅨ成功展示Fab段 。

5985名学生乙肝疫苗接种后免疫效果分析

目的探讨中小学生乙肝疫苗接种后免疫应答状况,为制定有效的乙肝预防措施提供科学依据。方法应用ELISA法测定中、小学生血清三项乙肝感染标志(HBsAg、HBeAg、HBeAb),对三项标志全阴性者再应用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)测定血清二项感染标志(HBsAb、HBcAb)。结果血清三项感染标志(HBsAg、HBeAg、HBeAb)全阴性者其HBsAb阳性率为81.27%,中学生阳性率为80.27%,小学生阳性率为82.50%,差异有统计学意义(χ2=4.82,P<0.05)。HBsAb有应答者HBcAb阳性率为5.12%,中学生阳性率为8.82%,小学生阳性率为0.68%,差异有非常显著性(χ2=164.58,P<0.01)。HBsAb无应答者HBcAb阳性率为21.14%,中学生阳性率为19.73%,小学生阳性率为7.68%,差异有非常显著性(χ2=87.70,P<0.01)。HBsAb有应答者和HBsAb无应答者其HBcAb阳性率差异有非常显著性(χ2=313.48,P<0.01)。结论该地区学生HBsAb阳性率较低,免疫效果不理想,小学生HBsAb阳性率较高,中学生HBcAb阳性率较高,提示学生中乙肝疫苗接种需加强和改进。

新生儿接种5微克重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)的免疫应答及其影响因素研究

目的了解新生儿常规接种5微克(μg)重组乙型肝炎(乙肝)疫苗(酿酒酵母)[Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant Dexyribonucleic Acid(DNA)Techniques inSaccharomyces CerevisiaeYeast,HepB-SCY]后,抗乙肝病毒表面抗原抗体[Antibody to Hepatitis B Virus(HBV)Surface Antigen(HBsAg),Anti-HBs]的应答状况,并分析其影响因素。方法在山东省4个市选取7～12月龄、已按0、1、6个月免疫程序接种3剂5μg HepB-SCY的健康婴儿4147人,对其进行问卷调查并采集静脉血,采用化学发光微粒子免疫分析法定量检测Anti-HBs,计算抗体应答率和抗体水平,分析与抗体应答有关的因素。结果新生儿常规接种3剂5μgHepB-SCY后,Anti-HBs无应答[<10毫国际单位/毫升(mIU/ml)、且HBsAg及HBV-DNA(脱氧核糖核酸)均阴性]率为1.91%,低应答(≥10mIU/ml、但<100mIU/ml)率为17.31%,正常应答(≥100mIU/ml、但<1000mIU/ml)率为63.75%,高应答(≥1000mIU/ml)率为17.04%;Anti-HBs平均浓度为303.30mIU/ml。多因素分析表明,采血月龄延后、低出生体重、在乡级医院出生、母亲分娩前HBsAg阳性与新生儿低/无应答发生有关。结论新生儿采用5μg HepB-SCY初免后,可获得较好的Anti-HBs应答,新生儿HepB免疫应答受多种因素影响。