欧芹酚甲醚肟酯类化合物的制备及其抗乙酰胆碱酯酶活性研究

为研发具有AChE双位点抑制的新型乙酰胆碱酯酶抑制剂,本论文以香豆素类化合物欧芹酚甲醚为先导化合物,通过氧化、还原、酯化等反应设计合成了14个欧芹酚甲醚肟酯衍生物,并经核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)进行结构确证。采用Ellman法测定了目标化合物在1μmol·mL^(-1)下对乙酰胆碱酯酶的抑制活性,结果显示目标化合物4i和4n对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别达到61.6%和51.2%,且与化合物浓度呈正相关。分子对接分析表明化合物4i可以和AChE的催化位点和外周阴离子位点结合。

绶草中活性成分Spiranthol-A的快速制备及抑制乙酰胆碱酯酶活性研究

为建立“大孔吸附树脂柱色谱-凝胶柱色谱-HPLC”三步法快速制备绶草中活性成分Spiranthol-A方法,并评价其抑制乙酰胆碱酯酶活性,在HPLC导向下,将绶草95%乙醇提取物先经大孔吸附树脂柱色谱分离得到含Spiranthol-A部位,再通过Sephadex-LH 20柱色谱和HPLC纯化,得单体化合物Spiranthol-A;采用微孔板法评价Spiranthol-A体外抑制乙酰胆碱酯酶活性。结果表明:Spiranthol-A纯度较高且抑制乙酰胆碱酯酶活性较强,IC_(50)值仅为(10.58±0.44)μg·mL^(-1)。综上,该研究所建立的快速制备Spiranthol-A方法具有一定的应用前景,且Spiranthol-A具有显著抑制乙酰胆碱酯酶作用,值得深入研究。

7种有机磷农药对不同来源乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用比较

目的研究7种不同有机磷农药对不同来源的乙酰胆碱酯酶的敏感性,筛选出适于指示这些农药的敏感酶。方法测定倍硫磷、草甘磷、对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱、久效磷、甲拌磷7种有机磷农药对家蝇(Musca domestica)AChE、电鳗(Electrophorus electricus)电器官AChE活性。结果倍硫磷、草甘磷、对硫磷、毒死蜱、久效磷对家蝇AchE敏感,活性抑制率高于电鳗电器官AchE,在农药质量浓度为1000μg/L时,抑制率最高,分别为85.14%、75.28%、40.94%、85.43%、55.68%;马拉硫磷、甲拌磷对电鳗电器官AchE敏感,抑制率高于家蝇AchE,在农药质量浓度为1000μg/L时,抑制率最高,分别为45.29%、80.58%。结论倍硫磷、草甘磷、对硫磷、毒死蜱、久效磷对家蝇AChE敏感,马拉硫磷、甲拌磷对电鳗电器官AChE敏感。

宋果灵对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用

[目的]认识宋果灵具体的杀虫机制,为开发此类植物源农药以及进行酶法筛选提供毒理学参考。[方法]配制浓度分别为0、0.005、0.01、0.020、.0350、.05 mg/ml的宋果灵,研究宋果灵对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用及可能的机制。[结果]随着宋果灵浓度的升高,乙酰胆碱酯酶活性逐渐下降,说明宋果灵对乙酰胆碱酯酶活性有抑制作用,线性回归方程为:y=-0.118 9x+99.387,R2=0.934 4,IC50=0.412 mg/ml。宋果灵含有N原子,与质子结合后,带正电,NH4+正离子与Trp84、Phe330的侧链芳环形成阳离子-π相互作用,从而抑制了酶活性。[结论]宋果灵可以作为农药先导化合物,用于合成高效、低毒、无公害的新农药。

血管性痴呆小鼠海马组织学改变及乙酰胆碱酯酶活性变化特征

目的:探讨血管性痴呆(VD)小鼠海马组织病理学改变及乙酰胆碱酯酶病理(AchE)活性的变化特征.方法:将50只小鼠随机分为假手术组和模型组。模型组采用双侧颈总动脉反复缺血再灌注法制备VD模型,术后第29天和第30天测试学习记忆成绩,术后第30天检测海马CA1区组织学变化及AchE含量。结果:VD模型组小鼠学习记忆成绩较假手术组明显下降;海马CA1区锥体细胞数目减少,细胞核体积变小;且模型组小鼠海马AchE活性明显低于假手术组(P<0.01)。结论:小鼠海马组织内的AchE活性下降参与了VD的形成,进一步导致VD小鼠的学习和记忆障碍。

