提高Pichia stipitis乙醇耐受和抑制剂耐受能力的菌种驯化

为实现对汽爆预处理玉米秸秆未脱毒直接酶解和发酵产乙醇,对Pichia stipitis菌种进行提高乙醇耐受和抑制剂耐受能力的驯化。通过逐步提高底物葡萄糖浓度和发酵抑制剂浓度的方法,Pichia stipitis的乙醇和抑制剂耐受能力得到明显提高。结果表明:驯化菌株能在36h内将188.96g/L的葡萄糖代谢完全,乙醇浓度达到88.39g/L,乙醇产率为0.47g/g,达到理论值的92.2%;在含有不同浓度梯度的糠醛模拟水解液中,驯化菌株能耐受的最高糠醛浓度达到5.34g/L,乙醇产率0.45g/g,占理论值87.8%。利用该驯化菌株可进一步开展对未脱毒汽爆酶解液直接发酵研究工作。

蛋白酶体抑制剂在原发性免疫性血小板减少症中诱导免疫耐受的研究进展

原发性免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)的发病机制目前认为与血小板自身抗原免疫失耐受有关,其中T细胞的异常激活起着重要作用,主要表现在血小板自身抗原反应性细胞毒性T细胞的活化增殖、调节性T细胞数量功能异常、辅助性T细胞(Th细胞)亚群失衡等。因此诱导免疫耐受是ITP治疗的重要切入点,通过抑制蛋白酶体的活性抑制T淋巴细胞的增殖活化,为ITP提供潜在治疗靶点。本文综述了蛋白酶体抑制剂在ITP中诱导免疫耐受的研究进展。

PI3K抑制剂XC302连续给药治疗晚期实体肿瘤的I期临床耐受性试验

【目的】确定PI3K抑制剂XC302连续口服给药的剂量限制性毒性(DLT)和最大耐受剂量(MTD),评估其耐受性并初步观察XC302治疗晚期实体肿瘤患者的疗效。【方法】常规治疗失败的晚期实体肿瘤患者分别进入4个组别接受XC302每天1次或每天2次口服治疗,起始剂量为50 mg/d,按"3+3"模式进行剂量递增或根据前一阶段试验结果调整。根据NCI-CTCAE 3.0版毒性评定标准评估不良反应。按RECIST 1.0版标准进疗效评估。【结果】共入组30例晚期肿瘤患者。XC302连续给药常见的不良反应包括白细胞减少(23.3%)、血红蛋白下降(30%)、恶心(20%)、谷丙转氨酶(ALT)升高(63.3%)及谷草转氨酶升高(AST)(50%)、碱性磷酸酶升高(ALP)(23.3%)和谷氨酰转肽酶升高(GGT)(26.7%)。DLT为可逆的3度ALT和AST升高。MTD为100 mg每天一次(空腹)及75 mg qd(餐后)。23例患者进行了疗效评价,12例(52.5%)达到稳定(SD)。有1例软组织肉瘤患者无进展生存期(PFS)长达64周。【结论】PI3K抑制剂XC302连续口服给药总体耐受性良好且治疗晚期实体肿瘤有较高的疾病控制率,值得进一步研究。

调节性CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞、免疫抑制剂与移植免疫耐受

CD4+CD25+Treg是调节性T细胞的重要类型之一,在自身免疫耐受及移植免疫耐受的诱导和维持中起重要作用。然而,目前广泛应用于器官移植的免疫抑制剂对CD4+CD25+调节性T细胞的影响并不十分明确。在器官移植时能够通过免疫抑制剂诱导特异性的CD4+CD25+调节性T细胞,将提高受者免疫耐受的敏感性,有利于器官移植物的长期存活及移植免疫耐受的建立。相反,有些免疫抑制剂可能在避免移植排斥反应的同时,也阻断了有利于移植耐受建立的免疫反应。因此,免疫抑制剂对移植免疫耐受的潜在作用应当引起足够重视。有利于免疫耐受形成的免疫抑制药物的研发将是一个发展重要方向。

酵母耐受抑制剂的解耦与功能模块抽提研究进展

酿酒酵母（以下简称酵母）是人类最熟悉的安全、友好真核单细胞微生物，也是非常重要的工业微生物底盘，几千年来为人类所利用。传统意义上，酵母用于制造面包和馒头、酿造啤酒等饮料。随着生命科学与技术进步，20世纪80年代以来，

一氧化氮合酶抑制剂与吗啡的依赖和耐受

目的 :据国内外文献综述一氧化氮合酶抑制剂与吗啡依赖和耐受的关系 ,为一氧化氮合酶抑制剂在吗啡戒断的临床治疗中提供依据。方法 :介绍一氧化氮影响吗啡戒断的原理及几种常见一氧化氮合酶抑制剂在大小鼠吗啡戒断综合征中的作用。结果 :一氧化氮参与了阿片类药物依赖和耐受的产生和发展。结论 :一氧化氮合酶抑制剂可有效治疗吗啡脱毒综合征 。

