乙肝表面抗原/梅毒联合检测试纸条在血液筛查中的应用研究

2010年全球乙型肝炎（简称＂乙肝＂）表面抗原阳性人数约有2.48亿,已成为全球性重大公共卫生问题,其中我国所占比例为45%。我国梅毒疫情在甲乙类传染病发病中排序仅次于乙肝。血液传播是乙肝与梅毒最常见的传播途径,因此在献血前对血液进行严格有效的筛查可以降低乙肝与梅毒的感染率。笔者通过采用乙肝表面抗原（HBsAg）/梅毒联合检测试纸条对血液样本的检测,发现可有效提高HBsAg、梅毒的检出率，现报道如下。

梅毒螺旋体和乙肝表面抗原检测中阳性拖带现象与钩状效应的关系

目地探讨采用一步法检测梅毒螺旋体和乙肝表面抗原并发生阳性拖带现象时是否存在钩状效应。方法将出现阳性拖带现象的第一个阳性孔标本及反应板上其对应位置的前一个标本各34例分成Ⅰ、Ⅱ两组,分别用一步法和二步法进行复检,并将一步法阴性而二步法阳性的标本进行倍比稀释后用一步法检测,直至检出阳性。结果复检后,Ⅰ组34例标本有5例为阴性,Ⅱ组中有4例因钩状效应呈假阴性,并且这4例标本造成阳性拖带现象。结论采用酶联免疫反应(ELISA)一步法检测时可因钩状效应使强阳性标本漏检,如果用固定加样针加样还可能造成交叉污染使其后的标本出现阳性拖带。

酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原不同程度乳糜血对其的干扰分析

目的:分析不同程度乳糜血浆乙肝表面抗原(HBsAg)检测结果的干扰,探讨乳糜血浆检测结果的可靠性。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测乳糜血浆中HBsAg。结果:不同乳糜指数血浆HBsAg检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同乳糜程度血浆放置时间不同,HBsAg检测结果有区别,乳糜指数≤3的乳糜血浆5 d内检测,差异无统计学意义(P>0.05),乳糜指数为4、5、6、8及>8的乳糜血浆在第3 d检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度乳糜血浆HBsAg检测结果无影响,轻度乳糜血浆样本放置5 d内检测HBsAg结果无差异,中度及重度乳糜血浆样本必须3 d内完成检测。

输血前乙肝表面抗原、丙肝病毒抗体、艾滋病病毒抗体、梅毒反应素等输血传染病因子检测临床分析

选取2011年1月~2014年4月我院输血患者100例，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测输血患者的HB-SAg、抗-HVC、HIV等各项指标，梅毒抗体采用甲苯胺红不加热试验进行筛选，结果呈阳性再用TPPA复查。结果患者HBSAg、抗-HVC、梅毒抗体的阳性率分别为13.00%、2.00%以及1.00%，HIV检查结果中未发现阳性患者。输血前对血液中传染病因子进行临床检测能有效控制疾病传染，保证输血者的安全和健康，提高输血的成功率。

乙肝病毒表面抗原基因在花生中的遗传转化及免疫原性检测

首次用花生半胚作为外植体,与农杆菌EHA105(含质粒p1301HBs)共培养5d,再生培养基中通过加入潮霉素进行抗性筛选,得到抗潮霉素的芽,经芽的伸长、诱导生根获得转化植株。经PCR、PCR-Southern杂交、Southern点杂交等分子检测,证实目的基因已整合到花生基因组中,ELISA检测证实了在花生中表达的HBsAg具有较好的活性。经初步定量,花生小芽的蛋白初提液中可溶性蛋白含量1.044g/L,HBsAg小蛋白的含量约占总可溶性蛋白的0.032%,每克转化植株小芽鲜重含HBsAg小蛋白约2.4×10-7g。转基因花生植株初提重组蛋白经HPLC纯化、浓缩后,注射初免一次的小鼠,有明显的特异性抗体产生。口服饲喂已免疫但抗体下降至0.025(HBsAbELISAD值)Balb/c小鼠,发现有较强的抗体回升,达3.54,表明转基因花生疫苗可以加强口服免疫。