五味子各萃取物抗氧化作用及抑制乙酰胆碱酯酶活性研究

目的研究五味子各萃取物抗氧化能力及抑制乙酰胆碱酯酶活性。方法五味子药材用乙醇加热回流提取后,分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水进行萃取得各组分,采用改良的Ellman方法测定五味子各组分抑制乙酰胆碱酯酶活性,并考察各组分还原能力、清除DPPH自由基作用、清除羟基自由基作用和抗脂质过氧化作用来评价抗氧化作用。结果乙酸乙酯组分(1 mg/ml)对乙酰胆碱酯酶的抑制率为(95.93±0.22)%是所有组分最高,强于阳性对照多奈哌齐(91.97±0.18)%,乙酸乙酯组分DPPH自由基清除率IC_(50)=(0.62±0.01)mg/ml和羟基自由基清除率IC_(50)=(0.07±0.01)mg/ml在所有组分中作用最强。结论乙酸乙酯组分表现出良好的抗氧化作用和抑制乙酰胆碱酯酶活性的能力,为进一步研究五味子中抗氧化及抑制乙酰胆碱酯酶活性成分提供理论依据。

针对有机磷农药对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用研究

目的:对有机磷农药对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用进行探讨。方法:选取2010年1月-2014年12月在笔者所在医院治疗的100例有机磷农药中毒患者,分别对患者中毒后1、24、48、72、120 h及治愈后的乙酰胆碱酯酶活性进行检测,比较患者中毒后与治愈后的乙酰胆碱酯酶活性,进行对照分析。结果:中毒后1、24、48、72、120 h患者血液中乙酰胆碱酯酶活性明显低于治愈后,差异有统计学意义(P<0.05)。100例中毒患者在抢救治疗后,死亡率为13.00%,剩余患者转到相关科室或转院继续进行治疗。结论:急性有机磷中毒后,大大抑制患者的乙酰胆碱酯酶活性,导致乙酰胆碱酶在患者脑组织大量累积,严重影响患者的预后,因此需及时给予患者有效处理,缓解患者神经组织受到的损伤,保证患者脑组织的完整性。

慢性应激对大鼠脑内乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的 观察慢性应激对大鼠脑内乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性的影响 ,以期探明慢性应激对乙酰胆碱代谢的影响。方法 采用组织化学方法研究了大鼠在应激 6天和 15天内AchE的活性。结果 大鼠脑内的尾状核 (ca)、内侧隔核 (ms)和小脑内AchE活性随应激时间延长而升高 ,而海马 (hi)、缰核 (ha)、中央灰质 (cg)和下丘脑 (ic)内AchE活性随应激时间的延长而降低。结论 慢性应激对大鼠脑内乙酰胆碱代谢的影响 ,因部位不同而有所差异。

脑乙酰胆碱酯酶活性PET显像剂[^(11)C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶纯化及鉴定的研究

目的研究脑乙酰胆碱酯酶(AChE)活性PET显像剂[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶(MP4A)的纯化及其鉴定方法。方法用半制备高效液相色谱(HPLC)法,用强极性半制备柱PlatinumEPSC-18分离纯化[11C]MP4A粗产品,流动相使用乙酸铵-乙醇二元体系,一步法收集[11C]MP4A。用UV串联电化学(ECD)法和同位素法检测鉴定终产物[11C]MP4A的化学纯度及放射性纯度。结果用此纯化方法 ,前体(P4A)的保留时间为(2.5±0.3)min;MP4A的保留时间为(9.0±0.3)min;MP4A与P4A及其他杂质完全分离。纯化后的[11C]MP4A终产物经ECD和同位素法检测鉴定,其化学纯度达99%以上,放射纯度达100%。结论用半制备HPLC法可获得高纯度的[11C]MP4A,用ECD和同位素法鉴定准确率高,且本纯化、鉴定方法耗时短,有助于提高[11C]MP4A的质量和产量。

超声波胁迫对松褐天牛成虫乙酰胆碱酯酶活性的影响(英文)

