褪黑素合成酶ASMT基因过表达奶山羊生物安全评价研究

为了研究乳腺过表达褪黑素合成限速酶乙酰血清素甲基转移酶(ASMT,HIOMT)基因奶山羊的生物安全性,试验针对乳腺过表达褪黑素合成酶ASMT基因奶山羊模型,记录了转基因山羊的生长发育数据、检测了血液及尿液中生理生化指标,并对肠道微生物、乳成分及褪黑素含量进行分析。结果表明:1)转基因阳性羊0,3,6,12月龄体重、体长、身高和胸围四项生长指标和对照羊均无显著差异(P>0.05);2)转基因阳性羊体温、胆固醇、血糖、总蛋白和各类型细胞含量及尿液中蛋白质、葡萄糖含量等指标与对照羊无显著差异(P>0.05);3)16S r DNA菌群测序结果表明,转基因阳性羊与对照羊肠道微生物群落组成及优势菌群均无显著差异(P>0.05);4)转基因阳性羊褪黑素含量显著高于对照羊(P<0.05),且乳中褪黑素含量显著高于血液(P<0.05),转基因阳性羊乳中乳蛋白和干物质含量显著高于对照羊(P<0.05),转基因阳性羊体细胞数显著低于对照羊(P<0.05)。说明乳腺过表达褪黑素合成限速酶ASMT基因不影响转基因奶山羊健康,而且会提高奶山羊乳品质。

褪黑素合成酶在绵羊胃中的表达

旨在了解绵羊各胃中褪黑素的合成情况。采取绵羊瘤胃背囊、瘤胃腹囊、网胃、瓣胃和皱胃等5个部位,用免疫组化、Western blot、RT-qPCR等方法,探讨褪黑素合成的关键酶AANAT和HIOMT在不同胃的定位和相对表达情况。结果表明,AANAT和HIOMT蛋白在绵羊各胃均有分布,且在各胃的黏膜层呈强阳性表达,其中在皱胃的表达量最高,AANAT在瘤胃背囊和瘤胃腹囊的表达量最低,而HIOMT在瘤胃背囊的表达量最低;AANAT和HIOMT mRNA水平均显示在网胃最高,其中AANAT在瘤胃背囊和瓣胃表达最低,而HIOMT在皱胃中表达最低。综上所述,在绵羊不同胃中均有AANAT和HIOMT的表达,并且AANAT和HIOMT存在表达差异,说明绵羊胃也具有自主合成褪黑素的功能,提示褪黑素可能通过自分泌和旁分泌的作用方式对绵羊胃功能活动进行调控,为进一步研究褪黑素对绵羊胃功能的调控作用机制提供了理论基础。