绞股蓝50%乙醇部位调血脂及抗氧化作用研究

目的研究绞股蓝50%乙醇部位对高脂血症小鼠的调血脂及抗氧化作用。方法采用高脂饲料喂养昆明雄性小鼠,建立高血脂模型,给药30 d,测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力,计算脏器指数、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、动脉硬化指数(AI)和血清HDL-C/TC比值,并观察肝脏病理切片。结果绞股蓝50%乙醇部位能显著降低高脂血症小鼠TC,TG,LDL-C,MDA的含量和AI值,提高血清SOD,HDL-C/TC比值,HDL-C水平(P<0.05或P<0.01)。除肝指数外(P<0.05),绞股蓝50%乙醇部位对肾指数和脾指数均无显著性影响(P>0.05),但能显著降低高脂血症小鼠的体重(P<0.05)。结论绞股蓝50%乙醇部位能显著降低高脂血症小鼠的TC和MDA,有显著的调血脂及抗氧化作用。

川楝子乙醇部位HPLC指纹图谱研究

目的建立川楝子乙醇提取部位的HPLC指纹图谱。方法色谱柱Agilent zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇/乙腈(1∶10)(A)-0.4%磷酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长360 nm;柱温25℃;流速1.0 mL.min 1。结果建立了川楝子药材乙醇提取部位的HPLC色谱指纹图谱。在指纹图谱中共有峰20个,并指认了3个色谱峰。结论该方法准确可靠,重复性好,可为川楝子药材及其饮片的质量控制提供参考依据。

生栀子、焦栀子50%和95%乙醇洗脱部位药效学比较研究

目的:对炮制前后变化明显的组分50%和95%乙醇洗脱部位(简称部位)进行药效学比较研究,为阐明栀子的炮制原理和栀子饮片的合理应用提供科学依据。方法:采用抗炎、镇静、凝血及化学性肝损伤等指标,观察生栀子、焦栀子50%和95%部位作用的差别。结果:生栀子、焦栀子50%和95%部位对小鼠炎症反应有较好的抑制作用,对小鼠镇静作用不明显,对四氯化碳造成的肝损伤没有保护作用,焦栀子95%部位有明显的促进血液凝固的作用。结论:生栀子、焦栀子两个洗脱部位抗炎作用较好,对镇静和肝损伤作用不明显。焦栀子95%部位凝血作用明显,有较好的止血功效。

基于代谢组学方法研究淫羊藿95%乙醇洗脱部位对大鼠尿液潜在生物标志物的干预作用

目的运用代谢组学方法分析淫羊藿95%乙醇洗脱部位(E95EE)对正常大鼠尿液中内源性物质代谢的影响,通过寻找相关代谢途径及潜在作用靶点,探究其标志物表达的差异是否会随体液循环分布影响机体的不同系统,从而产生潜在的保护或毒性作用。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和E95EE给药组,各10只,E95EE组ig给予E95EE 17.1 g·L-1,1/d,连续20 d。正常对照组以等量生理盐水代替,于末次给药后用代谢笼收集大鼠12 h尿液,处理后进行UPLC-TOF/MS分析。结果鉴定出9个差异性的内源性代谢产物,即3-sn-磷脂酸、l-1磷脂酰乙醇胺、草酰乙酸、甲酰-N-乙酰-5-甲氧基犬尿素烯胺、N-乙酰-5-羟色胺、5,10-甲酰四氢叶酸、N-亚氨代甲基l-l-谷氨酸盐、1-酰基甘油酮3-磷酸盐和亚硫酸;6条主要代谢通路,即柠檬酸的乙酰辅酶A生物合成、组氨酸代谢、甘油三酯代谢、色氨酸代谢、维生素A代谢、糖酵解与糖异生;推测E95EE可能通过降低3-sn-磷脂酸和草酰乙酸水平,上调N-亚氨代甲基l-l-谷氨酸盐的表达,从而对神经、心血管系统发挥保护作用;可能通过降低5,10-甲酰四氢叶酸和l-1磷脂酰乙醇胺水平,增加肿瘤发生的风险。结论 E95EE对正常大鼠神经系统、心脑血管系统、免疫系统及肿瘤相关疾病存在药效与毒性并存的干预作用,其作用机制与甘油三酯代谢、维生素A代谢和色氨酸和组氨酸代谢等通路有关。

