“益气调血、扶本培元”药线灸对多发梗死性痴呆大鼠海马乙酰胆碱、乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶含量的影响

目的观察"益气调血、扶本培元"药线灸对多发梗死性痴呆(MID)大鼠海马乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)含量的影响。方法 100只雄性大鼠经MID造模、痴呆筛选后,随机分为正常组、模型组、假手术组、药线灸组、药物组和药线非穴组6组,各组10只;药线灸组予壮医药线点灸治疗,药物组给予多奈哌齐口服治疗,药线非穴组给予针刺两肋下非穴点治疗,余3组未给予特别治疗。经4 w干预后处死动物,分离海马,匀浆、分离上清,检测ACh、AChE与ChAT含量。结果模型组ACh、ChAT含量较正常组显著降低,AChE含量显著升高(P<0.05);药线穴组与模型组ACh、AChE无统计学差异(P>0.05),药线灸组能显著升高ACh、ChAT和降低AChE含量,而药物组只显著升高ACh和降低AChE含量(P<0.05);药物组与药线灸组比较无差异(P>0.05)。结论 "益气调血、扶本培元"药线灸可以全面改善MID大鼠海马ACh代谢障碍,且较多奈哌齐有疗效优势。

中西医结合治疗重症肌无力对乙酰胆碱受体抗体和CD_4^+CD_(25)^+T调节免疫细胞的研究

目的:比较中西医结合治疗(包括免疫抑制剂和以补中益气汤为主的辩证加减联合治疗)和单纯免疫抑制剂治疗重症肌无力两种治疗方案的临床疗效和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr的影响研究。方法:选择2006年1月—2008年1月在石家庄市第一医院住院治疗的明确诊断220例重症肌无力全身型患者。将患者随机分为两组即A组和B组,各组均有110例患者。A组治疗方法为免疫抑制剂(甲泼尼松龙和硫唑嘌呤)配伍中药重剂补中益气汤治疗;B组治疗方法为单纯免疫抑制剂(甲泼尼松龙冲击配伍硫唑嘌呤)治疗,监测两组患者治疗后6个月和18个月的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)值和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比的动态变化,同时用许氏评分法的相对临床计分来判定治疗后6个月和18个月的临床疗效。结果:(1)治疗后6个月:因各种原因没有完成治疗的出组患者A组3例,B组5例;(2)治疗前两组患者乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值和CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)分别比较两组患者治疗后6个月的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值、CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比、临床相对计分,其差异无统计学意义(P>0.05);(4)两组患者治疗后18个月,A组患者的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值明显低于B组,且差异有明显统计学意义(P<0.01);A组患者的CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比明显高于B组,且差异具有明显的统计学意义;A组患者的临床相对计分50%以上的患者人数高于B组,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫抑制剂配伍重剂补中益气汤辨证加减治疗重症肌无力可使乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)值下降更明显、CD_4^+CD_(25)^+Tr免疫调节细胞值明显升高,患者的临床完全缓解率高,且稳定而不易复发。

罗比卡因对乙酰胆碱诱发兔离体气管平滑肌收缩的抑制作用

目的探讨不同浓度罗比卡因对乙酰胆碱(Ach)诱发兔离体气管平滑肌收缩的影响。方法取兔气管环,浸浴在K-H液中,气管一端固定张力换能器,每个标本先用10-4M Ach收缩,然后使其回到基线,加入3×10-4M(Ⅰ组)、5×10-4M(Ⅱ组)和10-3M(Ⅲ组)三种不同浓度的罗比卡因测定其对Ach诱发的离体气管平滑肌收缩的影响,不加罗比卡因的为对照组(C组)。结果三种浓度的罗比卡因对Ach诱发的收缩均可产生一定的抑制作用(P<0.05,P<0.01)。与C组比较,Ⅰ组10 min张力明显下降,为C组的50%(P<0.05),Ⅲ组2 min张力下降至C组的70%(P<0.01),并在10 min左右张力降到基线。Ⅲ组与Ⅰ组张力比较,3 min后有显著性差异(P<0.05),Ⅲ组与Ⅱ组张力比较,10 min后有极显著性差异(P<0.01)。结论三种浓度的罗比卡因对10-4M Ach诱发的收缩均有抑制作用,并且随着罗比卡因浓度的增加抑制作用增强。

