量子点与抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体的偶联研究

表面带羧基的量子点(QD)在活化剂作用下与羊抗HBsAg共价偶联。本研究考察了4种不同封闭剂[乙醇胺(EA)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、氨基聚乙二醇单甲醚(PEG2000-NH2)和牛血清蛋白(BSA)]对制备得到的量子点-抗体复合物(QD-Ab)的影响。使用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析复合物的电泳和粒径特征,斑点免疫杂交反应比较不同封闭剂制备的复合物的免疫特性。结果表明:量子点可以与HBsAg抗体共价偶联形成QD-Ab复合物,斑点免疫反应表明其中PEG2000-NH2封闭的复合物免疫特性较优,可以检测到1.57 ng的HBsAg斑点。

儿童乙肝疫苗接种两年内血清中抗-HBs水平调查

为研究与掌握乙肝血源疫苗的免疫效果,产生的抗-HBs在血清中的变化规律,我们于1991年9月对我市托幼机构内348名接种乙肝血源疫苗0～2年的儿童进行了抗-HBs水平调查,现报告如下。 1 材料与方法:乙肝血源疫苗由卫生部北京生物制品研究所生产。免疫接种程序及疫苗接种剂量均按照疫苗使用说明进行。采静脉血,分离血清,检测表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗—HBs)。检测方法:RIA法。检测试剂由卫生部北京生物制品研究所生产。

抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体国产ELISA试剂评价

目的 评价 6种国产抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体 (抗 HBs)酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒。方法 将RocheElecsys 2 0 10电化学发光免疫分析系统上检测余留的抗 HBs标本 ,用 6种国产抗 HBsELISA试剂盒进行检测 ,评价 6种试剂盒的敏感度、检测范围、精密度和特异性。结果 6种国产试剂盒的敏感度相差较大 ,10～ 4 0IU/L不等。 5 0IU/L以下时 ,浓度与吸光度呈直线关系 ,但吸光度数值较低 ;未发现高浓度时的钩状效应。 5 0IU/L的标本 ,A、B 2种试剂的批内变异系数 (CV)分别为 10 .1%和 13.7% ;日间CV分别为 14 .1%和2 4 .8% ;阴性标本在 6种试剂盒中出现了不同程度的假阳性。结论 国产抗 HBsELISA试剂的部分性能应改进和提高。

新疆新源县978例哈萨克族牧民乙肝表面抗原和表面抗体阳性率调查分析

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种世界性传染病,主要经血和血制品、母婴、经破损的皮肤和黏膜及性传播[1]。乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性是人体感染乙型肝炎病毒的重要标志;乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）阳性说明体内有抗乙肝病毒抗体,

人源抗-HBs Fab优化表达条件的初步探讨

目的 利用含重组质粒pBAD/HBsFab的Top10大肠杆菌 ,优化表达人源抗 HBsFab。方法 选取含pBAD/HBsFab载体的Top10大肠杆菌单个克隆分级培养 ,将制备的二级种子液接种于摇瓶和KLF2 0 0 0发酵罐中 ,摇瓶培养表达采用不同的菌体诱导起始密度、诱导剂浓度、诱导表达温度和诱导表达时间。发酵罐培养表达采用不同的培养基和菌体诱导起始密度。诱导表达完毕后 ,纯化蛋白 ,比较表达量 ,并鉴定所获蛋白的抗原性和生物学活性。结果 用摇瓶优化表达后 ,Fab蛋白占菌体总蛋白的 6 % ,为 0 .8mg/g菌体 ,利用发酵培养可进一步增加菌量 ,使蛋白表达量达 80mg/L。所获蛋白经鉴定显示有较好的生物学活性。结论 用重组质粒pBAD/HBsFab ,Top10表达系统 ,可得到 80mg/L的具有较好生物学活性的人源抗 HBsFab蛋白 。

红谷滩新区入托儿童HBsAg、抗-HBs检测结果分析

我省是乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）的高流行区，随着我国计划免疫工作的发展．乙肝已经列为计划免疫重点控制的疾病之一．乙肝控制已经取得显著成效．主要表现为乙肝表面抗原（HBsAg）携带率．HBV感染均有不同程度的下降。为了解红谷滩新区入托儿童HBsAg感染现状和乙肝免疫水平．为今后开展乙型肝炎防治工作提供科学依据．于2007年度对该区16所幼儿园入托儿童．3042人进行HBsAg和抗-HBs检测．现将结果报告如下。

208例乙型肝炎表面抗体与其他乙型肝炎病毒血清标志物同时阳性结果分析

目的:对比ELISA检测结果与HBV- DNA定量结果,分析乙型肝炎表面抗体(抗HBs)与其他乙型肝炎病毒血清标志物(HBV M)同时阳性的几种模式。方法:采用ELISA方法检测HBV M,荧光定量PCR(FQ PCR)检测HBV DNA含量。结果:HBsAg、HBeAg、抗HBc、抗HBs(+)模式30例,HBV- DNA阳性28例(93.33%)。HB -sAg、抗HBe、抗HBc、抗HBs(+)模式28例,HBV -DNA阳性3例(10.71%)。HBsAg、抗HBc、抗HBs(+)模式22例,HBV- DNA阳性11例(50.0%)。结论:同时检测HBV- M和HBV- DNA对乙型肝炎的诊断,治疗有重要意义。

1～5岁儿童HBsAg和抗-HBs调查

目的 了解咸宁市1～5岁儿童乙肝表面抗原和乙肝表面抗体情况。方法 用酶联免疫(ELISA)进行检测。结果1～5岁儿童HBsAg阳性率为0.49%,接种疫苗1年的幼儿抗-HBs阳性率为对71.74％,以后随接种年数的增长抗-HBs阳性率下降趋势明显。在抗-HBs阳性的儿童中有31.58％的儿童阳转率处于弱阳性状况。结论 应根据抗-HBs检测结果,及时给予乙肝疫苗补种和加强。

