吸烟及烟碱型乙酰胆碱受体亚单位α5基因rs17486278位点多态性对肺癌的交互作用

目的 探讨在中国男性人群中吸烟、烟碱型乙酰胆碱受体亚单位α5（CHRNA5）基因多态性与肺癌的关联及其交互作用.方法 采用成组病例对照研究设计,收集男性原发性肺癌病例204例,正常健康对照者821例.采用结构式问卷调查社会人口学特征、吸烟行为及健康状况等,采集静脉血检测CHRNA5 SNP位点rs17486278的多态性.应用多因素logistic回归模型分析吸烟、CHRNA5的基因多态性与肺癌的关系及其交互作用.结果 控制潜在混杂因素后,每天吸烟量＞15支者发生肺癌的风险高于不吸烟者（OR=3.49,95％CI：2.29～ 5.32）,未发现CHRNA5上的rs17486278多态性与肺癌有统计学关联.进一步交互作用分析显示,每天吸烟量1～15支并携带rs17486278纯合变异基因型（CC）者对肺癌的发生存在正交互作用（OR=16.13,95％CI：1.27～205.33）.根据rs17486278多态性和吸烟行为进行分层分析,与不吸烟并携带rs17486278野生基因型（AA）者相比,每天吸烟量1～15支并携带纯合变异基因型（CC）者、每天吸烟量＞15支并携带野生基因型（AA）者和每天吸烟量＞15支并携带杂合变异基因型（AC）者发生肺癌风险增高,OR直分别为8.14（95％CI：1.17 ～ 56.56）、3.84（95％CI：1.30～ 11.40）和5.32（95％CI：1.78 ～ 15.93）.结论 在中国男性人群中CHRNA5的基因多态性与吸烟行为对肺癌的发生存在正交互作用.

神经型尼古丁乙酰胆碱受体α7亚单位基因多态性与散发性Alzheimer病的关联分析

目的探讨散发性Alzheimer病(SAD)与神经型尼古丁乙酰胆碱受体α7亚单位(CHRNA7)基因多态性的关系。方法用聚合酶链式反应温度梯度凝胶电(PCRTGGE)和DNA测序技术分析16例SAD患者及16名正常人CHRNA7基因全部10个外显子及其两侧的部分内含子序列和内含子4的部分基因序列。结果在CHRNA7基因上发现2个新的多态性位点;内含子3区的133418G/C突变,两组相比差异无显著性(χ2=4.571,P>0.05);内含子7上的117643+GTG三碱基插入突变,两组相比差异无显著性(χ2=1.032,P>0.05)。结论在CHRNA7基因上发现的2个新的多态性位点与SAD的发病无显著相关性。

神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因和儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性与精神分裂症的关联研究

目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个单核苷酸多态性位点(rs4680、rs737865、rs165599),并对分型结果进行测序鉴定。结果所有位点的单核苷多态性与精神分裂症发病风险无关联(均P>0.05)。结论在中国粤东地区CHRNA7基因3个位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个位点(rs4680、rs737865、rs165599)的基因多态性可能与精神分裂症无关,但此结论尚需要进一步扩大样本量进行验证。