广西莪术70%乙醇洗脱部位对血栓模型大鼠抗血栓作用及机制研究

目的:探讨广西莪术70%乙醇洗脱部位对血栓模型大鼠的抗血栓作用及其机制。方法:采用电刺激大鼠颈总动脉致实验性血栓模型、动-静脉旁路大鼠血栓模型观察广西莪术70%乙醇洗脱部位抗血栓作用;采用大鼠FeCl_3诱导形成体内血栓模型,观察对大鼠抗血栓作用和对血清NO、ET-1、6-keto-PGF_(1α)、TXB_2含量的影响;用急性血瘀大鼠模型,观察其对大鼠血液流变学影响;通过血小板聚集实验观察对大鼠血小板聚集影响。结果:广西莪术70%乙醇洗脱部位能显著延长电刺激大鼠颈总动脉致实验性血栓形成的时间,减轻动-静脉旁路大鼠形成血栓湿质量;显著减轻大鼠FeCl_3诱导形成体内血栓模型血栓湿质量,提高其血清NO、6-keto-PGF_(1α)含量,降低其血清ET-1、TXB_2含量,升高NO/ET-1、6-keto-PGF_(1α)/TXB_2比值;降低急性血瘀模型大鼠全血粘度和血浆粘度;对大鼠血小板聚集产生显著抑制。结论:广西莪术70%乙醇洗脱部位有显著的抗血栓作用,其作用机制与调节NO、ET-1、6-keto-PGF_(1α)、TXB_2水平及NO/ET-1、6-keto-PGF_(1α)/TXB_2比值,降低全血粘度和血浆粘度,抑制血小板聚集有关。

壮骨止痛方无水乙醇提取A部位对去势雌鼠骨质疏松模型的疗效分析

目的:通过建立去卵巢雌鼠骨质疏松模型,研究壮骨止痛方无水乙醇提取A部位对骨质疏松症的疗效。方法:选取250 g左右的SD雌性大鼠60只,按体质量随机分为正常组、假手术组、模型组、壮骨止痛方组与壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组。各组均于5 d拆线后给药,连续13周。从骨密度、骨生物力学、血清雌激素(E2)、甲状旁腺激素(PTH)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)水平及光镜下骨小梁形态方面对其疗效进行评价。结果:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组大鼠的股骨密度与腰椎骨密度显著高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组大鼠的胫骨最大应力与胫骨最大抗弯强度较模型组显著增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组大鼠相比,壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组的血清E2有显著增高的趋势,而PTH,CT,BGP显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位可有效改善骨韧性,提高骨骼抵抗外力冲击的能力,对于骨质疏松症具有较好疗效。

花生红衣乙醇提取物乙酸乙酯组分抑菌活性的研究

花生红衣乙醇提取物乙酸乙酯部位加入AB-8大孔树脂层析柱中,用20%、40%、60%、80%、100%乙醇水溶液依次洗脱,得到花生红衣乙醇提取物乙酸乙酯组分,采用滤纸片法研究其抑菌活性,确定最小抑菌浓度。结果表明:花生红衣乙醇提取物乙酸乙酯组分对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、青霉、毛霉和黑曲霉的生长具有一定的抑制作用,最低抑菌浓度均为0.5 g/L,且抑菌圈大小随浓度的增加而变大。花生红衣乙醇提取物乙酸乙酯组分均具有广谱抑菌活性。

党参活性组分治疗Ⅱ型糖尿病小鼠作用效果研究

Ⅱ型糖尿病(T2DM)占糖尿病发病率的90%以上,已成为影响全球生命健康的主要慢性疾病之一。开发高效、安全的糖尿病治疗药物一直是该领域的研究热点。本研究利用T2DM小鼠模型对党参大孔树脂60%乙醇分离组份(60%-DS)进行了体内降血糖作用效果研究。采用链脲佐菌素(STZ)结合高脂饲料诱导的T2DM小鼠模型,评价60%-DS对小鼠葡萄糖耐量、胰岛素耐量、血脂四项等生理生化指标的影响。结果证实60%-DS能够降低STZ小鼠的血糖,改善葡萄糖耐量,并在一定程度上改善胰岛素抵抗,提高机体胰岛素的敏感性。

