乳酸脱氢酶同工酶-5和β2-微球蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤诊断及疗效评估中的应用

目的:分析乳酸脱氢酶同工酶-5(LDH-5)和β2-微球蛋白(β2-MG)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的诊断及疗效评估中的应用价值。方法:选取2020年6月至2023年1月福建医科大学肿瘤临床医学院收治的87例DLBCL患者作为研究组,以同期在同一医院门诊体检的120名健康人作为对照组,分析对照组与研究组以及研究组不同临床病理特征患者间LDH-5和β2-MG表达情况,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析LDH-5和β2-MG水平对DLBCL的诊断价值;使用Spearman相关分析方法分析LDH-5和β2-MG与DLBCL患者治疗有效率的相关性。结果:研究组LDH-5和β2-MG水平明显高于对照组(P<0.05)。87例患者中治疗有效72例,无效15例。LDH-5和β2-MG水平联合检测诊断DLBCL的敏感性、特异性、准确性及ROC曲线下面积(AUC;95%CI)值分别为0.944、0.922、0.931及0.876(0.641-0.910),均显著高于单一指标的诊断价值(P<0.05)。Ann Arbor分期为Ⅲ~Ⅳ期、有骨髓浸润、治疗反应为无效、国际预后指数(IPI)评分为高危者LDH-5和β2-MG水平均分别明显高于Ann Arbor分期为Ⅰ~Ⅱ期、无骨髓浸润、治疗反应为有效、ⅠPⅠ评分为低危者(P<0.05)。Pearson分析结果显示,LDH-5和β2-MG水平均与DLBCL患者治疗有效率呈负相关(P<0.05)。结论:LDH-5和β2-MG在DLBCL患者中呈高表达水平状态,联合检测上述两个指标可提升单一指标对DLBCL患者的诊断价值,为患者预后和疗效评估提供临床参考。

多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-微球蛋白、肿瘤坏死因子-α、乳酸脱氢酶检测及临床意义

目的:检测多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,分析其临床意义。方法:选取多发性骨髓瘤患者101例为研究组,选取同期性别比例、年龄相似的非多发性骨髓瘤患者50例为对照组。比较两组血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平。比较不同Durie-Salmon分期及治疗前后多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平。比较治疗后不同疗效多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平并进行相关性分析。结果:研究组血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平明显高于对照组(均P<0.05)。Durie-Salmon分期Ⅲ期多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平高于Ⅰ期和Ⅱ期,Ⅱ期患者这些指标又高于Ⅰ期(均P<0.05)。治疗后,多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平较治疗前明显下降(均P<0.05)。不同疗效患者血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平比较差异有统计学意义(均P<0.05)。多发性骨髓瘤患者血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH水平与疗效正相关(r=0.862、0.396、0.885,均P<0.05)。结论:血清β_(2)-MG、TNF-α、LDH参与多发性骨髓瘤疾病发生与发展过程,对三者进行检测有助于评估疾病进展及疗效。

乙醛脱氢酶2、细胞色素P4502E1-RsaI基因多态性和饮酒与口腔鳞状细胞癌发病风险的关系

目的探讨乙醛脱氢酶2(ALDH2)、细胞色素P4502E1-RsaI(CYP2E1-RsaI)基因多态性和饮酒与口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病之间的关系。方法采用病例-对照研究方法,以320例OSCC患者及320名健康体检者的外周血白细胞为样本,应用聚合酶链反应(PCR)技术分析ALDH2和CYP2E1-RsaI基因多态性。结果 ALDH2变异基因型和CYP2E1-RsaI突变纯合型(c2/c2)频率分布在OSCC组分别为70.94%和39.06%,在对照组分别为43.44%和20.62%,差异均有统计学意义(P均<0.01)。ALDH2变异基因型(OR=3.178,95%CI=1.917～4.749)和CYP2E1-RsaI(c2/c2)者(OR=2.467,95%CI=1.783～4.045)患OSCC的风险均显著增加。基因突变协同分析发现,ALDH2变异基因型/CYP2E1-RsaI(c2/c2)在OSCC和对照组的分布频率分别为32.19%和6.25%,差异有统计学意义(P<0.01)。ALDH2变异基因型/CYP2E1-RsaI(c2/c2)患OSCC的风险显著增加(OR=9.792,95%CI=3.583～12.472)。OSCC组的饮酒率显著高于对照组(OR=2.861,95%CI=1.541～4.781,P<0.01),ALDH2变异基因型及CYP2E1-RsaI(c2/c2)与饮酒有协同作用(OR=41.152,95%CI=19.903～67.551)。结论 ALDH2和CYP2E1-RsaI基因多态性和饮酒均是OSCC的易患因素,基因和饮酒的协同作用可明显提高OSCC的发病风险。