一定频率的超声波对昆虫的生理行为会产生一定的影响,它是一种环境胁迫因子.研究了在超声波驱虫器LHC20-1的超声辐照下,松褐天牛成虫体内乙酰胆碱酯酶活性的变化.研究结果表明:超声波胁迫对不同超声辐照时间下和不同日龄的松褐天牛成虫乙酰胆碱酯酶活性有影响,但不存在性别差异.松褐天牛成虫乙酰胆碱酯酶活性随着超声波辐照时间的变化而变化.在超声波辐照30、45和60min时,松褐天牛成虫(1日龄)的乙酰胆碱酯酶活性分别是对照组的1.39、1.11和1.09倍.不同日龄的松褐天牛成虫对超声波胁迫的应答存在差异.在超声波辐照30min下,1日龄的松褐天牛成虫乙酰胆碱酯酶活性显著升高,而5日龄的松褐天牛成虫乙酰胆碱酯酶活性显著降低.这些结果表明,超声波胁迫能够影响松褐天牛成虫乙酰胆碱酯酶活性,从而对其胆碱能系统进行调控.

羊栖菜抑制乙酰胆碱酯酶活性油脂成分的提取优化

【目的】建立药食同源海藻羊栖菜抑制乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性油脂成分的优化提取工艺,探明其主要活性组分的具体化学成分。【方法】以提取物质量浓度1 mg/mL下的乙酰胆碱酯酶抑制率×提取物质量为指标,比较各个溶剂比、料液质量体积比、超声时间和提取次数等四个单因素水平下的抑制AChE活性成分提取效果,确定各个单因素中的最优水平范围,进而设计正交实验优化提取工艺条件;按最优提取工艺条件下提取制备粗浸膏,运用硅胶柱色谱法、薄层层析等方法对粗浸膏进行分离纯化并追踪其活性组分,运用气相色谱-质谱联用GC-MS进行成分分离与鉴定。【结果】羊栖菜抑制AChE活性成分的最优提取条件为:溶剂乙酸乙酯、石油醚体积比为5∶5,料液质量(g)体积(mL)比为1∶10,超声时间30 min,提取次数3次。此条件下对应的提取物质量浓度1 mg/mL下乙酰胆碱酯酶抑制率(%)×提取物质量(g)的值为7.078±1.038。从该粗提物中分离得到两个具有抑制AChE活性的组分Fr2和Fr3,主要成分为花生四烯酸、亚油酸、油酸等脂肪酸,Fr3还含有十四烷等多种烷烃。其抑制IC_(50)值分别为2.69 mg/mL和5.31 mg/mL。【结论】本研究确定的基于石油醚-乙酸乙酯混合溶剂的超声提取工艺可得到较高产量的羊栖菜抑制AChE活性成分,其主要成分为脂肪酸,可能在改善记忆方面具有一定应用价值。

马醉木二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

为研究马醉木叶中的二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性,该研究根据薄层色谱显色特征,使用硅胶、MCI和半制备高效液相等色谱技术对其进行分离与纯化,并通过波谱数据(NMR和MS)分析且结合文献报道数据进行对比,鉴定了所得化合物的结构,同时采用Ellman法首次对其乙酰胆碱酯酶抑制活性进行评价。结果表明:从马醉木叶中分离并鉴定了8个二萜化合物,分别是pierisformoside F(1)、3-epi-grayanotoxinⅩⅧ(2)、3-epi-grayanotoxin B(3)、asebotoxin-X(4)、pierisformosin B(5)、asebotoxinⅢ(6)、rhodojaponinⅢ(7)和pierisformosin C(8)。其中,化合物1为首次从该植物中分离得到,化合物8表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。综上表明,马醉木中含有丰富的二萜成分和活性成分。该研究结果丰富了马醉木的化学成分多样性,为其后续综合开发和利用提供了一定的理论依据,也为寻求更多的活性成分提供了借鉴。