白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖及多肽的含量测定

目的对白果仁止咳有效部位35%乙醇-水洗脱部位中多糖及多肽的含量进行测定,为白果仁的综合开发和质量控制提供科学依据。方法采用苯酚-硫酸法、双缩脲法,建立标准曲线,并进行精密度、稳定性、重复性、加样回收率的考察。结果白果仁35%乙醇-水洗脱部位中多糖和多肽均在浓度范围内有良好的线性关系,方法学验证RSD值均小于2%,加样回收率分别为97.96%、97.94%,多糖含量为13.99%,多肽含量为31.41%。结论本研究建立的白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖和多肽含量测定方法简单可行,稳定性和重现性好。

活血化瘀类方乙醇洗脱部位对兔血小板聚集的影响

目的:考察活血化瘀类方乙醇洗脱部位对血小板聚集的影响。方法:采用新西兰白兔血浆进行活血化瘀类方乙醇洗脱部位对血小板聚集影响的检测,同时对此类方中的不同成分进行血小板抑制率检测。结果:活血化瘀类方的乙醇洗脱部位中,对血小板聚集有抑制作用的部位集中在10%-50%乙醇洗脱部位。60%-95%乙醇洗脱部位对血小板聚集均没有显著影响。每张方都有抑制血小板聚集的成分存在。结论:活血化瘀类方各组分在不同乙醇洗脱部位含量各有不同,导致各组分在不同乙醇洗脱部位的比例不同,表现出的药理效应也不同。

壮骨止痛方无水乙醇提取A部位对去势雌鼠骨质疏松的疗效及机制研究

目的:观察壮骨止痛方无水乙醇提取A部位对去势雌鼠骨质松模型的疗效,并探讨其可能的作用机制。方法:选取250 g左右SD雌性大鼠75只,按体重随机分为模型组、假手术组、正常组、壮骨止痛方无水乙醇提取A部位组(0.12 g.kg-1.d-1)、壮骨止痛方组(13.2 g.kg-1.d-1),每组15只。去卵巢术后5 d开始给药,连续13周。取血和骨标本从骨密度、骨生物力学、病理形态学等几个方面研究其药效,从血清雌激素(E2)、骨钙素(BGP)、甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)方面研究其作用机制。结果:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位能明显增加去卵巢模型鼠股骨、腰椎骨的骨密度(P<0.05);显著提高股骨头平均骨小梁密度(P<0.01);显著增强模型大鼠胫骨的最大应力和最大抗弯强度(P<0.01);与去势模型组比较壮骨止痛方无水乙醇提取A部位明显增加子宫系数(P<0.05),能显著降低去势模型鼠血清CT(P<0.01)。结论:壮骨止痛方无水乙醇提取A部位能增加模型鼠骨密度及骨最大应力和最大抗弯强度,逆转骨质疏松症的病理形态学改变。其作用机制之一可能是发挥药物自身的雌激素样作用,改善激素代谢紊乱,直接或间接调节了机体的骨代谢和细胞因子,降低了骨转换,促进骨形成,抑制骨吸收。

拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶的影响

目的拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶的影响。方法健康SD雄性大鼠随机分为6组,拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位低、中、高3个剂量组(实验组,分别相当于药材1,2,4 g·kg-1)、地塞米松阳性对照组、苯巴比妥阳性对照组、空白对照组,每组3只。实验组大鼠分别灌胃给予拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位低、中、高3个剂量,每天一次,连续10 d;地塞米松阳性对照组大鼠腹腔给予地塞米松100 mg·kg-1,每天一次,连续4 d;苯巴比妥阳性对照组大鼠腹腔给予苯巴比妥80 mg·kg-1,每天一次,连续3 d;空白对照组大鼠给予等量0.9%氯化钠,均灌胃给药,每天一次,连续10 d。取肝组织,用液质联用、荧光高效液相色谱、反转录-聚合酶链反应、免疫印迹杂交方法分别检测细胞色素P450酶活性,基因表达和蛋白表达的变化。结果拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位低、中、高剂量均能显著性提高CYP1A2 mRNA水平、蛋白表达水平以及酶活性,且呈剂量依赖性。结论拟黑多刺蚁乙醇提取物石油醚部位对大鼠CYP1A2有诱导作用,提示其可能与CYP1A2底物、诱导剂或抑制剂发生药物相互作用。