血清乳酸脱氢酶、β_(2)-微球蛋白及铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者预后的关系

目的探讨血清乳酸脱氢酶(LDH)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)及铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者预后的关系。方法选取60例侵袭性B细胞淋巴瘤患者,均接受利妥昔单抗+环磷酰胺+表柔比星+长春新碱+泼尼松(R-CHOP)方案化疗,治疗4个疗程后评估临床疗效,检测治疗前后患者血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平。随访3年,比较不同预后侵袭性B细胞淋巴瘤患者治疗4个疗程后血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平,其与患者预后的相关性采用Spearman秩相关分析。结果60例侵袭性B细胞淋巴瘤患者化疗4个疗程后,完全缓解38例,部分缓解7例,疾病稳定4例,疾病进展11例,疾病控制率为81.67%(49/60)。治疗4个疗程后,侵袭性B细胞淋巴瘤患者血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平均明显低于治疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。随访3年,所有患者均无失访,生存43例,死亡17例。生存患者治疗4个疗程后血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平均明显低于死亡患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Spearman秩相关分析结果显示,血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者的预后生存均呈负相关(r=-0.718、-0.823、-0.753,P﹤0.05)。结论血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者的预后生存均呈负相关,有助于临床对患者的预后进行客观评价。

Alda-1通过激活线粒体乙醛脱氢酶2改善大鼠肺缺血再灌注损伤

目的:通过Alda-1激活线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)活性,探讨激活该酶对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法:选择24只SD雄性大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和Alda-1+缺血再灌注组(Alda-1组)。实验结束取肺组织和动脉血标本,测各组肺组织的湿干重比(W/D)、HE染色观察肺泡结构;检测血浆及肺组织的丙二醛(MDA)含量、4-羟基壬烯醛(4-HNE)浓度;Western blot检测ALDH2的相对表达量及ELISA检测ALDH2的活性。结果:与Sham组相比,I/R组肺组织W/D值明显升高(P<0.05),肺泡结构明显破坏,血浆及肺组织的MDA、4-HNE明显增多(P<0.05),ALDH2的活性明显降低(P<0.05);与I/R组相比,Alda-1组肺组织W/D值显著下降(P<0.05),肺泡结构显著改善,血浆及肺组织的MDA、4-HNE显著减少(P<0.05),ALDH2的活性明显升高(P<0.05)。结论:Alda-1可通过激活ALDH2的活性来加速醛类物质代谢从而减轻肺缺血再灌注损伤。

大鼠肠缺血再灌注损伤后乙醛脱氢酶-2的表达及意义

目的探讨大鼠肠缺血再灌注损伤后小肠组织乙醛脱氢酶-2(ALDH-2)的表达与能量代谢和氧化应激的关系。方法雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(S组)、小肠缺血再灌注损伤组(I/R组)。分别于缺血再灌注后1、6、24、48 h采用荧光定量RT-PCR检测各组小肠组织ALDH-2 mRNA的表达,比色法测定肠黏膜丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用无机磷法同时测定Na+/K+-ATPase和Ca2+/Mg2+-ATPase活性。结果 I/R组各时点ALDH-2 mRNA表达与S组比较差异均有统计学意义(P<0.05),于I/R 6 h最低;I/R组各时点肠黏膜中MDA及SOD水平与S组比较差异均有统计学意义(P<0.05),MDA在缺血再灌注6 h、SOD在缺血再灌注24 h时达到峰值;在不同时间窗,Na+/K+-ATPase和Ca2+/Mg2+-ATPase活性与S组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),两者在缺血再灌注6 h时达到峰值。结论大鼠小肠缺血再灌注损伤后,小肠组织ALDH-2 mRNA的表达下调可能是导致其能量代谢障碍功能下降的机制之一,也可能是启动氧化应激反应进程的关键环节。

