大果榕果实乙醇提取物抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性

研究大果榕果实的多酚含量及其抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性,为其进一步开发利用奠定基础。以采自海南保亭七仙岭的大果榕果实为实验材料,用体积分数65%的乙醇提取大果榕果实多酚,采用Folin-酚法测定总酚含量。对获得的大果榕果实多酚进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基、羟自由基(·OH)清除率以及α-葡萄糖苷酶抑制活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明:大果榕果实多酚含量较高,达1.92 mg/g(以干质量计),其对DPPH自由基、ABTS+·和·OH均具有显著的清除活性,且呈质量浓度依赖性,IC50值分别为141.25、91.20、45.71μg/m L;大果榕果实多酚对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,且呈现明显的质量浓度依赖性,IC50值为102.33μg/m L;同时大果榕果实多酚对乙酰胆碱酯酶也具有一定的抑制活性,IC50值为4.9 mg/m L。研究结果表明大果榕果实多酚具有良好的抗氧化性、α-葡萄糖苷酶抑制活性和一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。

海南山竹果实不同部位多酚提取物抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

了解海南山竹果皮和果肉的多酚含量及其抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,为引导消费、开发利用奠定基础。以采自海南五指山的山竹果实为材料,用95%的乙醇提取山竹果皮和果肉多酚,采用福林-酚法测定总酚含量。对获得的山竹果皮和果肉多酚提取物进行羟自由基(·OH)、DPPH自由基、ABTS自由基清除率以及乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性测定。结果表明,山竹果皮多酚含量很高,达21.36mg/g(干重),对·OH、DPPH自由基和ABTS+·均具有良好的清除活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为37.39、41.34、41.37μg/mL;山竹果皮多酚对乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶也具有很强的抑制活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为29.46、7μg/mL;山竹果肉多酚含量较低,为0.388mg/g(干重),清除DPPH自由基、ABTS+·和·OH活性较弱,但表现出浓度依赖效应。山竹果肉多酚对α-葡萄糖苷酶具有中等程度的抑制活性(IC50为2.24mg/mL),对乙酰胆碱酯酶抑制活性较弱。山竹果皮多酚具有良好的抗氧化性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性;山竹果肉多酚具有中等程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,一定的抗氧化性和乙酰胆碱酯酶抑制活性。

绿碎茶水提物体外抗氧化及α-葡萄糖苷酶与乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

为高效利用绿碎茶资源,采用沸水浸提法与冻干法制备绿碎茶水提物,测定其总酚、总黄酮、总糖以及酸性多糖含量,通过DPPH、ABTS、HRSA、FIC和FRAP五种方法评价其体外抗氧化活性,并研究其对α-葡萄糖苷酶与乙酰胆碱酯酶的抑制活性。结果表明,绿碎茶水提物总糖与酸性多糖、总黄酮及总酚含量分别为256.27mg GE/g、105.45mg AGE/g、218.45mg RE/g及203.72mg GAE/g。绿碎茶水提物对DPPH·、ABTS^(+)·、·OH清除率以及FIC和FRAP的IC_(50)值分别为76.20、22.16、2952.57、643.81及86.86mg/L。绿碎茶水提物对α-葡萄糖苷酶抑制能力(IC_(50)值为0.39mg/mL)强于阿卡波糖(IC_(50)值为0.60mg/mL)。绿碎茶水提物对乙酰胆碱酯酶也具有一定的抑制能力,IC_(50)值为2.70mg/mL。因此,绿碎茶水提物具有植物源天然抗氧化剂及α-葡萄糖苷酶与乙酰胆碱酯酶抑制剂的开发潜力。

玉米须总黄酮抗糖基化、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖甘酶抑制活性分析

研究玉米须总黄酮抗糖基化、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖甘酶抑制活性。采用内部沸腾法提取玉米须总黄酮,优化其工艺条件,并对其进行分析。在单因素实验基础上,采用Plackett-Burman法对7个相关因素进行评价,筛选出具有显著性差异的4个因素,并对其进行响应面优化。结果表明,内部沸腾法提取玉米黄酮最佳条件为解析时间16min,解析剂浓度73%,提取时间20min,提取温度为61℃,总黄酮提取得率为4.75±0.69%;玉米须黄酮对晚期糖基化终产物、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶具有一定抑制效果,呈现浓度依赖性,IC50分别为467.90、73.07、151.04μg/mL。抗糖基化、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖甘酶抑制活性与黄酮含量呈正相关(相关系数分别为0.83、0.90和0.87;P<0.05),该研究结果可为潜在的天然产物抑制剂开发提供理论依据。