α7亚单位的N型乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征小鼠CD11b和炎症因子的影响

目的探讨α7亚单位的N型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptorsα7,α7nAChR)对急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distresssyndrome,ARDS)小鼠CD11b、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的影响。方法健康清洁级雄性Balb/C小鼠40只(6周),完全数字随机分为正常组(N组)、生理盐水对照组(NS组)、ARDS组(A组)、ARDS+段离颈部两侧迷走神经给予乙酰胆碱受体激动剂组(J组),每组各10只正常饲养。用HE染色观察各组小鼠右肺结构,检测肺组织湿重/体质量比值(LWW/DW比值),采用流式细胞仪检测小鼠肺泡灌洗液CD11b的百分比,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测左肺组织IL-1βmRNA、IL-18 mRNA和TNF-αmRNA的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)双抗体夹心法测定各组小鼠血清IL-18含量。结果N组和NS组小鼠右肺HE染色显示结构正常,而A组小鼠肺间质有大量的炎性细胞浸润,肺泡壁增厚、肺泡结构破坏明显,肺泡腔融合。J组小鼠肺泡结构较完整、有少许破损、肺泡腔存在。A组小鼠肺泡灌洗液CD11b百分比高于其他3组,分别与N组、NS组、J组比较差异有统计学意义(P<0.05)。J组小鼠左肺IL-1βmRNA、IL-18 mRNA和TNF-αmRNA的表达分别与N组、NS组、A组比较差异有统计学意义(P<0.05),A组小鼠血清IL-18水平高于其他3组,分别与N组、NS组、J组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活α7nAChR可以直接抑制肺组织CD11b的释放,减少炎症因子的集聚;同时还可以直接抑制肺组织炎症因子IL-1βmRNA、IL-18m RNA和TNF-αmRNA的表达和IL-18的释放,从而抑制ARDS的炎症反应,减轻ARDS病理变化。

条件免疫对胶原性关节炎大鼠烟碱样乙酰胆碱受体及胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的建立条件免疫反应(CIR)模型,研究CIR状态下胶原性关节炎(CIA)大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)蛋白和mRNA表达,探讨CIR可能的胆碱能通路作用机制。方法将大鼠分为健康对照组和CIA模型组,模型组大鼠分为5组:CIR组;甲氨蝶呤(MTX)+泼尼松(Pred)治疗组;MTX+Pred治疗减量组;单纯闻樟脑气味组;空白对照组。用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测各组大鼠关节滑膜nAChRα7、ChAT蛋白和mRNA表达。结果免疫组织化学和RT-PCR均显示CIR组关节滑膜nAChRα7、ChAT蛋白和mRNA的表达明显均高于空白对照组(P均<0.01);空白对照组大鼠表达nAChRα7、ChAT明显低于健康对照组和CIR(P均<0.01),而MTX+Pred组、MTX+Pred减量组、单纯闻樟脑气味组均与空白对照组差异无显著性(P均>0.05)。结论CIR状态下nAChRα7、ChAT mRNA和蛋白表达水平增高,表明胆碱能抗炎通路在CIR治疗胶原性关节炎大鼠的作用机制中起重要作用。

多奈哌齐上调海马神经元β2烟碱型乙酰胆碱受体的表达

目的观察多奈哌齐对β淀粉样蛋白25-35片断(Aβ25-35)诱导原代培养的海马神经元损伤的保护作用及神经元β2烟碱型乙酰胆碱受体(β2-nAChR)的表达。方法在不同时间及采用不同浓度多奈哌齐提前干预培养的海马神经元,之后用Aβ25-35诱导神经元损伤。采用倒置显微镜观察神经元形态学改变,以MTT法测量神经元活性变化,利用免疫荧光法观察不同浓度和不同时间多奈哌齐干预后Aβ25-35损伤神经元β2-nAChR表达情况,并用激光扫描共聚焦显微镜免疫荧光半定量法测量其平均相对荧光强度变化。结果多奈哌齐干预组可减轻Aβ25-35对神经元的损伤。多奈哌齐预处理组神经元β2-nAChR表达明显增加,其平均相对荧光强度明显高于Aβ25-35损伤组。结论多奈哌齐对Aβ25-35诱导损伤神经元的保护作用部分与β2-nAChR的上调有关。

重症肌无力患者肌肉AChR亚单位基因的表达

目的探讨重症肌无力(MG)患者眼外肌易于受累的机制。方法采用RT-PCR对正常人眼外肌、其他骨骼肌群(8例)以及MG患者肋间肌(10例)AChRα、β、γ、ε、δ亚单位mRNA的表达进行分析,同时采用ELISA方法检测83例MG患者血清AChR抗体对不同骨骼肌群AChR的反应。结果①正常人眼外肌与其他骨骼肌一样均可见AChRα、β、γ、ε、δ亚单位mRNA的表达;②全身型MG患者肌肉AChRαP3A+/β-actin较正常对照组高(P=0·028);③眼肌型、全身型MG抗成人腓肠肌AChR抗体显著高于抗胎儿肌肉AChR抗体(P=0·001,0·016)。结论MG患者眼外肌易受累机制可能与眼外肌AChR亚单位mRNA表达水平及眼外肌的内在易感性有关。