干燥方式对绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病及乙酰胆碱酯酶抑制活性的影响

研究不同干燥方式处理的绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病活性及对乙酰胆碱酯酶抑制作用。以绿碎茶为试验材料,采用蒸干结合真空干燥与真空冷冻干燥2种干燥工艺对绿碎茶乙酸乙酯萃取相进行干燥处理,比较研究了2种提取物的色泽,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、羟自由基(·OH)清除能力和铁离子还原能力以及α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶的抑制能力和抗糖基化能力。结果表明,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-FD)较蒸干结合真空干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-SVD)颜色相对偏黄,具有较强的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH清除能力和铁离子还原能力,其IC_(50)值分别为2.64、5.17、247.01、27.73 mg/L。同时,BGTE-FD具有较高的α-淀粉酶、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用,IC_(50)值分别为85.84、416.45、4.38 mg/L,且其对α-葡萄糖苷酶的抑制能力显著强于阿卡波糖(IC_(50)值为929.59 mg/L)。此外,BGTE-FD和BGTE-SVD对晚期糖基化终产物抑制率分别高达65.28%和63.66%,略低于氨基胍(71.81%)。因此,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物具有较强的体外抗氧化和抗糖尿病活性及一定的乙酰胆碱酯酶抑制能力,绿碎茶可作为降血糖和抗痴呆产品的潜在资源。

基于薄层色谱生物自显影技术的傣药莫哈蒿抗乙酰胆碱酯酶活性研究

探索建立抗乙酰胆碱酯酶活性的薄层色谱(TLC)生物自显影方法,研究傣药莫哈蒿中鸭嘴花碱等化学成分的抗乙酰胆碱酯酶活性,为寻找新的阿尔茨海默病(AD)药物提供参考。方法 采用薄层色谱分离和抗乙酰胆碱酯酶活性测定相结合的TLC生物自显影技术,对傣药莫哈蒿提取液开展抗乙酰胆碱酯酶活性研究。结果 建立了一种稳定可靠的检测抗乙酰胆碱酯酶活性的TLC生物自显影方法,傣药莫哈蒿鲜品及干品、不同部位提取液均具有抗乙酰胆碱酯酶活性,其活性大小为:鲜品>干品,叶>根>茎。结论 傣药莫哈蒿具有抗乙酰胆碱酯酶活性,可作为国内外高发疾病AD治疗药物的天然乙酰胆碱酯酶抑制剂进一步深入研究。

益智仁盐炙前后挥发油的GC-MS分析及抗乙酰胆碱酯酶活性测定

目的对临床治疗老年痴呆方剂中的常用中药益智仁盐炙前后挥发油的化学成分进行比较,并评价其对乙酰胆碱酯酶(ACh E)的抑制活性。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,运用气相色谱-质谱(GC-MS)联用法对挥发油化学成分进行分析,利用薄层色谱(TLC)生物自显影技术评价挥发油的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果益智仁经盐炙后,挥发油提取率降低。从益智仁盐炙前后的挥发油中分别鉴定出29种化学成分,其中圆柚酮含量最高,其次为瓦伦亚烯;炮制前后挥发油中四个成分发生了变化:菖蒲烯、喇叭茶醇、氧化石竹烯和香附子烯仅在生益智仁中检出;而桉叶-11烯-1a-醇、9,10-脱氢异长叶烯、古芸烯环氧化物、1R,4R,7R,11R-1,3,4,7-四甲基三环[5.3.1.0(4,11)]-十一-2-烯仅在盐益智仁中检出。盐炙前后益智仁挥发油成分均具有一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论益智仁盐炙前后挥发油成分有部分变化,盐炙可除去喇叭茶醇这一潜在的毒性倍半萜类成分;益智仁挥发油的乙酰胆碱酯酶抑制活性可能与其治疗老年痴呆作用密切相关。

氰戊菊酯对小鼠学习记忆功能及脑组织乙酰胆碱酯酶活性的影响

氰戊菊酯（fenvalerate，Fen）是一种新兴的拟除虫菊酯类农药，因其具有高效、光谱的杀虫效果，而且低残留、低毒，所以近年来被广泛应用^[1]。毒理学研究表明Fen为神经毒物，但Fen对学习记忆功能的影响尚未见研究报告，且其毒性作用机制未完全阐明^[2-3]。本研究对Fen染毒后小鼠学习记忆功能及其脑组织中乙酰胆碱酯酶（AchE）活性进行了研究，旨在探讨Fen对学习记忆功能的影响及其机制，并为Fen中毒防治提供一定依据。