迷迭香精油吸嗅对C57BL/6鼠学习记忆及海马CA1区乙酰胆碱酯酶表达的影响

目的观察迷迭香精油对C57BL/6鼠学习记忆及海马CA1区乙酰胆碱酯酶(Ach E)表达的影响。方法通过神经行为学筛选及制备嗅上皮毁损模型,用Lashley-Ⅲ水迷宫测定迷迭香精油吸嗅对C57BL/6鼠的空间学习记忆的影响,并采用免疫组化法观察各组C57BL/6鼠海马CA1区Ach E表达。结果水迷宫试验中,在吸嗅第7、14天嗅上皮完整+迷迭香精油组潜伏期缩短,与对照组差异显著(P<0.05);在海马CA1区,与对照组比较,嗅上皮完整+迷迭香精油组Ach E阳性细胞数和平均吸光度值明显减少(P<0.05)。结论迷迭香精油吸嗅通过嗅觉通路提高C57BL/6鼠学习记忆能力,机制可能为抑制海马CA1区Ach E活性。

乙酰胆碱对培养脑细胞影响的原子力显微镜观察

在原代培养的大鼠海马神经元上研究乙酰胆碱（ACh）对脑细胞超微结构及其存活率的影响。实验将不同浓度ACh直接作用于海马神经元，用原子力显微镜（AFM）从纳米尺度观察细胞超微结构的变化，并用四甲基偶氮唑盐（MTT）微量酶反应比色法测定MTT代谢率，进一步验证AFM结果。实验显示：①一定浓度的ACh作用后，神经元发育迟缓，突起分支少，胞膜表面粗糙，出现“孔洞”样改变，这种改变具有较好的时一效关系及量一效关系。②一定浓度的ACh也可使神经胶质细胞膜表面出现明显的“孔洞”样及“虫蚀”样改变，并具一定的剂量依赖性。

缺氧刺激后大鼠大脑皮层神经元GABA和ACh表达的动态变化

目的研究大脑皮层神经元中枢神经疲劳过程中γ-氨基丁酸(GABA)和乙酰胆碱(ACh)神经递质表达的变化及其特点。方法借助体外培养大鼠大脑皮层神经元,并利用Western Blotting、HPLC等方法研究60 min缺氧刺激对神经元HIF-1α、GABA和ACh表达的影响。结果缺氧刺激后HIF-1α、GABA和ACh的表达均有显著变化,两种递质的变化呈现异向同步性;24-48 h后,二者的变化基本恢复正常。结论缺氧可以诱导大鼠大脑皮层神经元GA-BA和ACh的表达升高和降低,二者协同作用可以诱导神经元的自我保护效应。

Ach和ATP在小鼠胰岛β细胞诱导细胞内钙变化的比较

目的探讨Ach和ATP在小鼠胰岛 β细胞诱导细胞内钙 ( [Ca2 + ]c)变化的不同。方法原代培养的小鼠胰岛 β细胞 ,分为Ach和ATP诱导组。每组又分为正常对照组、EGTA处理组和Thapsigargin处理组。正常对照组细胞不经处理即开始 [Ca2 + ]c测定 ;EGTA处理组细胞加入EGTA的无钙溶液 ,螯合细胞外Ca2 + 后进行 [Ca2 + ]c测定 ;Thapsigargin处理组细胞记录前用Thap sigargin( 1mmol/L )预处理 2 0分钟 ,耗竭细胞内钙库的Ca2 + 后进行 [Ca2 + ]c测定。采用Fura 2钙离子指示剂反映 [Ca2 + ]c ,观察Ach与ATP诱导 [Ca2 + ]c变化的规律。结果Ach可诱导 [Ca2 + ]c的短暂峰性升高和持续性升高。ATP只诱导 [Ca2 + ]c的短暂峰性升高 ,无持续性升高。EGTA螯合细胞外Ca2 + 后 ,Ach和ATP诱导的 [Ca2 + ]c峰性升高依然存在 ,而Ach诱导的持续性升高被消除。Thapsigargin预处理耗竭细胞内钙库的Ca2 + 后 ,Ach和ATP诱导的 [Ca2 + ]c峰性升高消除 ,同时Ach诱导的持续性升高也被消除。结论Ach在小鼠胰岛 β细胞诱导细胞内Ca2 + 释放和Ca2 + 释放激活的Ca2 + 内流 ;ATP可诱导细胞内Ca2 +释放 ,但阻断Ca2 +释放激活的Ca2 + 内流。