周围神经损伤再生后肌肉nAChRε亚单位基因表达的变化

目的:建立肌肉内烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR )ε亚单位mRNA表达水平的荧光定量检测方法,观察周围神经损伤后肌肉内nAChRε亚单位mRNA表达的变化。方法:构建克隆载体pMD18 T ε作为定量模板,进行TaqMan实时荧光定量PCR反应,同时测定该法的灵敏性、特异性和重复性。同法检测大鼠股薄肌支配神经损伤修复后不同时间肌肉标本内nAChRε亚单位mRNA表达的变化。结果:用该方法检测nAChRε亚单位mRNA表达,其线性检测范围为6 个数量级,最低检测下限为1×102 拷贝,最高检测上限为1×107 拷贝。大鼠股薄肌支配神经损伤后,与对照组相比ε亚单位mRNA表达的拷贝数先增加后减少,在术后第3 周降到最低后又逐渐增高,但到术后30 周仍处于低水平(P<0.01)。结论:采用Taq Man实时荧光定量RT PCR检测nAChRε亚单位mRNA的表达水平具有灵敏度高、特异性强、重复性好、线性检测范围宽的优点。神经损伤再生的晚期ε亚单位mRNA表达水平较损伤前有所降低。

与霍乱毒素B亚单位结合的重组人AChR片断经鼻腔治疗实验性自身免疫性重症肌无力

目的探讨与霍乱毒素B亚单位结合的重组人AChRα亚单位片断(CTB-Hα1-205)治疗实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的有效性和基本作用机制。方法将用AChR诱导的Lewis EAMG鼠随机分为3组:CTB-Hα1-205治疗组、Hα1-205组和CTB-HGG对照组,在诱导EAMG后第14天分别按上述3组从鼻腔滴入CTB-Hα1-205、Hα1-205和CTB-HGG。对各组进行临床分数评估、测定鼠血清中抗AChR特异抗体和淋巴细胞增殖反应。结果CTB-Hα1-205组和Hα1-205组平均临床分数均较对照组有明显减少,差异有统计学意义(均为P<0.01),同时CTB-Hα1-205组较Hα1-205组也有明显减少(P<0.05);与对照组比较,CTB-Hα1-205组和Ha1-205组血清中鼠抗AChR特异抗体IgG、IgG2a、IgG2b和IgG2c的产生均明显被抑制(P<0.01),CTB-Hα1-205治疗组的IgG、IgG2b和IgG2c较Hα1-205组低,且差异有统计学意义(P<0.05);另一方面,CTB-Hα1-205组和Hα1-205组的IgG1较对照组却有明显升高(P<0.05),同时,CTB-Hα1-205组和Hα1-205组对AChR特异性抗原的淋巴细胞增殖反应也被明显抑制(P<0.05)。结论CTB-Hα1-205比Hα1-205能更加有效治疗EAMG,其作用机制是抑制了自身抗体的产生、IgG亚型的转换和特异的淋巴细胞增殖反应。

神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因多态性与精神分裂症的传递不平衡研究

目的探讨神经型烟碱乙酰胆碱受体订亚单位基因（neuronal nicotinic acetylcholine receptor α7 subunit gene，CHRNA7）多态性与精神分裂症的关系。方法应用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术检测129个精神分裂症先证者核心家系CHRNA7基因的rs2337980、rsl909884、rs883473三个单核苷酸多态性，并采用基于单倍型的单倍型相对风险检验（haplotype relative risk，HHRR）、传递不平衡检验（transmission disequilibrium test，TDT）及单倍型分析进行统计。结果（1）HHRR分析结果显示rs2337980位点精神分裂症患者组与虚拟对照组之间等位基因频率差异有统计学意义（P=0．017）；（2）TDT分析发现，rs2337980位点与精神分裂症之间可能存在传递不平衡，杂合子父母过多的传递等位基因C给患病子女（P=0．021）。（3）单倍型分析发现，rs2337980、rsl909884及rs2337980、rsl909884、rs883473组成的单倍型与精神分裂症有显著相关（总体P=0.034；global P=0．027），其中T-C，T-C-T两个单倍型与精神分裂症可能存在传递不平衡。结论CHRNA7基因多态性可能与精神分裂症存在关联，rs2337980的变异等位基因T可能是精神分裂症的保护性因子。