杨梅素及其类似物抗氧化与乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

目的:探讨杨梅素、杨梅苷及二氢杨梅素的抗氧化和乙酰胆碱酯酶抑制活性。方法:采用DPPH自由基清除和乙酰胆碱酯酶抑制高通量筛选模型进行研究。结果:杨梅素、杨梅苷和二氢杨梅素清除DPPH自由基的IC50值分别为18.34、28.89、10.70μg/mL,三种化合物的抗氧化活性均强于阳性药芦丁(IC50=31.32μg/mL),其中二氢杨梅素还强于VC(IC50=14.69μg/mL);在质量浓度为0.25mg/mL时,杨梅素、杨梅苷和二氢杨梅素对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别为:30.66%±4.05%、38.48%±1.98%、78.81%±2.23%,其中二氢杨梅素对乙酰胆碱酯酶抑制作用较显著,其IC50值为1546±47.05μmol/L。结论:杨梅素、杨梅苷、二氢杨梅素均具有显著的DPPH自由基清除能力,本文首次报道二氢杨梅素具有较好的乙酰胆碱酯酶抑制活性,值得进一步深入研究。

大果榕果实乙醇提取物抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性

研究大果榕果实的多酚含量及其抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性,为其进一步开发利用奠定基础。以采自海南保亭七仙岭的大果榕果实为实验材料,用体积分数65%的乙醇提取大果榕果实多酚,采用Folin-酚法测定总酚含量。对获得的大果榕果实多酚进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基、羟自由基(·OH)清除率以及α-葡萄糖苷酶抑制活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明:大果榕果实多酚含量较高,达1.92 mg/g(以干质量计),其对DPPH自由基、ABTS+·和·OH均具有显著的清除活性,且呈质量浓度依赖性,IC50值分别为141.25、91.20、45.71μg/m L;大果榕果实多酚对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,且呈现明显的质量浓度依赖性,IC50值为102.33μg/m L;同时大果榕果实多酚对乙酰胆碱酯酶也具有一定的抑制活性,IC50值为4.9 mg/m L。研究结果表明大果榕果实多酚具有良好的抗氧化性、α-葡萄糖苷酶抑制活性和一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。

海南山竹果实不同部位多酚提取物抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

了解海南山竹果皮和果肉的多酚含量及其抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,为引导消费、开发利用奠定基础。以采自海南五指山的山竹果实为材料,用95%的乙醇提取山竹果皮和果肉多酚,采用福林-酚法测定总酚含量。对获得的山竹果皮和果肉多酚提取物进行羟自由基(·OH)、DPPH自由基、ABTS自由基清除率以及乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性测定。结果表明,山竹果皮多酚含量很高,达21.36mg/g(干重),对·OH、DPPH自由基和ABTS+·均具有良好的清除活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为37.39、41.34、41.37μg/mL;山竹果皮多酚对乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶也具有很强的抑制活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为29.46、7μg/mL;山竹果肉多酚含量较低,为0.388mg/g(干重),清除DPPH自由基、ABTS+·和·OH活性较弱,但表现出浓度依赖效应。山竹果肉多酚对α-葡萄糖苷酶具有中等程度的抑制活性(IC50为2.24mg/mL),对乙酰胆碱酯酶抑制活性较弱。山竹果皮多酚具有良好的抗氧化性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性;山竹果肉多酚具有中等程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,一定的抗氧化性和乙酰胆碱酯酶抑制活性。

桃金娘果实多酚抗氧化活性及乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

为了探明桃金娘果实的多酚含量及其多酚的抗氧化活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性,以为进一步开发利用奠定基础。以采自海南海口的桃金娘整果为实验材料,用95%体积分数的乙醇提取桃金娘多酚,采用福林酚法测定其总酚含量。对获得的桃金娘多酚进行DPPH、ABTS、羟基自由基清除率和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明,桃金娘的多酚含量较高,达2.45 mg/g干物质,其对DPPH、ABTS和羟基自由基均具有显著的清除活性,并且其活性随着浓度的增加,清除能力也随之增强,其IC50分别为120.78、25.44、194.09μg/m L;桃金娘果实多酚对乙酰胆碱酯酶也显示出较强的抑制活性,IC50为15.07μg/m L,且随着浓度的增加,其抑制活性呈上升趋势。该实验显示桃金娘果实多酚不仅具有较好的抗氧化性还具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性。