石见穿乙醇提取物氯仿部位抗HIV-1活性的体外实验研究

目的筛选出中药石见穿乙醇提取物中具有抗HIV-1活性的有效部位。方法选用CEMx174细胞感染BK132HIV-1病毒为体外实验模型,利用系统溶剂分离法,根据极性大小依次用石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇从石见穿75%醇提物浸膏中萃取4个部位,通过体外药效学实验,采用病毒引起合胞体数量和RT-PCR法,以细胞病变效应(CPE)、细胞内HIVRNA表达水平和上清中病毒载量为评价指标,观察各部位的抗HIV-1活性及有效部位的药效作用。结果显微镜下观察,仅石见穿氯仿部位组观察不到合胞体的形成,与阳性组基本一致;该部位在浓度20μg·ml-1时,细胞内HIVRNA相对量明显低于病毒组(P <0. 05),与AZT阳性组比较无明显差异(P> 0. 05),上清中病毒载量也明显低于病毒组(P <0. 05),其余4个浓度(10,5,2. 5,1. 25μg·ml-1)有一定的量效关系。结论中药石见穿醇提物仅氯仿部位对HIV-1的复制有明显抑制作用,抑制效果与阳性药物AZT无明显差异,有效浓度为20μg·ml-1,具有一定的开发和研究前景。

莪术50%乙醇大孔树脂洗脱部位抗血栓作用及其机制研究

目的:研究广西莪术大孔树脂50%乙醇洗脱部位的抗血栓作用,并探讨其作用机制。方法:采用角叉菜胶致小鼠尾部血栓模型,电刺激致大鼠实验性颈总动脉血栓模型,大鼠动-静脉旁路血栓模型,观察广西莪术50%乙醇大孔树脂洗脱部位抗血栓作用;用FeCl_3诱导大鼠体内血栓模型,观察其抗血栓作用及对大鼠NO、ET-1、6-keto-PGF1α、TXB_2等含量的影响;用大鼠血小板聚集实验观察其对血小板聚集的影响。结果:广西莪术50%乙醇洗脱部位(6.0、3.0、1.5 g生药/kg)能明显减少角叉菜胶所致小鼠尾部血栓黑尾动物数,减小黑尾长度;广西莪术50%乙醇大孔树脂洗脱部位(3.0、1.5、0.75 g生药/kg)明显延长电刺激致大鼠实验性颈总动脉血栓形成时间,明显减轻大鼠动-静脉旁路血栓湿重;明显减轻FeCl_3诱导体内血栓模型大鼠血栓湿重,增加大鼠NO、6-keto-PGF1α含量,降低ET-1、TXB_2含量,提高NO/ET-1、6-keto-PGF1α/TXB_2比值;能明显抑制血小板聚集。结论:广西莪术50%乙醇大孔树脂洗脱部位具有明显的抗血栓作用,其机制与调节NO、ET-1、6-keto-PGF1α、TXB_2水平和NO/ET-1、6-keto-PGF1α/TXB_2比值,抑制血小板聚集有关。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的龙眼叶降血糖有效部位化学成分分析

目的:为明确龙眼叶的降血糖物质基础,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QOrbitrap HRMS)对龙眼叶有效部位的化学成分进行快速分析和鉴定。方法:采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),流动相0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液(含10 mmol乙酸铵)梯度洗脱,通过正、负离子模式进行扫描,扫描范围m/z 100~1500。结果:利用目标化合物的二级碎片离子信息与数据库及相关文献报道的化合物质谱信息进行比对,从乙醇部位中共鉴定出了9个化合物(木犀草苷、山柰酚、槲皮苷、木犀草素、莽草酸、柠檬酸、腺苷、烟酰胺和L-酪氨酸),乙酸乙酯部位中共鉴定出了11个化合物(木犀草苷、槲皮苷、山柰酚、木犀草素、莽草酸、没食子酸、原儿茶酸、腺苷、烟酰胺、东莨菪内酯和L-苯丙氨酸),正丁醇部位共鉴定出了10个化合物(木犀草苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、山柰酚、紫云英苷、木犀草素、柠檬酸、没食子酸、腺苷、烟酰胺和5-羟甲基糠醛),其中这3个活性部位的共有成分有5个(木犀草苷、山柰酚、木犀草素、腺苷和烟酰胺)。结论:建立的UPLC-Q-Orbitrap HRMS可快速鉴定龙眼叶中3个降血糖有效部位的化学成分。龙眼叶降血糖部位的主要化学成分为黄酮及其苷类、有机酸类和含氮类化合物。