急性干预α7亚单位的N型乙酰胆碱受体介导的胆碱能抗炎通路对犬快速心房刺激诱发心房颤动的影响

目的 探讨α7亚单位的N型乙酰胆碱受体（α7nAChR）介导的胆碱能抗炎通路对犬快速右心房起搏后心房颤动（房颤）诱发的影响及机制.方法 12只比格犬按随机数字表法分为对照组（n=6）和激动组（n=6）.快速右心房刺激（800次/min）6 h,连续3 h刺激后,对照组于4个心房神经节（GP）区域中注射0.9%NaCl溶液（0.5 ml/个）,激动组于4个GP区域注射含PNU-282987（α7nAChR激动剂）的0.9%NaCl溶液（0.5 ml/个）.于实验基线期和每小时刺激末监测心房、肺静脉的有效不应期（ERP）、有效不应期离散度（dERP）和房颤诱发情况.实验基线期、3 h刺激末、终点分别取静脉血检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和乙酰胆碱（ACh）等水平;电生理检查完毕后取心房、右前GP组织检测 TNF-α、IL-6、ACh 及转录激活子3（STAT3）蛋白的表达水平,免疫荧光染色检测α7nAChR蛋白的定位表达.结果 对照组和激动组快速刺激3 h,犬心房、肺静脉的ERP、房颤周长较基线期均明显缩短（P〈0.05）,dERP、房颤诱发率均明显升高（P〈0.05）.对照组3 h刺激末于GP区域注射0.9%NaCl溶液后持续刺激,犬心房、肺静脉的ERP、房颤周长仍明显下降（P〈0.05）,dERP、房颤诱发率及持续时间仍明显升高（P〈0.05）;激动组3 h刺激末于GP区域注射PNU-282987后持续刺激,犬心房、肺静脉的ERP、房颤周长逐渐延长,dERP、房颤诱发率及持续时间逐渐缩短,但与基线期比较差异无统计学意义（P〉0.05）.两组犬静脉血基线期差异无统计学意义,快速刺激6 h后,两组血清TNF-α、IL-6等水平均明显升高、Ach表达均显著降低（P〈0.05）.与对照组相比,激动组犬心房及右前GP组织中TNF-α[（28.5 ± 2.3） pg/ml 对（32.7 ± 2.0） pg/ml,P〈0.05]、IL-6[（192.7 ± 8.9） pg/ml 对（205.8±8.7） pg/ml,P〈0.05]表达水平显著降低,而ACh表达差异无统计学意义[（38.4±3.7） μg/ml对（32.7± 3.0） μg/ml,P〉0.05],STAT3蛋白表达水平明显升高[0.9对0.4,P〈0.05].结论 激动α7nAChR介导的胆碱能抗炎通路通过降低炎性因子水平升高,可抑制心房快速刺激引起的心房肌电重构和房颤的诱发.