接种乙肝疫苗不产生抗体怎么办

接种乙型肝炎疫苗是预防乙肝病毒（HBV）感染的最有效方法。我国已将乙型肝炎疫苗纳入儿童计划免疫程序。该疫苗接种成功的标志是乙肝表面抗体（抗－HBs）转为阳性。可是，经常会出现这种情况：有些朋友接种了疫苗，但几个月后复查血清乙肝病毒五项指标（俗称两对半），抗－HBs始终不产生。

HVI:儿童接种3针乙肝疫苗后诱导的抗-HBV持续达10年

接种乙肝疫苗后产生的抗-HBs对机体有保护作用。德国学者Behre等的研究显示,这一保护性抗体的维持时间至少长达10年。研究者们分别测试了两组人群的血清抗-HBs滴度：7～8岁儿童组（代表接种疫苗后5年）和12～13岁少年组。

龙口市学龄前儿童HBsAg、抗-HBs抽样调查

[目的 ]了解龙口市学龄前儿童乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)携带情况和乙型肝炎表面抗体 (抗 HBs)水平。[方法 ] 2 0 0 2年 4～ 9月 ,随机抽取龙口市城乡 495 5名 1995～ 2 0 0 1年出生的儿童 ,检测血清HBsAg和抗 HBs。[结果 ]HB sAg携带率为 0 5 9%;抗 HBs阳性率为 3 2 5 9%,其中乡镇儿童为 3 6 2 0 %,城区儿童为 2 9 80 %;1岁组为 81 0 0 %,3岁组为 16 95 %,加强接种 1针乙肝疫苗的为 3 7 85 %,未加强接种的为 10 95 %。 [结论 ]学龄前儿童HBsAg携带率较低 ,加强接种乙肝疫苗可以提高抗

在120—123位点上的氨基酸残基对于乙肝病毒表面抗原的抗原性非常重要

乙肝病毒表面抗原（HBsAg）主要的亲水性区域（MHR）隐匿着B细胞决定簇且是抗-HBs中和抗体的主要靶位。具有氨基酸置换（如已知的G145R）的突变体HBsAg（mtHBsAg）可影响特异性抗-HB抗体结合并且可通过常规诊断性试验来检测。在本项研究中，工作人员集中探讨氨基酸位点120—123的作用，依照光谱的鉴定在MHR2周围很自然地出现mtHBsAg。惊人的是，到目前为止在所有免疫试验中发现氨基酸置换K122I可取消HBsAg的反应性，

抗乙型肝炎表面抗原Fab片段联合抗细胞核单抗为载体的肝癌放射免疫治疗实验研究

目的探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAgFab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供实验依据。方法荷瘤裸鼠分为五组,分别瘤内注射131I-抗HBsAgFab、131I-chTNT、131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT、131I-无关抗体(131I-IgG)及PBS。治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并测量肿瘤大小变化,计算肿瘤抑制率。结果研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为73.09%,明显高于131I-抗HBsAgFab组的47.8%和131I-chTNT组的54.26%。联合应用组标记抗体在肿瘤组织/非肿瘤组织内的放射活度比值(T/NT值)大于单独应用组。结论131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚,并能提高放射免疫治疗效果。

乙肝病毒前S/S抗原的重组表达质粒对HBV转基因小鼠的免疫治疗效应

目的:观察重组表达质粒pcDNA3.1-S2S和pcDNA3.1-S1S2S对HBVDNA复制和抗原表达的抑制效果.方法:以能表达乙肝表面抗原主蛋白S(HBsAg)的重组真核表达质粒为骨架,构建了分别含有HBV前S1抗原和/或前S2抗原编码基因的pcDNA3.1-S1S2S,pcDNA3.1-S2S,并各以100μg肌肉接种C57BL/6HBVDNA转基因小鼠,2,4wk后各加强免疫1次.然后动态检测小鼠血清HBVDNA水平的变化、抗-HBs和前S2抗体的诱生,以及肝组织内HBsAg、前S2抗原的消长情况.结果:小鼠肝组织内HBsAg,前S2抗原呈逐渐减弱的趋势,8wk后各有1/3的小鼠已不能检出.pcDNA3.1-S1S2S组接种后4,8,12wk抗-HBs阳转率分别为50%、67%、100%,明显高于pcDNA3.1-S2S组(17%、33%、50%)(P<0.05);而前S2抗体阳转率均低于17%.接种后8wk,12wk,pcDNA3.1-S1S2S组和pcDNA3.1-S2S组小鼠血清HBVDNA水平明显下降,均低于自身接种前、接种后4wk以及同期对照组(P<0.05).结论:重组表达质粒pcDNA3.1-S2S和pcDNA3.1-S1S2S接种,能够抑制转基因小鼠体内的HBV复制,而重组质粒中S1基因的共表达使抑制作用得到增强.

人源性抗HBc单链噬菌体抗体库的构建

利用 RT-PCR 和噬菌体表面展示技术,直接从乙肝病毒核心抗体(抗 HBc)阳性患者淋巴细胞中提取总 RNA,反转录成 cDNA;合成全套人抗体可变区引物扩增抗体可变区基因,并将重、轻链可变区基因进行拼接装配成单链抗体(ScFv)基因,重组于噬菌粒载体 pHEN1,转化抑制型大肠杆菌 E.coliTG1,以辅助噬菌体援救后,构建成人源性单链噬菌体库。库容量达106。