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昆虫乙酰胆碱酯酶基因研究进展 被引量:19
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作者 王敦 唐振华 +1 位作者 尚金燕 张传溪 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期497-503,共7页
对昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC3·1·1·7)的基因结构和表达等方面的研究进展进行了综述。分析了昆虫乙酰胆碱酯酶基因的结构,包括10个外显子的特征。对已经报道的昆虫AChE基因进行了系统归纳,并基于已... 对昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC3·1·1·7)的基因结构和表达等方面的研究进展进行了综述。分析了昆虫乙酰胆碱酯酶基因的结构,包括10个外显子的特征。对已经报道的昆虫AChE基因进行了系统归纳,并基于已知全序列的昆虫AChE基因,进行了昆虫AChE基因的分子进化分析。对昆虫AChE基因的结构特点及其功能,以及昆虫AChE基因的活性位点、AChE的变构与昆虫抗药性的关系进行了探讨。最后对昆虫AChE基因研究中存在的问题和前景进行了分析和展望。 展开更多
关键词 乙酰胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶基因 分子进化 基因突变 抗药性
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松材线虫乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2的克隆和序列分析 被引量:3
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作者 熊玉芬 王暄 +1 位作者 梁中伟 李红梅 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期42-48,共7页
利用RT-PCR和RACE技术克隆了一个松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2,该基因cDNA全长为2010bp,有1878bp的开放阅读框(ORF),推测其编码的蛋白有625个氨基酸;Bx-ace-2基因组克隆长为2192bp,含有7个内含子。氨... 利用RT-PCR和RACE技术克隆了一个松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2,该基因cDNA全长为2010bp,有1878bp的开放阅读框(ORF),推测其编码的蛋白有625个氨基酸;Bx-ace-2基因组克隆长为2192bp,含有7个内含子。氨基酸序列比对和同源性分析显示:松材线虫Bx-ace-2编码的乙酰胆碱酯酶与已报道的秀丽小杆线虫ACE-1、ACE-3和ACE-4型乙酰胆碱酯酶的相似性为28%~31%,而与秀丽小杆线虫ACE-2及甘薯茎线虫、南方根结线虫、大豆胞囊线虫、马铃薯白线虫和胎生网尾线虫的ACE-2型乙酰胆碱酯酶的氨基酸序列相似性为44%~52%。构建的系统进化树也显示:松材线虫乙酰胆碱酯酶与其他线虫的ACE-2型乙酰胆碱酯酶具有相对更近的遗传距离,因此推测该松材线虫乙酰胆碱酯酶也属于ACE-2型。 展开更多
关键词 松材线虫 乙酰胆碱酯酶基因 CDNA克隆 RACE
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橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 林同 李立娜 +1 位作者 常润磊 张宇宏 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期368-370,共3页
利用RT-PCR法和PCR法克隆到橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因(Ace)的2个片段,其中cDNA片段长66bp,翻译获得的氨基酸1~11位与家蝇等13种昆虫相应的序列相同或仅相差1个氨基酸,该序列在GenBank数据库中的接受号为DQ417582;基因组DNA片段长49... 利用RT-PCR法和PCR法克隆到橄榄星室木虱乙酰胆碱酯酶基因(Ace)的2个片段,其中cDNA片段长66bp,翻译获得的氨基酸1~11位与家蝇等13种昆虫相应的序列相同或仅相差1个氨基酸,该序列在GenBank数据库中的接受号为DQ417582;基因组DNA片段长499bp,2个外显子连在一起与意大利蜜蜂等13种昆虫相应基因的氨基酸同源性均高于88%,该序列在GenBank数据库中的接受号为DQ425028。此结果为进一步研究橄榄星室木虱对杀虫剂抗性的分子机理奠定了基础。 展开更多
关键词 橄榄星室木虱 乙酰胆碱酯酶基因 基因克隆 序列分析
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三化螟两个乙酰胆碱酯酶基因克隆及序列分析 被引量:1
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作者 罗光华 宋俊贤 +2 位作者 姚静 郑少秋 方继朝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期521-527,共7页