大鼠肠缺血/再灌注损伤后乙醛脱氢酶-2对线粒体应激的影响

目的探讨肠缺血/再灌注(VR)损伤后乙醛脱氢酶-2(ALDH2)对线粒体应激的影响。方法32只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、VR模型组、基因沉默(ALDH2-siRNA)组和空载体(Scrambled-siRNA)组(每组均8只)。结扎肠系膜上动脉血流1h、再灌注2h,建立肠VR损伤大鼠模型;假手术组不进行结扎。ALDH2-siRNA组和Scrambled-siRNA组于术前24、6、1h分别采用经尾静脉注射ALDH2-siRNA和Scrambled-siRNA混合液各1mL;假手术组、VR模型组则分别注射等量0.9%生理盐水注射液。再灌注2h后取血并处死大鼠取肠组织。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)水平;用Western Blot和RT-PCR分别检测肠组织ALDH2及线粒体应激相关因子,如热休克蛋白(HSP60、HSP70)、NIP3蛋白(Nix)及其mRNA的表达。结果与假手术组比较,VR模型组血清炎症因子明显升高[IL-6(ng/L):172.6±38.7比450.3±101.8,P<0.01;TRAF6(ng/L):499.5±142.1比962.5±213.8,P<0.01]及线粒体应激因子蛋白水平明显升高(HSP60:1.00±0.15比4.19±0.38,P<0.01;HSP70:1.00±0.12比3.22±0.41,P<0.01;Nix:1.00±0.12比3.03±0.31,P<0.01),且其mRNA水平明显升高(HSP60:1.00±0.23比11.16±0.40,P<0.01;HSP70:1.00±0.14比5.13±0.61,P<0.01;Nix:1.00±0.11比8.41±0.52,P<0.01),而ALDH2呈低水平表达;与VR模型组比较,ALDH2-siRNA组血清炎性因子水平明显升高[IL-6(ng/L):450.3±101.8比613.3±134.5,P<0.05;TRAF6(ng/L):962.5±213.8比1383.4±238.3,P<0.01)及线粒体应激因子蛋白水平明显升高(HSP60:4.19±0.38比6.02±0.51,P<0.01;HSP70:3.22±0.41比5.11±0.52,P<0.01;Nix:3.03±0.31比4.48±0.50,P<0.01),且其mRNA水平明显升高(HSP60:11.16±0.40比14.87±0.58,P<0.01;HSP70:5.13±0.61比7.17±0.65,P<0.01;Nix:8.41±0.52比9.97±0.78,P<0.01),而ALDH2水平明显降低。结论ALDH2可能介导炎症及线粒体应激信号通路起到抑制炎症反应及调控线粒体应激的稳态作用,从而保护大鼠肠VR损伤。

线粒体乙醛脱氢酶2基因多态性对5-单硝酸异山梨酯缓释片对健康受试者药物代谢的影响

目的研究不同线粒体乙醛脱氢酶(ALDH2)基因型对5-单硝酸异山梨酯(IS-5-MN,抗心绞痛药)缓释片药物代谢的影响。方法用PCR-RFLP测定ALDH2基因型后,分为2组,入组22名健康男性受试者。单次口服IS-5-MN60mg,血药浓度测定用HPLC-MS法;同时用脉搏波分析仪测量受试者脉搏波参数值;详细记录受试者的不良反应。结果基因型为ALDH2*1/1和ALDH2*1/2的2组受试者在血药浓度、脉搏波参数、不良反应方面无明显差异;但同组内受试者的脉搏波参数值在服药前后有显著统计学差异(P<0.05)。结论ALDH2基因多态性可能不影响IS-5-MN在健康受试者体内的代谢及药物作用。

