石榴皮提取物指纹图谱的建立及指标成分含量测定

为建立石榴皮提取物的指纹图谱及指标成分含量测定的高效液相色谱方法,为石榴皮提取物质量控制提供参考,文章采用高效液相色谱法建立石榴皮提取物指纹图谱,并通过相似度评价结合化学计量法分析10个批次石榴皮提取物的质量差异,同时以安石榴苷和鞣花酸作为指标成分建立含量测定方法。结果表明,建立10个批次石榴皮提取物指纹图谱,共28个共有峰,其中8号峰为α-安石榴苷,13号峰为β-安石榴苷,28号峰为鞣花酸,S2、S4、S103个批次的石榴皮提取物的相似度<0.9,聚类分析将10个批次石榴皮提取物分为5类,通过VIP值筛选确定安石榴苷和鞣花酸为主要差异性指标成分,测得安石榴苷和鞣花酸含量分别为28.80~288.90 mg/g和6.12~17.73 mg/g。该研究建立的指纹图谱及含量测定方法可为石榴皮提取物质量控制与评价提供参考。

SPE-HPLC-UV法测定绞股蓝提取物中皂苷的含量

本试验旨在建立固相萃取-高效液相色谱-紫外检测法(SPE-HPLC-UV)对绞股蓝提取物中绞股蓝皂苷XLIX和皂苷A进行定量分析。样品经甲醇提取,采用C_(18)固相萃取柱净化,使用Kinetex C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.6μm)分离,流动相乙腈/水,柱温40℃,检测波长203 nm。依照此法测定绞股蓝粗提物中三萜皂苷XLIX和皂苷A的含量。结果表明:2种绞股蓝皂苷在一定质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.999),平均回收率为91.38%~98.4%,相对标准偏差为0.69%~2.48%。该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合检测技术要求,且简便快速,适用于绞股蓝提取物中绞股蓝皂苷XLIX和皂苷A含量的准确测定。

蛇莓提取物中咖啡酸、紫云英苷和翻白叶苷A的含量测定

建立蛇莓提取物中咖啡酸、紫云英苷和翻白叶苷A的含量测定方法。采用HPLC法,Hypersil ODS-C18(250×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.15%三氟乙酸水溶液(B)进行梯度洗脱;检测波长:330 nm,流速:1 mL·min^(-1);柱温35℃。咖啡酸、紫云英苷和翻白叶苷A分别在5.91~236.4μg·mL^(-1)、4.18~167.2μg·mL^(-1)、3.548~141.9μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.19%、98.99%和99.00%。该方法准确、方便快捷,可操作性高,可用于蛇莓提取物的质量控制。

牡丹叶提取物的含量测定及其协同羧甲基壳聚糖的抗菌活性研究

目的牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)是毛茛科芍药属的多年生落叶灌木,其根皮被称为“牡丹皮”,药用历史悠久,其传统非药用部位“叶”在民族地区应用广泛,研究牡丹叶的药用价值是提高中药资源综合利用的有益尝试。牡丹叶含有的多酚、黄酮类活性成分,在抑菌、抗氧化和抑制酪氨酸酶等方面作用显著。方法采用甲醇提取法获取牡丹叶提取物,建立同时测定牡丹叶提取物中5种活性成分(没食子酸、芍药苷、山奈素、槲皮素和异鼠李素)含量的高效液相色谱(HPLC)法。同时,采用Folin-Ciocalteu法和硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定了牡丹叶提取物中总黄酮和总多酚的含量。立足羧甲基壳聚糖(CMCS)抗菌活性和良好的载药特性,研究其与牡丹叶提取叶的协同机制。结果含量测定结果显示,牡丹叶中没食子酸、芍药苷、山奈素、槲皮素和异鼠李素的含量分别为17.780%、0.470%、1.150%、1.920%和3.160%,其线性关系、稳定性、重复性和精密度等均良好。体外抗菌活性结果显示,牡丹叶提取物(PLE)与CMCS联用的FICI系数均小于0.500,其对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌效果均表现为协同作用。结论牡丹叶提取物中含有较高的多酚类和黄酮类成分,并且与CMCS具有较强的协同作用。为进一步开发牡丹叶与羧甲基壳聚糖相关抗菌制剂的研制提供联用数据支撑,为牡丹药用资源的综合利用奠定基础。