天山雪莲提取物纯化前后各部位抗炎镇痛作用

目的:观察天山雪莲提取物大孔树脂纯化前后各个部位抗炎镇痛作用。方法:用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响观察抗炎作用;采用醋酸扭体法和热板致痛法观察镇痛作用。结果:30%～50%乙醇洗脱部位可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度和冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高;对抗醋酸所致小鼠的扭体次数增加,提高热板所致小鼠的痛阈值。结论:30%～50%乙醇洗脱部位具有明显的抗炎、镇痛作用。

桂枝化学成分的分离鉴定

目的:明确桂枝的活性组分,对75%乙醇提浸膏进行系统化学成分分离与纯化,以期找到抑制necroptosis的目标小分子化合物。方法:取干燥桂枝20 kg,粉碎后用75%乙醇冷浸提取,提取4次,7 d 1次,减压回收溶剂得到总浸膏。将所得总浸膏,运用D101大孔吸附树脂柱色谱进行分离,依次用水,30%乙醇,50%乙醇,70%乙醇,90%乙醇洗脱,减压回收溶剂得水部分,30%乙醇部分,50%乙醇部分,70%乙醇部分,90%乙醇部分。对30%乙醇部分,50%乙醇部分联合采用常压硅胶柱色谱,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱,高压制备色谱,重结晶等方法进行分离纯化,并根据单体化合物理化性质与波谱学数据(1H-NMR,13C-NMR,MS)等进行结构鉴定。结果和结论:从桂枝中分离得到13个化合物,分别鉴定为(+)-丁香脂素(1),(+)-南烛木树脂酚(2),山橘脂酸(3),裂异落叶松脂醇(4),ovafolinin B(5),原儿茶醛(6),原儿茶酸(7),丁香醛(8),香草酸(9),原儿茶酸乙酯(10),丁香酸(11),没食子酸乙酯(12),2-(3’,4’-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛(13)。其中1~5,10~13为首次从该植物中分离得到。

夜香树花提取物对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的观察夜香树花提取物对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法采用MTT法,研究夜香树花总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位对Con A和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖的影响。结果夜香树花总提取物和正丁醇部位在浓度为20μg/ml时对Con A诱导状态下的脾T淋巴细胞增殖的促进效果最好,而95%乙醇部位在浓度为20μg/ml^40μg/ml之间增殖的促进效果最好;三者对LPS诱导状态下的脾B淋巴细胞增殖有较好的促进作用,且在浓度为10μg/ml^40μg/ml之间增殖的促进效果最好。结论夜香树花总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位对诱导状态下的脾淋巴细胞的增殖都具有一定的促进作用,可提高荷瘤小鼠细胞免疫功能,但其增殖效果在一定程度上与浓度有关。

基于“成分-靶点-通路”的枸杞子调控年龄相关性黄斑变性作用机制研究

目的采用网络药理学方法探讨枸杞子改善年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的活性成分及作用机制。方法以检索TCMSP数据库和查阅文献获得的枸杞子潜在活性成分为研究对象,通过Swiss Target Prediction平台、GeneCards数据库、OMIM数据库、DDT数据库和Drugbank数据库预测活性成分的潜在靶点;应用Metascape平台对潜在靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析;运用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络和"药物-成分-靶点-通路-疾病"网络;考察枸杞子不同提取部位对碘酸钠诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19活力的影响,以及对脂多糖诱导的小鼠小胶质细胞系BV2中炎症因子表达的影响。结果枸杞子中的88个活性成分通过调控血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)等靶点,参与氧化应激、炎症反应等生物学过程,影响晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGE)-晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)、IL-17、TNF等信号通路发挥改善AMD的作用。枸杞子95%乙醇提取部位能够显著提高碘酸钠诱导的ARPE-19细胞活力(P<0.001),并显著降低脂多糖诱导的BV2细胞中IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达水平(P<0.05、0.01、0.001)。结论枸杞子中多种成分具有影响AMD相关靶点的潜在作用,枸杞子能够通过改善氧化损伤、抑制炎症反应治疗AMD,为后续深入研究枸杞子中不同活性成分调节AMD的作用机制提供依据。