乙酰胆碱酯酶(ACh E)是有机磷(Organophosphate,OP)和氨基甲酸酯(Carbamate,CB)类杀虫剂的作用靶标。昆虫乙酰胆碱酯酶基因(ace)表达量的上升或基因突变导致其对杀虫剂的敏感性下降是昆虫产生抗药性的重要原因。本研究利用RT-PCR技术和c... 乙酰胆碱酯酶(ACh E)是有机磷(Organophosphate,OP)和氨基甲酸酯(Carbamate,CB)类杀虫剂的作用靶标。昆虫乙酰胆碱酯酶基因(ace)表达量的上升或基因突变导致其对杀虫剂的敏感性下降是昆虫产生抗药性的重要原因。本研究利用RT-PCR技术和c DNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆到三化螟(Scirpophaga incertulas Walker)的两个乙酰胆碱酯酶基因,分别命名为Siace1和Siace2。Siace1的完整开放阅读框(Open reading frame,ORF)长2 085 bp,编码含694个氨基酸的乙酰胆碱酯酶1(Si ACh E1)。Siace2的ORF长1 917 bp,编码含638个氨基酸的乙酰胆碱酯酶2(Si ACh E2)。将三化螟的两个乙酰胆碱酯酶与已报道的各物种的乙酰胆碱酯酶进行相似性比较,结果显示在蛋白水平上,Si ACh E1与台湾稻螟的ACh E1有最高的相似性,达到94%;Si ACh E2与二化螟的ACh E2具有最高的相似性,为98%。本研究为水稻上重要螟虫的乙酰胆碱酯酶基因对比研究提供了基础。 展开更多
关键词 三化螟 乙酰胆碱酯酶基因 克隆
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线虫乙酰胆碱酯酶基因研究进展 被引量:2
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作者 陈玉艳 胡长志 崔汝强 《生物灾害科学》 2015年第4期284-289,共6页
乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是生物神经传导中的一种关键性酶。它可以降解胆碱能突触间的乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,从而保证神经信号在生物体内的正常传递。分析线虫乙酰胆碱酯酶基因的特征... 乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是生物神经传导中的一种关键性酶。它可以降解胆碱能突触间的乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,从而保证神经信号在生物体内的正常传递。分析线虫乙酰胆碱酯酶基因的特征,介绍已报道的线虫AChE基因的特点和功能,对线虫AChE基因研究中存在的问题和前景进行分析和展望。 展开更多
关键词 线虫 乙酰胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶基因
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5龄家蚕乙酰胆碱酯酶基因的转录水平
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作者 曹雅琪 王彬彬 +3 位作者 顾芝亚 张霞 沈卫德 李兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第6期45-46,85,共3页
乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷和氨基甲酸酯类物质的作用靶酶。通过半定量PCR的方法测定家蚕4龄眠到上蔟期的2种ace基因的表达量,并测定该时期家蚕的AChE活性,以及5龄3 d各组织中2种ace基因的表达量。结果表明,ace1基因在4龄眠到5龄第2天,... 乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷和氨基甲酸酯类物质的作用靶酶。通过半定量PCR的方法测定家蚕4龄眠到上蔟期的2种ace基因的表达量,并测定该时期家蚕的AChE活性,以及5龄3 d各组织中2种ace基因的表达量。结果表明,ace1基因在4龄眠到5龄第2天,第6天到第8天的转录表达量较多,第3天到第5天表达量相对较少;ace2基因在4龄眠期转录表达量多,进入5龄后,转录表达量减少且隔天转录表达量大致相同。在5龄中期和后期,AChE各具有1个峰值。5龄3 d,ace1基因在脂肪体、脑、卵巢中的转录表达量多,在其他组织中表达量较少,其中在血液中最少,ace2基因在脂肪体、精巢、卵巢中转录表达量多,在其他组织中表达量较少。 展开更多
关键词 家蚕 乙酰胆碱酯酶基因 转录
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野桑蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmmace1)5′端非翻译区序列的剪切方式分析
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作者 李兵 王东 +5 位作者 王燕红 赵华强 许雅香 卫正国 陈玉华 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期658-662,共5页
通过5′cDNA末端快速扩增(RACE)的方法,克隆了野桑蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmmace1)的cDNA 5′端非翻译区序列(5′UTR)区域,与家蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmace1)的cDNA 5′UTR(242个碱基)进行比较分析表明,Bmmace1的5′UTR包含有231个碱基... 通过5′cDNA末端快速扩增(RACE)的方法,克隆了野桑蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmmace1)的cDNA 5′端非翻译区序列(5′UTR)区域,与家蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmace1)的cDNA 5′UTR(242个碱基)进行比较分析表明,Bmmace1的5′UTR包含有231个碱基,存在2个位点的点突变和一段连续11个碱基的缺失。通过克隆和测序分析野桑蚕基因组中Bmmace1的5′UTR片段,表明Bmmace1和Bmace1基因的RNA剪切都遵循GT-AG规则,但在其cDNA 5′UTR的RNA剪接过程中可能存在差异,Bmmace1在其cDNA上游+33处存在比Bmace1少剪接的序列TGATTTGAAGG,而在其基因组中5′UTR的TGATTTGAAGG序列下游-4位点缺失ACAGA序列。研究结果可为深入探讨Bmmace1基因与野桑蚕产生抗药性的关系提供基础信息。 展开更多