肝移植术后免疫抑制剂完全撤除的研究进展

肝移植(liver transplantation,LT)术后免疫抑制剂(immunosuppressant,IS)管理是影响患者长期生存以及生活质量的重要因素[1]。IS的应用需要兼顾两个方面:一是排斥反应引起的移植物损伤,二是药物相关的不良反应。IS的药物不良反应包括:肿瘤复发、肝肾损伤、代谢综合征、神经系统毒性以及相关感染并发症等[2]。因此,LT术后IS管理非常复杂,免疫抑制方案需要个体化制定。移植术后最为理想的状态是在停用IS状态下出现免疫耐受,既避免了药物相关的不良反应.

他达拉非治疗5-羟色胺再摄取抑制剂相关性勃起功能障碍患者的疗效及耐受性

评估他达拉非治疗5．羟色胺再摄取抑制剂相关性性功能障碍的疗效和安全性。本研究为前瞻性、双盲、随机化、安慰剂对照临床研究，为期12周。研究共纳入50例患者，按1：1的比例分入20mg他达拉非20mg组或安慰剂组。疗效指标为国际勃起功能指数（IIEF）问卷总评分以及各域评分、性接触概况（SEP）问卷第2～6问及全球评估问卷（GAQs）第1、2问。

壁细胞对H_2受体拮抗剂和质子泵抑制剂耐受性研究

目的研究鼠胃黏膜壁细胞对H2受体拮抗剂和质子泵抑制剂的耐受性(脱敏)。方法用酶消化法分离壁细胞后,分为西咪替丁、法莫替丁、奥美拉唑和潘托拉唑4组,每组均包括三部分实验。其一是给予药物100mg/L干预细胞不同时间;其二是给予药物100mg/L干预细胞不同时间,然后洗涤细胞,再给予100mg/L作用1h;其三是给予不同浓度药物干预细胞2h后,洗涤细胞,再加入100mg/L作用2h。最后测定各组壁细胞H+K+ATP酶活力。结果H2受体拮抗剂和质子泵抑制剂均对H+K+ATP酶具有抑制作用;在不同干预时间下,西咪替丁1、2h组酶活性均显著高于对照组(4.96±0.247,4.63±0.054vs4.18±0.324),法莫替丁、2、4h组酶活性均显著高于对照组(3.71±0.017,5.11±0.053,4.01±0.029vs0.63±0.019);在不同干预浓度下,西咪替丁、法莫替丁0、100、1000mg/L组酶活性均显著高于对照组(分别为4.56±0.159,4.62±0.275,4.05±0.026vs3.69±0.145和3.42±0.391,4.32±0.315,4.48±0.120vs1.92±0.144);质子泵抑制剂各组无显著性差别。结论H2受体拮抗剂能够诱导壁细胞H2受体出现脱敏,质子泵抑制剂未出现耐受现象。

他达拉非治疗服用血清素再摄取抑制剂的ED患者的有效性和耐受性

评估他达拉非治疗因服用血清素再摄取抑制剂而导致的性功能障碍的安全性和有效性。设计一项为期12周的前瞻性双盲20mg他达拉非和安慰剂1：1随机对型试验。使用如下量表的评分改变来评价疗效：总IIEF和IIEF各子量表，性接触情况问卷问题2～6和整体评价量表GAQs1和2。

FOXO3a反馈上调人表皮生长因子受体3表达介导HER2^+乳腺癌细胞酪氨酸激酶抑制剂治疗耐受

近年来,酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKI)类药物治疗HER2+乳腺癌进展迅速,但出现治疗耐受仍是迫切需要解决的问题。本研究采用TKI(AEE788、Lapatinib)处理HER2+乳腺癌细胞BT474和SKBR3,发现HER3在mRNA和蛋白质水平上的表达均上调。MTS及克隆形成实验结果显示,siRNA干扰HER3的表达能够显著抑制BT474、SKBR3细胞的增殖,表明干扰HER3可增强细胞对TKI的敏感性。为进一步考察TKI促进HER3表达的可能机制,Western印迹及免疫荧光检测发现,AEE788、Lapatinib能够上调FOXO3a的表达且促进其入核。干扰FOXO3a可逆转TKI对HER3的诱导作用,说明TKI通过激活FOXO3a上调HER3的表达。综上所述,FOXO3a反馈上调HER3表达介导HER2+乳腺癌细胞TKI治疗耐受。这一研究发现,为临床解决TKI治疗耐受提供一定的理论基础。