烟碱样胆碱能通路对胶原性关节炎大鼠的作用研究

目的探讨烟碱样胆碱能通路对胶原性关节炎(CIA)的作用,为关节炎等自身免疫性疾病寻找新的治疗途径。方法建立大鼠CIA模型,将模型大鼠分为迷走神经刺激(VNS)组和假手术组,VNS组在完全清醒状态下给予持续迷走神经刺激(5v,2ms,1HZ),每天30min,共4周。观察2组大鼠的病理和关节炎指数变化,用免疫组织化学和RT-PCR技术检测大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)及乙酰胆碱酯酶(AChE)在关节滑膜的蛋白和基因表达。结果治疗4周后,VNS组大鼠关节炎指数明显低于假手术组(P<0.01);VNS组大鼠踝关节组织病理改善明显高于假手术组(P<0.01);免疫组化和RT-PCR检测nAChRα7、ChAT蛋白和mRNA表达均明显高于假手术组(P<0.01);各组大鼠AChE蛋白和基因水平表达均差异无显著性(P>0.05)。结论电刺激迷走神经可以上调nAChRα7、ChAT基因在免疫组织的表达,减轻胶原性关节炎大鼠的炎症,提示烟碱样胆碱能通路在治疗胶原性关节炎中有重要作用。

胆碱能抗炎通路在电针预处理调控脑缺血再灌注大鼠小胶质细胞活化状态中的作用

目的:观察电针预处理对大鼠脑缺血再灌注后小胶质细胞活化状态的影响并探讨其机制。方法:成年雄性SD大鼠随机分为7组,分别为假手术组(Sham),脑缺血再灌注组(MCAO),电针(EA)+MCAO组,烟碱型乙酰胆碱受体α7亚单位(α7nAChR)PHA-543,613+MCAO组,溶剂(Vehicle)+MCAO组,α7nAChR抑制剂α-BGT+EA+MCAO组,溶剂+EA+MCAO组。脑缺血再灌注后3 d取材,运用Western Blot技术以及免疫荧光技术检测脑缺血半暗带小胶质细胞经典激活状态(M1型)及选择性激活状态(M2型)特异性标志分子的表达水平。结果:(1)与MCAO组比较,电针预处理组(EA+MCAO)M1型小胶质细胞标志分子iNOS表达下调(P<0.05),M2型小胶质细胞标志分子Arginase表达上调(P<0.05);(2)α7nAChR激动剂PHA-543,613可模拟电针预处理的作用,使小胶质细胞由M1型向M2型转化;α7nAChR抑制剂α-BGT逆转了电针促进小胶质细胞由M1型向M2型转化的作用。结论:电针预处理可以使脑缺血再灌注后小胶质细胞由M1型向M2型转化,α7nAChR参与了电针预处理对小胶质细胞活化状态改变的过程。

Th1/Th2细胞因子在眼肌型重症肌无力转基因小鼠模型中的作用机制

目的观察重组人乙酰胆碱受体(H-AChR)γ亚单位免疫HLA-DQ8转基因小鼠眼肌型实验性自身免疫性重症肌无力(o EAMG)模型体外培养上清液中Th1/Th2细胞因子水平变化,探讨其与o EAMG免疫学发病机制的联系。方法 HLA-DQ8转基因小鼠用乳化于完全弗氏佐剂(CFA)的重组H-AChRγ亚单位,或E. Coli提取物,或纯CFA分别免疫,分别于第0天、第30天和第60天共免疫3次。第3次免疫后28 d,处死小鼠后取淋巴结和脾淋巴细胞体外培养,收集培养上清液,采用ELISA法检测白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-6和IL-10水平。结果 H-AChRγ组小鼠淋巴结及脾淋巴细胞体外培养上清液中IL-2 (F=42. 835,P <0. 001; F=38. 030,P <0. 001)和INF-γ水平(F=76. 332,P <0. 001;F=34. 865,P <0. 001)均明显高于E. coli组和CFA免疫组; IL-6 (F=1. 325,P=0. 284; F=1. 935,P=0. 166)和IL-10水平(F=0. 908,P=0. 417; F=1. 189,P=0. 322)与E. coli组和CFA组差异无统计学意义。结论 Th1细胞因子在重组H-AChRγ亚单位诱导HLA-DQ8转基因小鼠所建立oEAMG模型的发病机制中可能发挥重要作用,而Th2细胞及其细胞因子作用尚不十分明确。