关键词 野桑蚕 乙酰胆碱酯酶基因 剪切方式
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棉铃虫乙酰胆碱酯酶cDNA片段的克隆和序列分析 被引量:12
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作者 任晓霞 韩召军 王荫长 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期121-124,共4页
Acetylcholinesterase (AChE) is the target of organophosphate and carbamate pesticides. Organophosphate resistance is worldspread in the cotton bollworm[Helicoverpa armigera (Hübner)]. With the degenerate primers ... Acetylcholinesterase (AChE) is the target of organophosphate and carbamate pesticides. Organophosphate resistance is worldspread in the cotton bollworm[Helicoverpa armigera (Hübner)]. With the degenerate primers we amplified a 281 bp cDNA fragment of acetylcholinesterase (AChE) gene in H. armigera by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) method using total RNA extracted from 4th larva as the template. The cDNA fragment was inserted into pGEMT vector and then cloned. The deduced amino acid sequence of AChE consisted of 94 residues. The sequence analysis indicated that the deduced amino acid sequence of the cDNA fragment shares high identity with AChE gene from other published insects and animals. The acquired sequence had 84%,79%,74%,70%,70%,72%,68%,61%,55% and 57% of amino acid residues identical to those of Leptinotarsa decemlineata(L.d.), Nephotettix cincticeps(N.c.),Anopheles stephensi(A.s.), Aedes aegypti(A.a.), Lucilia cuprina(L.c.), Drosophila melanogaster(D.m.), Musca domestica(M.d.), Meloidogyne incognita(M.i.), Torpedo californica(T.c.) and Gallus gallus(G.g.), respectively. All these results firmly established that the amplified cDNA fragment was the partial sequence of AChE gene in H. armigera. This is the first report of partial cDNA sequence of AChE in H. armigera. 展开更多
关键词 棉铃虫 RT-PCR 乙酰胆碱酯酶基因 CDNA克隆 序列分析
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褐飞虱乙酰胆碱酯酶启动子的克隆及表观遗传分析
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作者 方君 杨潇 +2 位作者 朱利航 陈俊 杨之帆 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第4期377-383,共7页