内源性CO和NO在糖尿病高血压发病中关系及作用

目的探讨内源性一氧化碳(CO)和一氧化氮(NO)在糖尿病(DM)大鼠高血压发病中的相互作用。方法监测DM大鼠动脉血压,测定下肢动脉环对苯肾上腺素(PE)累积收缩反应和对乙酰胆碱(ACh)累计舒张反应,检测血中CO和NO含量。结果DM大鼠出现低体重、高血压和高血糖,下肢动脉累积收缩和舒张反应明显降低,血中CO含量明显降低,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性和NO水平则明显上升;应用正铁血红素(He)可部分逆转DM高血压,明显改善下肢动脉的收缩反应和舒张反应,提高血中CO水平,同时抑制iNOS活性和NO合成。结论DM大鼠早期内源性CO合成减少和代偿性NO合成增加共同参与诱导下肢血管反应障碍,是引起DM高血压的重要机制之一。

侧脑室注射神经节苷脂钠对脑瘫模型大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨神经节苷脂钠(GM)侧脑室注射对脑瘫模型大鼠学习记忆能力的机制,为临床治疗脑瘫提供理论依据。方法将36只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组和GM组。模型组和GM组大鼠通过切除大脑皮质及部分脑组织建模。成模后1 d、10 d、20 d、30 d用大鼠脑定位仪经大鼠侧脑室注射GM给药。在成模后和未次给药后用水迷宫仪进行空间探索实验、定位航行、悬吊、斜坡等实验,比较大鼠学习记忆能力及运动能力改变,并采用ELISA测定脑海马区乙酰胆碱(Ach)及眶静脉血乙酰胆碱脂酶(AChE)活性;脑组织液钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)及钙调蛋白(CaM)。结果与模型组比较,GM组大鼠治疗后找到平台时间及斜坡实验时间显著缩短;悬吊时间、第一象限和中环停留时间明显延长;定位航行中潜伏期、游泳距离缩短,脑海马区Ach含量降低、AChE活性增强;脑组织液CaMKⅡ及CaM增高(P<0.05)。结论GM可明显抑制脑瘫模型大鼠脑组织液CaMK II和CaM合成,降低神经细胞钙蛋白水解和钙内流,并通过阻断CaMKⅡ这一信号传导通路,提高AChE活性,抑制Ach释放来降低大鼠因脑缺血缺氧对中枢神经造成的损伤,使受损脑神经纤维修复和再生,进而促进中枢神经纤维功能恢复来提高学习记忆能力。

慢性失眠病人脑内神经递质活动的超慢涨落图表现

目的:探讨慢性失眠病人脑内神经递质活动变化。方法:用WF92型脑电超慢涨落分析仪,通过检测慢性失眠病人和正常人的脑电超慢涨落图(EFG),分析其谱线变化来反映脑内神经递质活动变化。结果:慢性失眠病人51例与51例健康人配对对照比较,EFG神经递质谱系S1和S2显著降低(配对t检验,P<0.01),S3、S4、S5、S7和S11两组间比较无明显差异,提示慢性失眠病人脑内神经递质谱系S1γ氨基丁酸(GABA)和S2谷氨酸(Glu)活动存在异常,S3乙酰胆碱受体(AchR)、S45羟色胺(5HT)、S5乙酰胆碱(Ach)、S7去甲肾上腺素(NE)和S11多巴胺(DA)活动无明显变化。结论:脑内神经递质GABA和Glu活动异常可能参与了慢性失眠的发病。

电针对大白鼠脊神经节组织中乙酰胆硷含量和乙酰胆硷酯酶活性的影响

本文将以生他的方珐研究电针和切断后根后脊神经节和脊髓后角内AChE活性的变化，旨在探讨外周乙酰胆碱(ACh)与针感一级传入的关系；结果表明：

盐酸戊乙奎醚对豚鼠离体膀胱和家兔在体膀胱的作用

目的研究盐酸戊乙奎醚im及ig对麻醉及清醒家兔在体膀胱以及豚鼠离体膀胱的抑制收缩作用。方法在体采用家兔膀胱内插入球囊,im及ig后,于多个时间点给予乙酰胆碱(Ach)。测量膀胱内压;离体采用测量盐酸戊乙奎醚给药后豚鼠离体膀胱条自主收缩及乙酰胆碱激动收缩的最大张力,计算抑制50%收缩的盐酸戊乙奎醚浓度。结果盐酸戊乙奎醚能抑制由Ach引起的膀胱内压上升,对抗Ach对离体膀胱条的收缩作用,并能抑制离体膀胱条的自主收缩。结论盐酸戊乙奎醚能有效缓解膀胱的痉挛状态。