迷走神经电刺激对实验性关节炎大鼠T细胞活化的调节机制

目的探讨迷走神经刺激对实验性关节炎(EA)大鼠T细胞活化的调节作用及其机制。方法建立大鼠EA模型,将模型大鼠分为迷走神经刺激(VNS)组和假手术组。VNS组在完全清醒状态下予迷走神经电刺激,刺激参数:波宽1.0ms、电流强度3.0mA、频率16Hz、串长10s、串隔1.5min,每日30min,共4周。用流式细胞及免疫荧光技术检测大鼠外周血CD4+ T淋巴细胞活化(表达CD71)及表达烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的状态。结果治疗1周后VNS组大鼠外周血CD4+T细胞表达nAChRα7、ChAT明显高于假手术组(Pa<0.01);2周后VNS组大鼠外周血活化的CD4+ T淋巴细胞明显低于假手术组(P<0.01);治疗3周后VNS组大鼠关节炎指数明显低于假手术组(P<0.01)。结论电刺激迷走神经可以上调nAChRα7在CD4+ T淋巴细胞中的表达,激活免疫系统的固有胆碱能系统,通过抑制免疫细胞异常活化,减少炎性细胞因子合成及分泌,减轻关节炎症,从而实现对EA的治疗作用。

条件性免疫反应对大鼠胶原性关节炎的作用机制研究

目的:在已证明条件免疫反应(CIR)能够有效治疗大鼠胶原性关节炎(CIA)的前期研究基础上,进一步探讨其对大鼠CIA的作用机制。方法:建立大鼠CIA模型。将模型大鼠分为5组:CIR组,以樟脑气味为条件刺激,甲氨喋呤(MTX) +泼尼松(Pred)为非条件刺激,两者结合7次( 7天)后可建立条件免疫反应,然后每日再现条件刺激,条件刺激与非条件刺激每周结合1次,共4周;MTX +Pred组,MTX +Pred治疗4周;MTX +Pred减量组,MTX +Pred治疗7天内每天1次,7天后每周1次,共4周;单纯闻樟脑气味组,单纯闻樟脑气味4周;空白对照组,安慰剂治疗4周。用流式细胞技术检测大鼠外周血CD4 +T淋巴细胞活化(表达CD71)及表达烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的状态;免疫组织化学检测nAChRα7、ChAT、CD6 8(巨噬细胞标志)和TNFα在关节滑膜细胞的表达。结果:治疗1周后CIR组大鼠外周血CD4 +T淋巴细胞表达nAChRα7和ChAT明显高于其他各组(P <0 0 1) ;CIR组与MTX +Pred组大鼠,2周后外周血活化的CD4 +T淋巴细胞(表达CD71)明显减少(P <0 0 1) ,3周后大鼠关节炎指数明显低于其他各组(P <0 0 1) ;4周后滑膜组织表达CD6 8及TNFα明显降低(P <0 0 5 ) ;CIR组大鼠表达nAChRα7和ChAT明显高于其他各组(P <0 0 1)。

特发性癫痫基因定位的研究进展

近几年来,特发性癫痫的基因定位研究取得了很大的进展,通过连锁分析已定位了20多个染色体位点,少数致病基因已经被证实并克隆。其中钾离子通道亚单位、钠离子通道亚单位以及烟碱乙酰胆碱受体亚单位的编码基因突变均有报道。这些发现提示了配体门控和电压门控离子通道在特发性癫痫病因学上的重要地位。

吸烟和CHRNA4基因簇上rs3787140位点多态性与肺癌的关联

目的探讨在中国男性人群中吸烟、烟碱型乙酰胆碱受体亚单位α4（CHRNA4）上rs3787140位点多态性与肺癌的关联。方法采用病例-对照研究设计,共收集204例男性原发性肺癌病例和821名正常健康男性对照者。采用结构式问卷调查人口学特征、吸烟行为及健康相关行为等信息,并采集静脉血检测CHRNA4基因簇上单核苷酸多态性位点rs3787140的多态性。应用Kruskal-Walis检验方法和多因素logistic回归模型分析吸烟、CHRNA4基因簇上的基因多态性与肺癌的关联。结果采用多因素logistic回归校正混杂因素后,rs3787140基因多态性与患者的病理类型及解剖位置无关;rs3787140基因型分布在吸烟与不吸烟的人群中的差异无统计学意义;rs3787140的基因多态性并不增加发生肺癌的风险,未发现rs3787140的多态性和吸烟对肺癌存在交互作用。结论吸烟和CHRNA4rs3787140多态性及其交互作用并非肺癌发生的危险因素。