健康人乙醛脱氢酶2基因型对5-单硝酸异山梨醇酯缓释片药代动力学影响的研究

目的:探讨乙醛脱氢酶2基因(ALDH2)Glu504Lys(G504A)多态性对中国健康受试者口服5-单硝酸异山梨醇酯缓释片(IS-5-MN)药代动力学的影响。方法:在45例人群中筛选受试者,受试者单次口服IS-5-MN60mg,采集服药后36h内不同时间点的血样,HPLC-MS测定IS-5-MN的药物浓度。利用PCR-RFLP方法对ALDH2进行基因分型,分析不同基因型对IS-5-MN药代动力学的影响。结果:在45例人群中筛选出22名受试者,其中野生型纯合子13例,杂合子9例。两组基因型的IS-5-MN血药浓度和tmax差异没有统计学意义;尽管G/G基因型与G/A基因型相比,Cmax和AUC0-t分别升高了12.4%和15.3%,但差异均无统计学意义。结论:初步观察未发现ALDH2基因多态性与IS-5-MN的药代动力学有关。

乙醛脱氢酶2抗心肌缺血-再灌注损伤机制

心肌缺血-再灌注期间氧化应激产生的毒性醛类可诱发心功能障碍。乙醛脱氢酶2(ALDH2)是乙醛及其衍生物在体内氧化的关键酶,近年研究表明,ALDH2与心肌保护密切相关。目前研究表明,ALDH2除了可有效清除心肌细胞内的毒性醛类,还可在缺血-再灌注中调节自噬、对抗内质网应激、抑制心肌细胞凋亡等。该文旨在概述ALDH2在缺血-再灌注中心肌保护机制研究的新进展。

乙醛脱氢酶2调控巨噬细胞M2型极化促进创面愈合

目的验证乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)在创面愈合中的作用并探讨其分子机制。方法构建小鼠全层皮肤切除模型,随机分为对照组和Alda-1(ALDH2激动剂)组,观察创面愈合情况并检测创面组织ALDH2活性。采用Masson染色观察创面胶原纤维含量,免疫组化染色检测ALDH2和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)水平,免疫荧光染色检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)表达和F4/80^(+)、iNOS^(+)、CD206^(+)细胞数。体外实验采用白介素4(interleukin-4,IL-4)诱导RAW264.7细胞M2型极化,分别用Alda-1和ALDH2抑制剂CVT-10216处理细胞。流式细胞仪检测F4/80^(+)CD206^(+)细胞比例,酶联免疫分析测定细胞上清中促炎因子和抗炎因子水平,Western印迹法检测AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,Alda-1组小鼠创面愈合率显著提高,创面的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ及α-SMA表达增多;F4/80^(+)细胞差异无统计学意义,i NOS^(+)细胞显著减少,CD206^(+)细胞显著增多。体外实验结果显示,与IL-4组相比,IL-4^(+)Alda-1组F4/80^(+)CD206^(+)细胞比例、抗炎因子和p-AKT、p-m TOR蛋白表达显著升高,促炎因子表达降低;IL-4^(+)CVT-10216组F4/80^(+)CD206^(+)细胞比例、抗炎因子和p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著降低,促炎因子表达升高。结论ALDH2通过AKT/mTOR通路诱导巨噬细胞M2型极化,促进小鼠创面愈合。

乙醛脱氢酶2在高糖诱导神经元损伤中的作用

目的 论证乙醛脱氢酶2(ALDH2)在高糖诱导神经元损伤中的作用.方法 采用体外高糖培养的HT-22神经元细胞模型,利用ALDH2的激动剂Alda-1,探索ALDH2对体外高糖培养神经元的作用.首先探索了ALDH2在不同浓度和不同处理时间的表达规律,然后利用Alda-1处理高糖培养的HT-22神经元细胞,通过TUNEL、Hoechst-PI染色、检测LDH表达评价神经元损伤情况.最后检测ROS、MDA、SOD、GSH-Px、IL-1β和IL-18,评价氧化应激和神经炎症情况.结果 高糖可以抑制ALDH2表达,且呈浓度和时间依赖性.上调ALDH2可抑制神经元凋亡,Alda-1可以减少Hoechst+/PI+细胞数量及程序性坏死标志物RIP和MLKL的表达(P<0.05).Alda-1可以抑制神经元氧化应激和神经炎症.结论 ALDH2可通过抑制程序性死亡、氧化应激和神经炎症发挥神经元保护作用.