褐飞虱Nilaparvata lugens是水稻的重要害虫之一.本研究旨在扩增褐飞虱乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)基因的启动子,并从表观遗传学的角度探讨DNA甲基化与褐飞虱生物型进化间的关系.采用染色体步移(genome walking)方法扩增A... 褐飞虱Nilaparvata lugens是水稻的重要害虫之一.本研究旨在扩增褐飞虱乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)基因的启动子,并从表观遗传学的角度探讨DNA甲基化与褐飞虱生物型进化间的关系.采用染色体步移(genome walking)方法扩增AChE启动子,根据所得启动子序列设计甲基化特异性PCR(MS-PCR)引物和重亚硫酸盐测序法BSP引物,分析褐飞虱生物型Ⅰ和生物型Ⅱ中AChE启动子的甲基化程度,然后利用荧光定量PCR技术检测AChE的表达水平差异.结果表明,扩增得到褐飞虱AChE上游侧翼DNA序列长度为1919 bp,启动子元件分析显示,AChE启动子区域中有若干与MYB、WRKY、ARE等抗性相关转录因子的结合位点(元件),表明该启动子可能与逆境胁迫相关.基于甲基化水平的限制酶酶切位点分析发现,AChE启动子区域含有多个5mCG甲基化位点,表明该区域DNA甲基化主要发生在胞嘧啶的C-5位.MS-PCR分析表明,生物型Ⅰ褐飞虱AChE启动子区域的甲基化程度高于生物型Ⅱ;BSP结果显示生物型Ⅰ启动子区域总体平均甲基化频率(24.09%)高于生物型Ⅱ(7.27%);实时定量PCR结果显示,AChE在生物型Ⅱ中的表达量高于生物型Ⅰ.本研究克隆得到AChE启动子序列,并证实褐飞虱生物型间AChE的表达存在差异,且启动子区域高甲基化水平可能是导致AChE低表达的原因之一. 展开更多
关键词 褐飞虱 乙酰胆碱酯酶基因启动子 DNA甲基化 基因表达 生物型
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辛硫磷、灭多威和dsRNA饲喂对棉铃虫ace基因表达的影响 被引量:2
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作者 张亭 杨璇璇 +2 位作者 雷勤 刘娟娟 李继刚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期160-165,共6页
乙酰胆碱酯酶(ACh E)是有机磷与氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标,以棉铃虫体内乙酰胆碱酯酶为对象,通过检测辛硫磷、灭多威两类农药处理和饲喂ace ds RNA表达菌对乙酰胆碱酯酶基因(ace1、ace2)转录活性的影响,为阐明棉铃虫化学防治及基于R... 乙酰胆碱酯酶(ACh E)是有机磷与氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标,以棉铃虫体内乙酰胆碱酯酶为对象,通过检测辛硫磷、灭多威两类农药处理和饲喂ace ds RNA表达菌对乙酰胆碱酯酶基因(ace1、ace2)转录活性的影响,为阐明棉铃虫化学防治及基于RNAi的防治提供一定的参考。实验采用实时荧光定量PCR方法,分析辛硫磷、灭多威对棉铃虫4龄幼虫诱导12 h、24 h、36 h、48 h、60 h后ace基因的转录水平,利用表达ds RNA的菌液喂食2龄棉铃虫进行RNAi后检测ace基因的沉默效果。结果显示:灭多威和辛硫磷处理后,在12 h时,ace1和ace2皆显著下调,其后,ace1表达下调而ace2上调;RNAi处理后,棉铃虫ace1、ace2基因表达量在24 h、48 h下调明显,随后表达量略有上调。推测农药处理使棉铃虫幼虫生理代谢破坏造成ace1、ace2表达降低,随后ace1基因表达持续下降,而ace2表达逐渐升高,这可能与补偿农药对Ach E酶活性的抑制有关;RNAi处理使棉铃虫生长发育受到不同程度的抑制,ace1和ace2基因都出现明显的表达抑制。以上结果为以乙酰胆碱酯酶及其编码基因为靶标的棉铃虫防治提供了参考。 展开更多
关键词 棉铃虫幼虫 辛硫磷 灭多威 乙酰胆碱酯酶基因 RNAI
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蓖麻蚕对辛硫磷农药的代谢抗性机制
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作者 陈立华 张月华 +3 位作者 钱荷英 孙平江 李刚 徐安英 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第1期264-266,共3页
将40%辛硫磷原液稀释成35~70 mg/L浓度区间的8个浓度梯度,采用浸叶法测定了辛硫磷对于5龄第3天蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)24 h的半致死浓度(LC50),计算出40%辛硫磷乳油对蓖麻蚕的LC50(24 h)为51.81 mg/L。用实时荧光定量... 将40%辛硫磷原液稀释成35~70 mg/L浓度区间的8个浓度梯度,采用浸叶法测定了辛硫磷对于5龄第3天蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)24 h的半致死浓度(LC50),计算出40%辛硫磷乳油对蓖麻蚕的LC50(24 h)为51.81 mg/L。用实时荧光定量PCR(RT-qRCR)方法检测添食50 mg/L辛硫磷后蓖麻蚕乙酰胆碱酯酶基因Pcrace1、Pcrace2在不同组织(血液、脂肪体、中肠、丝腺、头)中的表达变化,结果显示:在添食辛硫磷之后,Pcrace1、Pcrace2在各组织中的表达都有变化,其中Pcrace1在头部、脂肪体的转录表达量分别比对照组高10.66、26.50倍;Pcrace2在头部、脂肪体的转录表达量分别比对照组高24.73、14.56倍;Pcrace1、Pcrace2表达量在中肠、丝腺中的变化不大,上调的倍数分别是7.65、5.62与3.44、2.34倍;Pcrace1、Pcrace2在血液中几乎无表达变化,表达变化倍数分别为2.52、1.11倍。结果表明,Pcrace1、Pcrace2主要在脂肪体、头部发挥代谢解毒作用,而中肠、丝腺等组织对农药辛硫磷的代谢解毒作用较小,血液几乎不参与解毒作用。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 辛硫磷 半致死浓度(LC50) 代谢解毒 乙酰胆碱酯酶基因(ace)
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