酿酒酵母的耐受多种抑制剂的菌株

本发明公开了一种酿酒酵母的耐受多种抑制剂的菌株，其命名为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）YYJ003，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCN0．2757。本发明一种酿酒酵母的耐受多种抑制剂的菌株可以在含有稀酸预处理产生的抑制剂的培养基中正常生长并实现高效的乙醇生产。本发明的菌株突破了限制稀酸预处理法生产纤维素乙醇的一个瓶颈问题。

吗啡耐受影响大鼠脊髓水平降钙素基因相关肽抑制剂CGRP_(8-37)镇痛效应和降钙素基因相关肽的表达（英文）

目的:探讨吗啡耐受后大鼠脊髓水平降钙素基因相关肽抑制剂CGRP8-37镇痛效应的变化及对降钙素基因相关肽表达的影响。方法:在大鼠脊髓蛛网膜下腔内埋管,应用热板法和Randall Selitto Test测量大鼠对伤害性热刺激和机械刺激引起的后爪缩爪反应潜伏期(hindpaw withdrawl lantency,HWL)作为痛觉反应指标,应用免疫组织化学法观察吗啡耐受前、后及耐受恢复后大鼠脊髓背角和背根神经节中降钙素基因相关肽免疫活性物质的变化。结果:在脊髓蛛网膜下腔注射10 nmol的CGRP8-37后,大鼠对伤害性热刺激和机械刺激的缩爪反应潜伏期显著增加,表明在正常大鼠脊髓水平CGRP8-37具明确的镇痛作用。在吗啡耐受大鼠蛛网膜下腔注射10 nmol CGRP8-37后,大鼠对伤害性热刺激和机械刺激的缩爪反应潜伏期显著增加,表明吗啡耐受大鼠脊髓水平CGRP8-37具有明确的镇痛作用。在吗啡耐受恢复后,脊髓水平CGRP8-37具有镇痛作用。与正常大鼠相比,在吗啡耐受大鼠蛛网膜下腔注射同样剂量的CGRP8-37所产生的镇痛作用有显著性下降,而在耐受恢复后,其作用基本恢复到正常水平。应用免疫组化方法 ,证实在L3~L5段脊髓背角第Ⅰ、Ⅱ层中存在大量CGRP免疫活性纤维,在脊髓L3~L5段背根神经节中存在大量的小到中等大小的CGRP免疫阳性的神经元。在吗啡耐受后,L3~L5段脊髓背角和L3~L5段背根神经节中的CGRP免疫活性物质的含量明显升高。耐受恢复后,背根神经节中CGRP免疫活性物质的含量基本恢复到正常水平,脊髓背角浅层中CGRP免疫活性物质的含量虽然有所下降,但仍稍高于正常水平。结论:在吗啡耐受后,大鼠脊髓水平CGRP8-37的镇痛作用及CGRP的含量都发生了可塑性变化,提示CGRP在吗啡耐受中具有重要作用。

肝移植免疫耐受诱导及监测的研究现状

肝移植是治疗终末期肝脏疾病的有效手段。随着免疫抑制剂的发展,肝移植术后急性排斥反应显著减少,然而现有免疫抑制剂的长期使用容易造成广泛抑制,导致感染等一系列不良反应,影响了患者的术后生存率。移植术后免疫耐受的建立能够减少或停止免疫抑制剂的使用。因此,如何促进免疫耐受尽早建立,以及如何识别免疫耐受状态从而指导免疫抑制剂的停用越来越受到重视。笔者从肝移植免疫耐受的机制、诱导方案以及监测潜在的可耐受状态的生物学指标等方面进行综述。

小剂量雷帕霉素治疗活动性类风湿关节炎临床疗效及重建调节性T细胞介导的免疫耐受的研究

目的研究小剂量雷帕霉素治疗活动性类风湿关节炎(RA)患者的临床疗效及安全性,观察其对调节性T细胞(Treg细胞)介导的免疫耐受的重建。方法选取活动性RA患者62例按2∶1随机分为雷帕霉素组42例和对照组20例,2组均给予改善病情抗风湿药(DMARDs)及/或小剂量激素,雷帕霉素组加用雷帕霉素0.5mg1次/隔日,2组患者分别于0、3、6、12周进行临床和常规实验室指标评估,并在0、12周采用流式细胞术检测患者外周血以CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞、辅助性T细胞(CD4^+IL-17^+Th)17为主的CD4^+T亚群细胞绝对计数及百分比,比较2组之间及治疗前后患者的临床及实验室指标,并记录不良反应。结果共55例患者完成研究,分为雷帕霉素组37例和对照组18例,经12周治疗后2组28个关节疾病活动脂数(DAS28)评分、肿胀关节数(SJC)、关节压痛数(TJC)、红细胞沉降率(ESR)均下降,差异有统计学意义(P<0.05);2组中仅雷帕霉素组的免疫抑制用量明显少于传统治疗组,且2组均无不可逆的不良反应出现;雷帕霉素组Treg细胞、Th17绝对计数显著高于对照组[12周2组Treg分别为(29±23)个/μl和(16±16)个/μl,P=0.042;Th17分别为(7.3±5.5)个/μl和(3.5±2.4)个/μl,P=0.011];雷帕霉素组Treg细胞、Th17细胞绝对计数治疗前后无明显差异,而对照组2种细胞绝对计数显著下降[Treg:0周(35±20)个/μl,12周(16±16)个/μl,P=0.016;Th17:0周(8.9±4.2)个/μl,12周(3.5±2.4)个/μl,P=0.028]。结论DMARDs药物可能通过减少RA患者Treg细胞、Th17细胞数缓解病情,而加用小剂量雷帕霉素可以明显提高RA患者外周血中Treg细胞水平,提示雷帕霉素可能通过重建Treg细胞介导的免疫耐受缓解病情,为活动性RA的治疗提供新思路。