乙酰胆碱脂酶抑制率法 可快速检测米面果蔬中有机磷农药残留

本文通过对大米、面粉、水果、蔬菜等样品中有机磷农药残留量的实验分析,探讨对米面、果蔬样品中的有机磷农药残留量检验均能适用的方法——乙酰胆碱脂酶抑制率法。实验结果表明,温度和时间对样品中农药残留量提取率有影响,酶抑制率受农药浓度和叶菜表面农药回收率的影响。

果蔬衰老相关的脂氧合酶活性抑制的研究

脂氧合酶（ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ）是果蔬成熟衰老中的关键酶。我们从大豆中提取了脂氧合酶，在植物体外用酶反应动力学的方法进行了其活性抑制的研究，以便筛选出更多的抑制剂。结果发现：半胱氨酸、维生素Ｃ、ＴＢＨＱ等抗氧化剂以及厚朴和白芍的９５％乙醇提取液对脂氧合酶活性有较好的抑制作用。

有机磷化合物抑制乙酰胆碱脂酶的理论探讨

生物体中的乙酰胆碱脂酶(AChE)存在于神经元和肌细胞之间的突触上。它"耐心等待"并在信号通过之后迅速发挥作用。将乙酰胆碱降解为二部分,乙酸和胆碱。此过程有效地终止了信号,使得降解产物得以回收,为下次传导重建新的神经递质。乙酰胆碱酯酶是人体中反应最快的酶之一,降解一个分子约80微秒。有机磷(OP)是一类乙酰胆碱脂酶的有效抑制剂,本文主要阐述的是OP抑制机理理论研究的现状。

化学方法抑制米糠中脂酶活性及对出油率的影响

添加 3%Na2 SO3能有效抑制米糠中的脂酶活性 ,对米糠保鲜效果显著。通过提取米糠油试验 ,添加Na2 SO3后米糠对其出油率和精炼率与新鲜米糠比较并无明显差别。

大白鼠脊髓、脑干和海马乙酰胆碱酯酶活性的研究

采用乙酰胆碱酯酶 (ACh E)组织化学方法 ,观察了大白鼠脊髓、脑干和海马等脑区 ACh E阳性神经元的活性。结果显示 :(1)脊髓 :脊髓前角、后角神经元 ACh E均为中等阳性 ( ) ,脊髓中间外侧核 ACh E呈强阳性 ( )。 (2 )脑干 :延髓中的三叉神经脊束核、舌下神经核 ACh E均呈强阳性 ( ) ,中缝大核 ACh E呈中等阳性 ( ) ;脑桥的蓝斑核 ACh E呈强阳性 ( ) ,而三叉神经中脑核等核团 ACh E呈中等阳性 ( ) ;中脑的非脑神经核团红核、黑质 ACh E呈阳性 (+ )或中等阳性 ( ) ,脑神经核团动眼神经核和动眼神经副交感核 ACh E呈强阳性 ( )。 (3)海马 :海马 CA3区 ACh E为强阳性( ) ,CA2 和 CA1 区为中等阳性 ( )。本实验表明 ACh E阳性神经元广泛分布于中枢神经系统不同脑区 ,为进一步探讨 ACh在中枢神经系统中的作用提供了形态学资料。