RP-HPLC法同时测定紫苏叶提取物没食子酸、迷迭香酸、木犀草素含量研究

目的建立安徽地区紫苏叶中没食子酸、迷迭香酸和木犀草素成分的含量同时检测方法。方法采用反相高效液相色谱法,Symmetry C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长272 nm同时检测没食子酸、迷迭香酸和木犀草素含量。采用SPSS 17.0对测定结果进行分析,比较本地主产区紫苏叶中各成分的含量差异。结果没食子酸、迷迭香酸和木犀草素分别在33.80~101.2μg/mL,33.60~100.8μg/mL,34.00~102.0μg/mL呈线性关系,平均加样回收率分别为98.04%(RSD=1.50%,n=6),96.40%(RSD=0.53%,n=6)和96.49%(RSD=1.89%,n=6)。结论此方法简单方便,稳定可重复,可作为安徽地区主产地紫苏叶没食子酸、迷迭香酸和木犀草素成分含量的检测依据。

荜茇提取物中5个生物碱的含量测定与对垂体后叶素所致大鼠实验性心肌缺血的影响

目的建立荜茇提取物中5个生物碱含量测定方法,并评估该提取物对垂体后叶素所致大鼠实验性心肌缺血的影响。方法采用HPLC法同时测定5个生物碱的含量;采用经舌下静脉注射垂体后叶素造成急性心肌缺血模型,以造模前后T波变化绝对值、心率及其变化百分率为观测指标,评估荜茇提取物大、中、小三个剂量组对大鼠实验性心肌缺血的影响。结果3批荜茇提取物中胡椒碱平均含量为56.1%、49.7%、51.6%;N-异丁基-2E,4E-十八烷二烯酰胺平均含量为4.48%、4.21%、4.28%;几内亚胡椒碱平均含量为0.461%、0.378%、0.396%;荜茇明碱平均含量为1.73%、1.67%、1.70%;胡椒酰胺平均含量为0.554%、0.461%、0.493%。荜茇提取物大、中、小剂量组均有降低T波变化绝对值的作用;除大剂量组在个别时间点有降低心率的作用之外,其它各实验组在各时间点对心率变化率无显著影响。结论所建立的生物碱含量测定分析方法可准确测定荜茇提取物中5个生物碱的含量;药效试验证明荜茇提取物具有较好的抗心肌缺血活性。

HPLC测定杜仲叶黄酮提取物中总黄酮含量方法优化

通过比较杜仲叶黄酮提取物经酸水解成苷元来折算总黄酮含量和直接测定未酸水解样品中黄酮总含量,优选出一种HPLC测定杜仲叶黄酮提取物中总黄酮方法。结果表明,酸水解测定比未酸水解测定总黄酮高。未水解法测定提取物中原生黄酮含量,而酸水解法将全部的黄酮苷水解成苷元后,测定苷元含量来换算的总黄酮含量更高,更具有代表性。所需的对照品种类更少,测定时间更短,因此,其检测成本更低,更适用于杜仲叶黄酮提取物中总黄酮的测定。

不同产地天麻乙酸乙酯提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响

目的:比较云南、湖北、陕西天麻乙酸乙酯提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响。方法:主动脉环张力测定法记录天麻乙酸乙酯提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响。结果:三产地天麻乙酸乙酯提取物能抑制KC l引起的大鼠胸主动脉环收缩,使CaC l2量效曲线右移,最大收缩张力降低。结论:三产地天麻乙酸乙酯提取物对大鼠胸主动脉环均有舒张作用,以云南天麻作用最强。

HPLC法同时测定没食子提取物中没食子酸、没食子酸甲酯和没食子酸乙酯的含量

目的：建立高效液相色谱法测定没食子提取物中三种成分的含量方法。方法色谱柱：Waters Symmetry C18（4.6 mm ×250 mm，5μm）；流动相：甲醇-水（25：75）（冰乙酸调pH至4.5）；流速为1.0 mL·min-1，柱温：30℃，检测波长：273 nm。结果没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯的回收率分别为99.79%、99.60%、99.45%；线性范围分别为0.2~3.2 μg、0.002~0.16μg、0.0108~0.54μg。结论结果准确，重复性好，可用于该产品的质量控制。