乙醛脱氢酶2对单核细胞-人主动脉内皮细胞黏附的影响及相关机制研究

目的:探讨乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对单核细胞(human acute monocytic leukemia cells,THP-1)-人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)黏附的影响及相关机制。方法:将HAECs分为对照(Control)组,ALDH2 NC组,ALDH2组,siRNA-ALDH2 NC组,siRNA-ALDH2-1、-2、-3组,Western blot及real-time PCR检测转染效果,细胞黏附实验检测THP-1-HAECs黏附能力,Western blot及real-time PCR检测核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)转录情况。结果:与Control组、ALDH2 NC组比较,ALDH2组中ALDH2 mRNA及蛋白表达量上调(P<0.05);与Control组、siRNA-ALDH2 NC组比较,siRNA-ALDH2-1、-2、-3组中ALDH2 mRNA及蛋白表达量下调(P<0.05),其中siRNA-ALDH2-2组中ALDH2 m RNA及蛋白表达量最低。与Control组、ALDH2 NC组比较,ALDH2组中THP-1-HAECs黏附能力降低(P<0.05),细胞核中NF-κB表达量下调(P<0.05),细胞质中NF-κB表达量上调(P<0.05),红色荧光减弱(P<0.05);与Control组、siRNAALDH2 NC组比较,siRNA-ALDH2组中THP-1-HAECs黏附能力提高(P<0.05),细胞核中NF-κB表达量上调(P<0.05),细胞质中NF-κB表达量下调(P<0.05),红色荧光增强(P<0.05)。结论:ALDH2通过抑制NF-κB核转录进而抑制THP-1-HAECs黏附,最终缓解动脉粥样硬化。

乙醇脱氢酶1B-rs1229984和乙醛脱氢酶2基因-rs671多态性实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立乙醇脱氢酶1B(ADH1B)基因rs1229984(G/A)和乙醛脱氢酶2基因rs671(G/A)多态性的实时荧光定量PCR分型方法。方法分别采用双Taq Man-MGB探针法建立ADH1B-rs1229984多态性,和ARMS-Taq Man探针法建立ALDH2-rs671多态性的实时荧光定量PCR分型方法。根据荧光定量PCR的循环阈值(Ct值)的差值ΔCt值判定等位基因型,并采用所建方法对345例中国汉族人进行了分型检测。结果所建方法对345例研究对象分型检测显示,ADH1B-rs1229984多态性的GG(ADH1B*1/*1)、GA(ADH1B*1/*2)和AA(ADH1B*2/*2)型的ΔCt值(ΔCt=G型Taq Man-MGB探针Ct值-A型Taq Man-MGB探针Ct值)分别为-13.72±1.33(40例)、0.50±0.17(150例)和6.62±0.54(155例);ALDH2-rs671的GG(ALDH2*1/*1)、GA(ALDH2*1/*2)和AA(ALDH2*2/*2)型的ΔCt值(ΔCt=G引物反应体系Ct值-A引物反应体系Ct值)分别为-15.30±0.84(239例)、0.17±0.45(96例)和15.86±0.74(10例)。345例研究对象中,ADH1B*1/*2和ALDH2*1/*1(31.3%)、ADH1B*2/*2和ALDH2*1/*1(28.7%)是2个等位基因的主要组合型(60%),未见ADH1B*1/*1和ALDH2*2/*2组合型。结论所建分型检测方法皆具有闭管、一步检测、准确和高通量等特点。