番茄碱的制备及其对乙酰胆碱酯酶的抑制作用

本实验采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography-quadrupole timeof-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF-MS)和核磁共振(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR)氢谱、碳谱鉴定从番茄叶中提取并纯化的番茄碱;利用紫外光谱法、分子荧光光谱法和分子对接技术研究番茄碱对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性的影响,同时探究番茄碱与AChE的结合方式,为番茄碱的神经保护机制提供理论依据。结果表明,纯化产物经UPLC-QTOF-MS和^(1)H NMR、^(13)C NMR分析确定为番茄碱。利用紫外光谱法检测出番茄碱可部分抑制AChE的催化活性,并且番茄碱对AChE的抑制作用为竞争性抑制。分子荧光光谱显示,经番茄碱处理的AChE蛋白在340 nm波长处的发射荧光强度下降,并出现红移现象;Autodock分子对接技术分析结果显示,番茄碱与AChE蛋白中的Ser293、Phe295、Phe338、Phe297、Ser125、Gly121、Ser203、Glu202、Gly120、His447、Gly448、Ile451、Trp86、Tyr124、Tyr337、Tyr341、Ile294形成疏水相互作用并与其中的Trp86形成氢键,表明AChE的微环境发生了变化,竞争性地干扰了底物乙酰胆碱与AChE的结合。因此,番茄碱是通过形成氢键和疏水作用的方式抑制AChE活性。

内毒素对红细胞乙酰胆碱酯酶(AchE)活性作用的探讨

大鼠的红细胞在体外经内毒素处理后,其膜乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性显著降低,并发现血浆的存在可进一步加强内毒素降低AchE活性的作用。给大鼠体内注射内毒素同样可以降低AchE的活性。另外,内毒素还可降低狗红细胞膜上AchE的活性,但它对人红细胞膜上AchE影响甚微。凝胶电泳分析结果表明,不同种属的动物,其红细胞膜蛋白图谱不同,推测内毒素影响酶活性很可能与膜蛋白的差异有关。

多巴胺和乙酰胆碱抑制脂多糖刺激原代胶质细胞iNOS的表达

目的 观察多巴胺和乙酰胆碱对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的原代胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)在转录和翻译水平上的影响。方法 培养原代胶质细胞,多巴胺和乙酰胆碱预处理30min后,加入LPS刺激12h和24h,分别采用RT PCR和细胞免疫组化来观察iNOS在转录和翻译水平的变化, 利用Griess方法测量了上清液中内源性生成的NO。结果 多巴胺能明显抑制iNOS的转录;乙酰胆碱在转录水平上对iNOS无影响,但二者在蛋白水平上都能够抑制iNOS的表达和NO的生成。结论 多巴胺和乙酰胆碱通过不同的方式抑制LPS刺激的原代胶质细胞iNOS的表达。

虎杖根中黄酮类化合物对脂氧合酶活性抑制

从虎杖根中提取黄酮类化合物,并研究了提取出的虎杖根黄酮类化合物对大豆和毛尖茶叶中脂氧合酶活性的抑制作用,并与人工合成抗氧化剂BHA和BHT的抑制作用进行比较,结果表明:虎杖根中黄酮类化合物提取率为16.92%。虎杖根黄酮类化合物对大豆(毛尖茶叶)脂氧合酶活性抑制:IC 50=12.53(9.17)mg/mL;BHA:IC 50=1.89(1.98)mg/mL;BHT:IC 50=1.77(1.76)mg/mL,虎杖根黄酮类化合物对大豆脂氧合酶和毛尖茶叶中的脂氧合酶活性都有一定的抑制作用。

酶活性抑制测定农药残毒技术研究

根据有机磷和氨基甲酸酯两类农药的毒理机制，利用离体乙酰胆碱酯酶ＡＣｈＥ（从敏感品系的家蝇头部提取）与食品中微量的农药残留作用，用比色法确定ＡＣｈＥ受抑制的程度，据此计算出农药残留的相当量。该项检测技术不需昂贵的仪器设备，方法快速、准确，能满足测定农药残留量的要求。