汉族儿童热性惊厥与CHRNA4和SYN2基因多态性的关联研究

目的探讨神经元烟碱乙酰胆碱受体α-4亚单位基因（CHRNA4基因）和突触蛋白Ⅱ基因（SYN2基因）的单核苷酸多态性（SNP）是否可作为北方汉族儿童单纯性热性惊厥（FS）发病的基因标志物。方法用SNaPshotSNP分型技术对北方汉族141例单纯性FS患儿（病例组）和130例健康儿童（健康对照组）进行CHRNA4基因rs1044396、SYN2基因rs3773364位点分型，比较SNP基因型和等位基因频率的差异。结果病例组与健康对照组在rs1044396和rs3773364的基因型和等位基因频率的差异均无统计学意义（P均〉0．05）；对CHRNA4基因rsl0443963种基因型A／A、A／G、G／G的Fs患儿的临床资料比较，显示首次惊厥的年龄差异具有统计学意义（x2=17．206，P〈0．001），而SYN2基因rs3773364的3种基因型C／C、C／T、T／T的FS患儿在性别、首次惊厥年龄和首次惊厥时体温的差异均有统计学意义（x2=21．458、8．717、10．424，P均〈0．05）。结论无论CHRNA4基因rs1044396还是SYN2基因rs3773364的多态性可能均与北方汉族儿童FS的发病无关联，但对患儿首次惊厥的年龄和体温有一定影响。

经皮耳穴迷走神经刺激治疗功能性消化不良的机制研究

目的:观察经皮耳穴迷走神经刺激(taVNS)对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃敏感性及胃动力的影响,探讨其作用机制。方法:选用5日龄SD大鼠,以灌服碘乙酰胺法复制FD模型。大鼠随机分为空白组、模型组、taVNS组、膈下迷走神经刺激组、膈下迷走神经假刺激组。taVNS组大鼠予以taVNS,膈下迷走神经刺激组通过植入的电极给予膈下迷走神经刺激,膈下迷走神经假刺激组仅植入电极而不予刺激,模型组不予刺激。以上干预均为30min/次,1次/d,连续干预14d。分别于干预前后检测各组大鼠颈斜方肌肌电(EMG)变化率,于干预后测定胃排空率,ELISA法检测十二指肠组织乙酰胆碱(ACh)、烟碱型乙酰胆碱N型受体α7亚单位(α7nAChR)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,Western blot法测定十二指肠组织中核因子-κB(NF-κB)p65的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠在40、60、80mm Hg压力时颈斜方肌EMG变化率、十二脂肠组织NF-κB p65表达及IL-6、IL-1β、TNF-α含量均升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),胃排空率、十二脂肠组织ACh及α7nAChR含量均降低(P<0.05,P<0.001)。与模型组比较,taVNS组、膈下迷走神经刺激组大鼠颈斜方肌EMG变化率、十二脂肠组织NF-κB p65表达及IL-6、IL-1β、TNF-α含量均降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),胃排空率、十二脂肠组织ACh及α7nAChR含量均升高(P<0.05,P<0.001)。与膈下迷走神经假刺激组比较,膈下迷走神经刺激组和taVNS组大鼠颈斜方肌EMG变化率、十二脂肠组织NF-κB p65表达及IL-6、IL-1β、TNF-α含量均降低(P<0.01,P<0.05,P<0.001),胃排空率、十二脂肠组织ACh及α7nAChR含量升高(P<0.01,P<0.001)。结论:taVNS可降低FD大鼠胃敏感性,促进胃排空,其作用机制可能与促进十二指肠ACh及α7nAChR表达进而抑制NF-κB信号通路激活密切相关。