乙酰氧基胡椒酚乙酸酯对人乳癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(ACA)对人乳癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT法检测ACA对人乳癌MCF-7细胞的增殖抑制作用,观察细胞形态学改变,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:ACA剂量依赖性地抑制MCF-7细胞增殖,其24h的IC50为(108.57±5.85)μmol/L。100、150μmol/LACA作用后MCF-7细胞出现典型的凋亡形态学特征,包括核浓缩致密,细胞皱缩。ACA对MCF-7细胞周期分布无明显影响,而终浓度为100、150μmol/L时,出现亚Gl峰。50、100、150μmol/LACA作用后MCF-7细胞的Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACA能明显抑制MCF-7细胞的增殖,并可通过下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达诱导其凋亡。

1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯片的溶出度测定方法

目的测定1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯片的溶出度。方法采用高效液相色谱法测定含量,λm ax=218 nm,溶出度以小杯法测定,转速50 r/m in,溶出介质为200 m l蒸馏水。结果当1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯浓度为10100μg/m l时,浓度与峰面积线性关系良好,回归方程为：Y=21 941X＋9741.2,r2=0.9999（n=3）。30 m in取样,主药溶出标示量90%以上。结论该方法操作简便、快捷、准确、灵敏度高,为1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯片剂的溶出度测定提供了方法学依据。

乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳的制备及其性质考察

目的制备乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳剂并考察其性质。方法采用高压微射法制备乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳,优化处方和制备工艺,考察其粒径、电位、载药量和稳定性。结果制备的乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳粒径和Zeta电位分别为(175.03±4.28)nm和(?30.80±0.44)mV,载药量为877.3μg/mL,在低温避光条件下保存稳定性良好。结论制备的乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳粒径小、含药量高,稳定性良好,为乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的制剂研究提供参考。

乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(ACA)亚微乳和ACA原料药对HeLa细胞生长和凋亡的影响。方法用5、12.5、25、50、100、200μmol/L ACA亚微乳和ACA原料药处理HeLa细胞,MTT比色法检测ACA亚微乳和原料药作用24、48、72、96 h对HeLa细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜观察HeLa细胞形态改变;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果 ACA亚微乳和原料药均可明显抑制HeLa细胞增殖,其中ACA亚微乳的抑制效果较好;经ACA亚微乳和原料药处理的HeLa细胞显示典型的凋亡形态改变;HeLa细胞凋亡率与ACA处理时间、浓度呈正相关;ACA亚微乳和ACA原料药均使HeLa细胞阻滞于S期,且ACA亚微乳作用强于ACA原料药。结论与ACA原料药相比,ACA亚微乳抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡的作用更显著。

乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(ACA)亚微乳对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:以处于对数生长期的人肝癌HepG2细胞为模型,采用MTT比色法检测5、10、20、40、80、160μmol/LACA亚微乳和ACA原料药作用24、48、72、96 h后对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测分析20、40、80μmol/LACA亚微乳和ACA原料药作用48 h后细胞的周期分布和凋亡率。结果:与ACA原料药比较,ACA亚微乳对HepG2细胞的增殖抑制作用更明显(P<0.05),且呈浓度和时间依赖性;作用于细胞24、48、72、96 h后,ACA原料药的IC50分别为160.05、135.56、124.18、109.30μmol/L,ACA亚微乳的IC50分别为74.89、29.36、16.80、7.32μmol/L。ACA亚微乳可显著影响HepG2细胞周期的进程,使G0/G1期细胞减少、S期细胞增多;同等条件下,20、40、80μmol/LACA亚微乳作用后细胞的凋亡率([34.60±0.73)%、(40.30±1.75)%、(50.60±2.12)%]均明显高于ACA原料药作用后细胞的凋亡率([8.10±1.58)%、(11.80±1.62)%、(38.50±0.47)%](P<0.05)。结论:与ACA原料药比较,ACA亚微乳对HepG2细胞增殖的抑制作用更强,促凋亡作用更显著。

乙酰氧基胡椒酚乙酸酯对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡与侵袭的影响

目的:研究乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(ACA)对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡与侵袭的影响。方法:通过RT-PCR法检测ACA对人乳腺癌MCF-7细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因表达的影响,免疫细胞化学法检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达。结果:MCF-7细胞经50、100、150μmol·L-1ACA干预后,Bcl-2 mRNA表达显著下降,Bax mRNA表达显著升高(P<0.01);50、100、150μmol·L-1ACA作用后细胞中MMP-2和MMP-9的蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:ACA诱导的Bcl-2 mRNA表达的下调和Bax mRNA表达的上调可能参与了其诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用。ACA能抑制人乳腺癌MCF-7细胞中MMP-2和MMP-9的蛋白表达从而抑制其侵袭。

1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯注射液的稳定性研究及有效期预测

目的:考察1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(ACA)注射液的稳定性,预测其有效期。方法:采用高效液相色谱法测定注射液中ACA含量,考察ACA注射液在高温40℃、光照(4500±500)lx条件下的稳定性,并以经典恒温法得到其分解速率常数K,预测有效期。结果:ACA检测浓度线性范围为5～100μg·mL-(1(r=0.9999,n=5),平均回收率为99.76%,RSD=0.43%。在高温和光照条件下,ACA注射液含量下降,有关物质有所增加。25℃药物分解速率常数K及有效期分别为1.0156×10-5h-1、1.2年。结论:本品对光、热较敏感,高温不利于ACA注射液的稳定,需置于避光阴凉处保存。

大高良姜与节鞭山姜油细胞原位拉曼光谱研究

为避免复杂的样品的制备及提取过程,最大限度避免精油活性成分变化,在常温下,用拉曼光谱原位分析大高良姜与节鞭山姜油细胞中精油。两种样品的拉曼光谱非常相似,较强峰出现在1636/1643、1605/1607、1291/1293、1199/1204、1168/1168cm^(-1),中等强度的峰出现在1585/-、1439/1437、1308/-、907/908、856/856、797/788、731/732、632/633cm^(-1)。说明两者的挥发油主要成分相同。与1’一乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(1’-acetoxychavico lacetate)拉曼光谱主要的16条谱线比较,在节鞭山姜油细胞拉曼谱的18条谱峰中有15条与之对应,而对大高良姜而言19条谱线中,有14条与之对应。用密度泛函理论计算了ACA的拉曼光谱,并对谱线进行了初步的归属。

红豆蔻精油化学成分的研究

用毛细管气相色谱及色-质谱法从红豆蔻精油中鉴定出33个组分,占总精油含量的87.3%。比较了闪蒸-气相色谱法与常规气相色谱法的结果。经IR、^(1)HNMR及MS鉴定,从精油中分得的化合物为1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯。用高分辨质谱和B/F联动扫描法研究了它的质谱裂解过程并对其水解产物进行了分离和鉴定。

大高良姜中活性物质的分子光谱研究

1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的抗菌、抗癌等生物活性正逐渐为国内外的研究证实,是一具有前景广阔的化合物,而植物大高良姜是其丰富的天然来源之一。本文采用不破坏样品原始性状的红外光谱与拉曼光谱技术对从大高良姜中提取提纯的生物活性物质进行了分子光谱的表征与结构分析,为其进一步的开发利用提供鉴别的依据。