两种蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶对杀虫药剂敏感度比较

通过对抑制动力学常数和抑制时间进程曲线的测定,比较了中华蜜蜂Apis cerana ceranaFabricius和意大利蜜蜂Apis m ellifera ligusticaSpinola头部乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)对几种有机磷和氨基甲酸酯类杀虫药剂的敏感度。抑制时间进程曲线显示,意大利蜜蜂头部AChE对毒扁豆碱、灭多威、敌敌畏的敏感度高于中华蜜蜂,而两种蜜蜂对残杀威、硫双灭多威、甲胺磷及久效磷的敏感度没有明显差异。意大利蜜蜂头部AChE对毒扁豆碱、残杀威、硫双灭多威、克百威以及丁硫克百威的双分子速率常数(Ki)值分别为4.003×106、5.744×104、5.249×104、1.986×106和5.492×104(mol/L)-1.m in-1,均高于中华蜜蜂对这几种杀虫药剂的Ki值,后者分别为3.403×106、4.633×104、4.233×104、1.262×106和5.072×104(mol/L)-1.m in-1。但中华蜜蜂头部AChE对灭多威的Ki值却高于意大利蜜蜂,前者为10.408×104,后者为4.872×104(mol/L)-1.m in-1。对AChE被抑制后恢复速率(K3)的测定结果表明,中华蜜蜂头部AChE被残杀威和硫双灭多威抑制后恢复的速率显著低于意大利蜜蜂,但两种蜜蜂被毒扁豆碱、灭多威、克百威和丁硫克百威抑制后恢复的速率差异不显著。

脂氧合酶活性研究及其对食品质量的影响

脂氧合酶(lipoxygenase)是果蔬成熟衰老中的关键酶。我们从大豆中提取脂氧合酶,在植物体外用酶反应动力学的方法对其进行活性研究。结果发现,Ca2+以不同浓度存在对其活性有不同的影响,厚朴和白芍的95%乙醇提取液对脂氧合酶活性有较好的抑制作用。

酚类抑制剂抗5-脂氧合酶的分子对接研究

目的:研究抗5-脂氧合酶酚类抑制剂的结构活性关系及作用机制。方法:构建7个抗5-脂氧合酶阳性酚类抑制剂分子库,利用Autodock 4.2和iGEMDOCK 2.1软件包对受体与抑制剂进行模拟对接研究并计算结合自由能。结果:用Autodock 4.2、iGEMDOCK 2.1计算得到的结合自由能与抑制剂的抑制活性之间都存在良好的相关性,它们的决定系数(R2)依次为0.856 64和0.784 41,标准误差(SD)分别为0.430 92和5.323 35,P值分别为0.002 79和0.007 98;配体与受体之间形成的氢键在决定配体在受体活性部位的构象及定位中起重要作用,但两者结合的主要驱动力为范德华作用力;具有碳氧双键及与该双键共轭的碳碳双键的多环酚类化合物有较强的抗5-脂氧合酶活性。结论:Autodock 4.2比iGEMDOCK 2.1预测抗5-脂氧合酶酚类抑制剂的能力强;具有碳氧双键及与该双键共轭的碳碳双键的多环酚类化合物有较强的抗5-脂氧合酶活性。

低浓度内皮素-1对活性氧抑制肺表面活性物质脂质合成的保护

在离体肺组织培养模型上观察低浓度 (1～ 10 0pmol/L)内皮素 1(endothelin 1,ET 1)对活性氧所致肺表面活性物质 (pulmonarysurfactant,PS)脂质合成障碍及PS脂质主要组分磷脂酰胆碱合成限速酶CTP :磷酸胆碱二胞苷酰基转移酶 (phosphorylcholinecytidylyltransferase ,CCT)活性的影响。结果显示 :(1)黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶超氧阴离子生成系统呈剂量依赖性地降低肺组织 3 H 胆碱的掺入量 ;(2 )ET 1可减轻活性氧所致 3 H 胆碱掺入量的减少和肺组织丙二醛含量的增高 ;但对肺组织超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及总抗氧化能力无明显影响 ;(3)ET 1可分别提高和降低肺组织细胞微粒体和胞浆的CCT活性 ,并可减轻活性氧所致肺微粒体CCT活性的降低。结果表明 ,低浓度ET 1具有保护肺微粒体的CCT活性、减轻氧化性肺损伤所致PS合成障碍的作用 。

毛尖茶叶中的黄酮类化合物对脂氧合酶的抑制性

采用紫外可见光分光光度法,以亚油酸钠为底物,研究了都匀毛尖茶叶中的黄酮类化合物对大豆脂氧合酶活性的抑制作用。结果表明,毛尖茶叶中的黄酮类化合物的提取率为5.227%,毛尖茶叶中的黄酮类化合物对大豆脂氧合酶有一定的抑制效果,并且随着黄酮类化合物的浓度的增加抑制效果增强。