葡萄内酯对D-半乳糖模型小鼠学习记忆改善作用的试验研究

为了探讨葡萄内酯对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆改善作用的影响,为葡萄内酯在抗老年痴呆方面提供理论依据,试验建立D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型,以Morris水迷宫试验进行行为学测试,观察各组小鼠的学习记忆能力,测定各组小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙酰胆碱酯酶(Ach E)及谷氨酸(Glu)含量的变化。结果表明:葡萄内酯各剂量组逃避潜伏期的时间均能显著缩短,空间探索能力也有明显改善的趋势;且能显著提高脑组织SOD的活性,抑制Ach E的活性,降低MDA的含量。说明葡萄内酯能够改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆能力和提高脑组织的抗氧化能力,其作用机制可能与抑制脑组织Ach E活性有关。

铁皮石槲对高铝饲养小鼠生化指标的影响

目的探讨铁皮石槲对高铝饲养小鼠机体生化指标的影响。方法选用昆明种小鼠30只,分成正常组、模型组、治疗组。除正常组外,用三氯化铝拌饲料饲养小鼠4个月,到结束前3周治疗组用铁皮石槲水提液灌胃21 d。用水迷宫方法测定实验前、中、后小鼠的记忆力,实验结束,取静脉血待测;处死动物后,取大脑做成10%脑匀浆待用;测定乙酰胆碱酯酶(Ach E)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、胆固醇(TC)、铝(Al3+)含量等。结果治疗组、模型组和正常组,脑匀浆Ach E依次为(0.59±0.16)、(0.85±0.09)、(0.62±0.13)U/mgprot,模型组与治疗组、正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);脑匀浆铝(Al3+)含量依次为(0.61±0.10)、(0.72±0.06)、(0.59±0.05)μg/m L,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);脑匀浆MDA含量依次为(2.80±0.52)、(4.51±1.29)、(3.21±1.48)nmol/m L,模型组显著高于其他2组(P<0.05);y型水迷宫游水时间,模型组与正常组后期增加显著,差异有统计学意义(P<0.05),但治疗组差异无统计学意义;GSH-PX、TC各组间比较差异无统计学意义。结论高铝饲养小鼠脑匀浆和血清铝含量、AchE活力、MDA含量明显升高,铁皮石槲灌服后有明显改善。

6-OHDA诱导帕金森病大鼠模型行为学及脑内神经递质的动态变化

目的:观察6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导帕金森病大鼠模型(PD)不同时间点行为学及左侧纹状体内多巴胺(DA)和乙酰胆碱(Ach)含量的变化。方法:采用6-OHDA左侧纹状体两点注射法建立PD大鼠模型,观察术后不同时间点大鼠经阿扑吗啡(APO)诱导出现旋转行为改变,ELISA法测定各时间点大鼠左侧纹状体区DA和Ach含量,HE染色观察左侧中脑黑质区多巴胺能神经细胞的病理形态学改变。结果:行为学方面:假手术组各时间点大鼠经APO诱导无旋转行为;6-OHDA组大鼠经APO诱导出现异常旋转行为,48 h后右侧旋转速度逐渐增快,4周右侧旋转速度达到高峰,4周到8周恒定右侧旋转速度稳定。DA和Ach含量变化:假手术组各时间点DA和Ach无明显变化。6-OHDA组造模术后6h,DA含量降低,术后1周、2周、4周DA含量明显减少,术后4周与8周DA含量比较无明显差异。HE染色:假手术组各时间点左侧黑质区神经元细胞形态正常。6-OHDA组6 h少量神经细胞肿胀,24 h、48 h、1周可见大量神经细胞肿胀,部分核裂变,胶质细胞增多,2 w时神经细胞肿胀减轻,核仁明显偏移或破裂,神经元数量减少,4周、8周神经细胞凝固性坏死,伴有大量胶质细胞弥漫性或局限性增生。结论:6-OHDA组造模后,随着造模时间延长,大鼠左侧纹状体内DA含量逐渐下降,Ach含量逐渐上升,于术后4周达到稳定状态,与大鼠右侧旋转行为表现一致;HE染色见左侧纹状体神经元随时间延长表现为变性、坏死,胶质细胞增生。

大花飞燕草对离体器官的作用

离体器官实验表明:大花飞燕草对于横纹肌标本—蟾蜍腹直肌无作用,但能拮抗乙酰胆碱对腹直肌的兴奋作用,对家兔十二指肠等平滑肌则表现兴奋作用,阿托品可阻断此兴奋作用。本草且可减慢豚鼠右心房的自动节律降低收缩力,对心表现抑制作用。