环磷酰胺抑制作用下小鼠对人红细胞抗原的选择性耐受

目的 以环磷酰胺 (CY)作为免疫抑制剂 ,诱导小鼠产生对人红细胞血型抗原的选择性免疫耐受。 方法 1 0 2只 Balb/c小鼠分成 1 7组 ,在 2× 1 0 7人红细胞免疫注射后 ,分别以不同 CY剂量和给药时间给予抑制。并通过直接和间接血凝反应测定小鼠免疫应答所产生的抗人红细胞抗原的 Ig M和 Ig G型抗体效价。 结果 在 5 0～ 1 5 0 mg/kg CY剂量范围内 ,免疫注射当天至免疫后第 4天 (d0～d4)均可对小鼠的免疫应答产生抑制。而诱导小鼠产生对人红细胞抗原完全耐受的最佳 CY抑制时间和剂量分别为免疫注射后的第 1天和 1 0 0 mg/kg。 结论 CY能有效抑制小鼠对人红细胞免疫所产生的应答 ,选择适当的给药时间和 CY剂量对耐受的建立十分重要。本项研究对诱导小鼠免疫系统产生对人红细胞血型弱抗原的应答具有探索意义。

哮喘中抑制型FcγRIIB调控树突状细胞诱导免疫耐受的研究进展

支气管哮喘（简称哮喘）的患病率呈上升趋势，估计患者已达3亿人，是严重威胁人类健康和生活质量的疾病。目前哮喘的治疗主要是基于用支气管舒张剂和吸入激素治疗，这种治疗对控制症状在一定程度上行之有效，但哮喘对气道的长期危害仍然未得到很好解决，尤其是在老年人群哮喘患者的控制，与期望还存在较大差距。主要原因是缺乏更好的理解这种疾病的免疫调节过程。本文拟对抑制型FcγRIIB调控树突状细胞诱导免疫耐受的研究进展作一综述。

儿童肝移植术后免疫抑制剂撤除策略与免疫耐受研究进展

肝移植是目前治疗儿童终末期肝病最有效的方法,受者术后需长期服用免疫抑制剂保证移植物功能,但免疫抑制剂的副作用可能会影响术后儿童远期生存。近年来,国内外诸多移植中心开始尝试对移植术后受者的免疫抑制剂进行减量或撤除,部分受者成功停药实现免疫耐受,但目前尚无确切有效的临床方案和免疫监测指标,针对免疫抑制剂撤除的安全性和远期预后的研究十分有限。本文将对儿童肝移植术后免疫抑制剂撤除的临床方案及免疫耐受研究进展进行简要综述,以期为儿童肝移植术后免疫抑制剂撤除和诱导免疫耐受提供一定帮助。

紫外诱变驯化提高酿酒酵母木糖发酵的抑制物耐受性

利用驯化和紫外处理结合驯化的手段对一株木糖发酵工业菌株的抑制物耐受性进行提升。在反复批次培养过程中不断提高含9种抑制物的混合抑制物浓度,使细胞的生长和发酵逐渐适应高浓度抑制物环境,分离突变菌株并进行评价。紫外处理结合驯化比直接驯化能更有效的提升细胞对高浓度抑制物的耐受能力;通过突变菌株分离和筛选,获得3株抑制物耐受能力高于出发菌株的突变菌株,它们在抑制物浓度100%MI(甲酸1 g/L,乙酸3.5 g/L,乙酰丙酸1.5 g/L,糠醛1.5 g/L,5-羟甲基糠醛1.5g/L,丁香醛0.1 g/L,香草醛0.1 g/L,松柏醛0.025 g/L,肉桂酸0.025 g/L)条件下的木糖消耗率比出发菌株高出11.3%-23.2%。紫外诱变处理结合驯化过程可以有效提高酿酒酵母对混合抑制物的耐受性。