板蓝根提取物中总有机酸和水杨酸含量测定方法研究

目的:建立板蓝根提取物的质量控制方法。方法:采用酸碱滴定法测定总有机酸含量,并用反相高效液相色谱法测定板蓝根提取物中水杨酸的含量。结果:酸碱滴定法测得总有机酸含量为13.0%,RSD2.0%;HPLC测得提取物中水杨酸的含量为0.22%,RSD1.6%。结论:该方法能有效控制板蓝根提取物的质量。

比色法测定酸枣仁提取物中总皂苷的含量

目的 建立比色法测定酸枣仁提取物中总皂苷的含量 ,为酸枣仁制剂的质量控制提供依据。 方法 用香草醛 冰醋酸 高氯酸试剂显色反应 ,在 5 92nm处有最大吸收。分别考察了高氯酸用量、加热温度、加热时间对显色的影响 ,选择最优显色工艺 ,对样品进行含量测定。 结果 酸枣仁皂苷A在 0 184～ 1 0 5 1mg/ml范围内呈良好的线性关系。精密度与回收率的RSD分别为 1 79%和 2 10 %。方法学考察各项指标均符合要求。 结论 本法简便、准确 ,稳定性。

葡萄籽提取物中原花青素含量的测定

基于原花青素与香草醛的显色反应 ,采用分光光度法对葡萄籽提取物中原花青素含量的测定进行了研究 ,对标准物的选择、催化剂添加量和反应时间进行了讨论 ,确定了香草醛 盐酸法的原花青素测定方法。该方法检测波长为 5 0 0nm ,反应时间为 15h ,反应温度为(2 0± 1)℃ ,以儿茶素为标样 ,线性范围为 10～ 15 0 μg/mL ,相对标准偏差为 0 78%～ 0 79% ,加标回收率为 97 4%～ 98 3 %

HPLC-ELSD法测定黄芪提取物中黄芪甲苷的含量

目的 :研究喷雾干燥法制备黄芪提取物中黄芪甲苷的HPLC ELSD测定方法。方法 :黄芪醇提液经浓缩后喷雾干燥 ,采用蒸发光散射检测器 (ELSD)以黄芪甲苷为对照品对黄芪提取物中的黄芪甲苷进行HPLC分析 ,色谱柱 :Elite ODS ,流动相∶乙腈 水 (36∶6 4) ,流速 :1.0ml/min ,ELSD参数 :漂移管温度为 10 5°C ,N2 流速为 2 .84ml/min。结果 :按选定的色谱条件测定 ,线性良好 ,平均加样回收率达 91.6 8% ,RSD为 1.6 4% ,实验还发现喷雾干燥过程中加入可溶性淀粉有助于粉末形成 ,但对含量测定有影响。结论 :本方法对黄芪甲苷的测定良好 ,应寻找更好的喷雾干燥助剂。

HPLC测定板蓝根提取物中靛蓝和靛玉红的含量

目的 采用HPLC测定板蓝根提取物中靛蓝和靛玉红含量。方法 将板蓝根醇提液挥去乙醇 ,经氯仿萃取 ,然后用HPLC测定。色谱柱为DikmaDiamonsilTMC18(5 μm ,2 0 0mm× 4 6mm) ,流动相为甲醇 - 0 1%醋酸铵 -醋酸 (70∶30∶1) ,流速为1 0ml·min-1,检测波长 2 80nm。结果 靛蓝线性范围在 0 0 15 2～ 0 30 4 0 μg(r =0 9997) ,平均加样回收率为 97 3% ,RSD =1 87% (n =5 ) ;靛玉红线性范围在 0 0 16 5 6～ 0 3312 μg ,平均加样回收率为 96 6 % ,RSD =2 .32 % (n =5 )。结论 所用方法简便快捷 ,适合板蓝根药材以及含靛蓝、靛玉红产品的质量控制。

近红外漫反射光谱法直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮的含量

目的:应用近红外漫反射光谱技术和化学计量学方法,直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮的含量。方法:收集不同含量分布的银杏叶提取物粉末样品,以HPLC法测定其总黄酮的含量,并采集其近红外漫反射光谱数据。应用主成分分析法(PCR)、偏最小二乘法(PLS)、改进偏最小二乘法(MPLS)等回归模型对HPLC测定的结果与近红外漫反射光谱数据进行回归,经内部交叉验证,建立校正模型,进而对预测集样品进行分析。结果:MPLS建立的校正模型的准确性最佳,其预测决定系数(RQS)为0.977。对预测集样品进行外部验证,预测值与真值的相关系数(r2)达0.973,样品回收率为96.15%～102.0%,RSD为1.1%。结论:建立了一个利用近红外漫反射光谱法直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮含量的新方法。该方法具有快速方便、结果准确的特点,可以应用于银杏提取过程的中间控制和大批量产品的检测。

