嗜热微生物中获取耐乙醛变性醛缩酶

在催化他汀药物中间体合成中,对高浓度乙醛底物的耐受是醛缩酶的重要应用性质.通过克隆并在大肠杆菌中过表达了来源于嗜热微生物Geobacillusthermodenitrificans的耐热醛缩酶(DERAGth),该蛋白质序列长度为223aa,对应的分子量为25.0kD.初步酶学性质表征结果表明,该酶对天然底物2-脱氧核酸-5-磷酸的活力19.3U/mg,最适pH为7.5,最适温度为60℃.在40—100℃保温10min的结果表明,DERAGth具有较好的热稳定性,在60℃下10min活力仍保持100%.对乙醛耐受的实验表明,该酶在300mmol乙醛中25℃保温2h,剩余活力高于40%.连续醛缩活力对比实验结果表明,该酶的连续醛缩活力远大于来源于常温微生物的大肠杆菌醛缩酶.