乙肝表面抗原双试剂阳性HBV-DNA核酸检测阴性结果分析

目的通过分析献血者乙肝表面抗原检测双试剂阳性而核酸检测阴性的结果,探讨1遍血清学联合1遍核酸检测的新检测策略对血液安全的意义。方法对2017—2019年献血者标本中乙肝表面抗原血清学双试剂阳性的标本,无论核酸检测系统采取的是混样模式还是单检模式都同时进行核酸检测。阴性的标本使用原检测系统再进行重复检测。结果 2017—2019年献血者检测标本共计25.8万人份,乙肝表面抗原双试剂阳性标本共计195份,核酸HBV DNA阳性标本172份,阴性标本23份,其中核酸单检系统阴性标本8份,核酸混检系统阴性标本15份。单检系统的8份标本再次进行检测,至少有1次为阳性的标本有5份,混检系统的15份标本再次进行检测,至少有1次为阳性的标本有9份。结论无论单检核酸检测系统还是混检核酸检测系统都会出现乙肝表面抗原双试剂阳性而核酸检测阴性的结果,其中混检系统较单检系统的标本数量要多近1倍。重复检测结果为阳性标本的比例约为60%,为低浓度标本的机会性检出。因此采取1遍血清学联合1遍核酸进行乙肝检测的新检测策略,无论是核酸检测系统还是血清学检测系统都应进行系统的评估,比较与实验室原有检测策略的差异,避免漏检的发生,减低输血传播疾病的风险。

分析前因素对血液乙肝表面抗原检测的影响

目的探讨分析前标本处理因素对血液乙肝表面抗原(HBsAg)检测的影响。方法收集300例献血者的血液标本作为研究对象,采用ELISA法进行HBsAg检测。采用配对t检验统计分析对比离心温度为常温(18~27℃)和4℃、采集后储存0 h和8 h离心、离心后2~8℃储存2 h和2~8℃储存2 h后离心、抗凝管和促凝管、常温(18~27℃)和2~8℃储存5种因素对检测结果的影响。结果离心温度、标本采集到离心间隔、储存温度3种因素的t值分别为6.120、-5.694、3.691,对HBsAg检测结果的影响差异有统计学意义(P<0.05)。离心温度、标本采集到离心间隔、离心和储存顺序、标本管类型、储存温度5种因素复合标准差分别为0.0055、0.0045、0.0026、0.0020、0.0049,影响程度由大到小依次为离心温度、储存温度、标本采集到离心间隔、离心和储存顺序、标本管类型。结论离心温度、标本采集到离心间隔、储存温度3种因素对检测结果有显著影响。环境温度升高和全血标本长时间不分离导致标本不合格,从而对检测结果准确性产生影响,在日常工作中应采取有效措施避免上述因素。

三种方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的探讨三种方法对乙肝表面抗原的定性和定量检测的结果并进行对比分析。方法采用临床上常用的胶体金方法、酶联免疫吸附实验法(ELISA法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA法)对400例标本进行乙肝表面抗原检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。结论 CMIA法检测乙肝病毒标志物特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。

乙肝病毒表面抗原大蛋白的检测与分析

[目的]检测乙肝病人血液中乙肝病毒表面抗原大蛋白(LHBs),与HBV DNA结果比较,探讨LHBs方法的可靠性和实用性。[方法]用荧光定量PCR法检测慢性HBV病人血中HBV DNA,ELISA法检测LHBs,时间分辨荧光免疫法测定HBV标志物模式。[结果]96份HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性标本,其HBV DNA与LHBs阳性率分别为97.9%和93.8%;28份HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性标本,HBV DNA与LHBs检出率分别为57.1%和64.3%,两法的一致度达96.4%(P>0.05)。[结论]LHBs和HBV DNA的检测率有很好的相关性,其评估HBV的复制与HBVDNA检测具有同等意义。LHBs检测仪器设备要求低、操作简单,多数医疗机构都能开展,对不能开展HBV DNA检测的基层医院临床意义更大。

血清冻存13年后乙肝病毒表面抗原检测结果的评价

目的 :评价血清常规冻存 13年后HBsAg的检测结果。方法 :采用酶免疫测定法 (EIA)对保留血清 2 5 5份作HB sAg检测 ,并与原用单克隆抗HBsAg诊断血细胞 (McAb -RPHA)检测的结果作一致性检验 (Kappa分析 )。结果 :以EIA为标准 ,与原McAb -RPHA检测的结果比较 ,McAb -RPHA检测的假阳性率为 12 .5 0 % (1/ 8) ,假阴性率为 0 81% (2 /2 4 7)。McAb -RPHA与EIA两种方法之间 ,即同一批血清 13年前后两次检验的符合率为 98 82 % ,k =0 8175。结论 :在 - 2 0℃环境下经 13年冻存后 ,血清HBsAg检测不受影响。