蚯蚓提取物中蛋白质含量测定方法的研究

目的寻找能够精确反映蚯蚓提取物中蛋白质含量的测定方法。方法采用改良Lowry法和考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定蚯蚓提取物蛋白质含量;分别使用2法测定标准牛血清白蛋白(BSA)水溶液在碱性蛋白酶水解前后的蛋白质含量。结果改良Lowry法的测定结果明显高于Bradford法。BSA水溶液酶解前,2法测定的蛋白质含量相当;使用改良Lowry法,BSA水溶液酶解前后的蛋白测定值相近;而使用Bradford法测定BSA水溶液蛋白质含量时,酶解后的测定值较酶解前出现大幅下降。结论在测定多肽含量多的供试品中蛋白质含量时,改良Lowry法测定更为精确。蚯蚓提取物中存在大量的多肽成分,所以对其进行蛋白质含量测定时,改良Lowry法能够更加精确、真实地反映蚯蚓提取物的蛋白质含量。

反相高效液相色谱法测定烟叶提取物中茄尼醇的含量

目的：建立以反相高效液相色谱法测定烟叶提取物中茄尼醇含量及提取、纯化高纯度茄尼醇的方法。方法：色谱柱为C8，流动相为甲醇-乙腈（95：5），检测波长为210nm，流速为1．0ml／min，柱温为25℃；按提取、分离、纯化步骤得到提取物样品并测定其中茄尼醇含量。结果：茄尼醇检测浓度在1．14～114．0μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9998，n=6），平均加样回收率为99．2％（RSD=1．5％）；不同分离纯化方法所得茄尼醇含量不同（28．7％～99．2％）。结论：含量测定方法准确性、重现性均良好，且简便快速；所建立的分离纯化方法可得到高纯度茄尼醇。

槐花对照提取物的制备及槐花中4个黄酮类成分的含量测定

目的:制备槐花对照提取物,并以其为对照测定槐花中4个黄酮类成分含量。方法:用水提法制备槐花对照提取物;采用高效液相色谱法测定其中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的含量;色谱柱为Diamonsil C18(2),流动相为甲醇-1%冰乙酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为360 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以槐花对照提取物为对照测定槐花中4个成分的含量,并与以化学对照品为对照的测定结果进行比较。结果:在所制槐花对照提取物中,4个成分的含量占86.85%;芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的检测进样量线性范围分别为0.076 8~3.07、0.002 24~0.089 6、0.001 59~0.063 7、0.003 40~0.136μg(r均≥0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.30%(n=6),加样回收率分别为100.4%、96.99%、102.3%、100.9%(RSD分别为2.51%、1.58%、2.97%、3.20%,n=6)。两种方法中4个成分的含量测定结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以制备的槐花对照提取物为对照建立的测定方法操作简便、重现性好,并能同时测定槐花中4个成分的含量,可用于槐花饮片的质量控制。

菊花提取物中总黄酮与总有机酸的含量测定

目的建立菊花提取物总黄酮与总有机酸含量测定方法。方法采用UV法,以木犀草素为对照,在268 nm处测定菊花提取物总黄酮含量。采用硝酸铝显色反应,可见分光光度法在510 nm处测定菊花提取物总酚含量。总有机酸含量为总酚含量与总黄酮含量之差。将上述含量测定方法的结果与HPLC含量测定结果进行了比较。结果本研究方法测定菊花提取物总黄酮、总酚和总有机酸含量结果与HPLC法含量测定结果相近。采用UV法,木犀草素质量浓度在4.75～38.00 mg.L-1内,线性关系良好,相关系数为1.000 0,平均回收率为101.2%(RSD=2.3%);采用可见分光光度法,木犀草素质量浓度在1.90～30.40 mg.L-1内,线性关系良好,相关系数为0.999 9,平均回收率为99.4%(RSD=2.4%)。结论该方法简便、准确、重现性好,可用于菊花提取物质量控制。不同厂家商品菊花提取物总黄酮与总有机酸含量差异较大。