透射电镜制样中几种乙酸铀染色方案对结构图像清晰度的影响

[目的]比较几种乙酸铀染色方案对生物样品图像清晰度的影响。[方法]用低浓度的铀溶液对样品整体预染色,切片后再双染色,并与常规制样双染色方法比较,探讨预染色步骤对组织结构成像清晰度的影响。[结果]预染色步骤显著提高了样品图像的清晰度;高浓度(4%)短时间(3 min)铀染效果和中浓度(2%)长时间(2 h)铀染效果相当。[结论]高浓度铀染可有效缩短工作时间。

常规生物透射电镜无污染手工制样和染色的要点

生物常规透射电子显微镜超薄制片是必不可少的基础性技术[1]。制样过程中,预防和减少染色污染不容忽视。染色污染常见于制样的最后环节。文献报道的关注点是减少或避免铅污染或铀污染[2-4],问题尚未完全解决。近年随着染色仪的应用[5],切片全自动化染色的污染现象基本排除。但全自动染色仪消耗试剂多,导致成本高、危害大[6]。相同条件下全自动染色的反差偏低。采用阵列缝硅胶染色板行批量手工染色,染色速度更快,反差更好,节省试剂的同时也减少了危害。为进一步避免手工制样的染色污染,本实验以小鼠组织为例,针对污染的主要环节,依次实验排除,总结出避免染色污染的理想条件,现介绍如下。