DAPT对结肠癌细胞株HT-29增殖及乙醛脱氢酶1、Notch信号通路受体和配体表达的影响

目的观察γ-分泌酶抑制剂(GSIs)DAPT对结肠癌细胞株HT-29增殖及结直肠癌肿瘤干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)、Notch信号通路受体Notch4、Notch信号通路配体DLL1表达的影响。方法体外培养HT-29细胞,取对数生长期细胞用于实验。分别以0、5、10、20、40、80μmol/L的DAPT作用于HT-29细胞24、48、72 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,用MTT比色法检测细胞增殖能力(以OD值表示)。分别以0、20、40μmol/L的DAPT作用于HT-29细胞24 h后,采用RT-PCR法检测细胞中的ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA,分别采用Western blotting法和免疫组化法检测ALDH1、Notch4、DLL1蛋白。分析HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA及蛋白表达的相关性。结果DAPT对HT-29细胞的增殖抑制作用呈一定剂量、时间依赖性,40、80μmol/L浓度组培养48、72 h时细胞增殖能力低于培养24 h时(P均<0.05)。DAPT处理后的细胞形态出现典型凋亡状态改变。20、40μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA相对表达量低于0μmol/L组(P均<0.05)。0、20、40μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1蛋白相对表达量依次降低(P均<0.05)。免疫组化染色图像分析结果示,0、20、40μmol/L的DAPT作用后HT-29细胞中ALDH1、Notch4、DLL1蛋白表达OD值依次降低(P均<0.05)。HT-29细胞中ALDH1、DLL1 mRNA表达与Notch4 mRNA表达均呈正相关关系(r分别为0.997、0.998,P均<0.05)。HT-29细胞中ALDH1、DLL1蛋白表达与Notch4蛋白表达均呈正相关关系(r分别为0.998、0.999,P均<0.05)。结论 DAPT作用后,细胞增殖受到抑制,细胞中ALDH1、Notch4、DLL1 mRNA和蛋白表达下调;DAPT对HT-29细胞的增殖抑制作用可能与降低肿瘤干细胞特性、下调Notch信号通路受体与配体表达实现的。

乙醛脱氢酶2抑制4-HNE对心肌梗死模型大鼠的影响及作用机制

目的研究乙醛脱氢酶(ALDH)2抑制4-羟基壬烯醛(HNE)对心肌梗死模型大鼠的影响及作用机制。方法选择32只SD健康雄性大鼠,建立心肌梗死模型,分为模型组、ALDH2过表达组、ALDH2沉默组、正常组各8只。检测心功能相关指标,观察病理学,细胞转染后建立稳定转染的ALDH2过表达组、ALDH2沉默组。检测4-HNE水平,观察心肌细胞凋亡、心肌梗死面积,Western印迹检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p53蛋白表达。结果与模型组、ALDH2沉默组相比,ALDH2过表达组LVDd、LVDs、LVPWD、IVSD水平显著降低(P<0.05)。与模型组、ALDH2沉默组相比,ALDH2过表达组4-HNE水平显著降低(P<0.05)。与模型组、ALDH2沉默组相比,ALDH2过表达组心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积显著降低(P<0.05)。与模型组、ALDH2沉默组相比,ALDH2过表达组JNK、ERK蛋白表达显著降低,p53蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论过表达ALDH2能够抑制4-HNE水平,改善心肌梗死大鼠心功能状况,通过调控JNK、ERK、p53相关蛋白,能够抑制心肌细胞凋亡。

建立TaqMan-MGB探针方法检测乙醛脱氢酶2基因多态性

目的建立一种Taq Man-MGB探针方法用于快速检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性。方法根据NCBI网站公布的ALDH2 rs671基因序列,针对rs671位点基因多态性设计特异引物和Taq Man-MGB探针,建立和优化实验条件;与测序法作比较,进行一致性分析。验证Taq Man-MGB探针检测方法的准确性。结果Taq Man-MGB探针法和测序法平行检测样本60例,两种检测结果进行Kappa分析,Kappa=0.962。结论两种检测方法结果一致性良好,建立了检测ALDH2 rs671基因多态性的Taq Man-MGB方法。

乙醛脱氢酶-2基因多态性对北京市汉族老年冠心病患者急性心肌梗死发生率的影响

目的回顾性分析北京汉族老年冠心病人群急性心梗(acute myocardial infarction AMI)发病与乙醛脱氢酶-2(aldehyde dehydmgenase-2 ALDH-2)基因G487A多态性的相关性,为进一步预防、降低老年急性心肌梗死发生率提供参考依据。方法选择2009年5月到2010年12月于北京第二炮兵总医院心内科行冠状动脉造影检查异常且住院资料完整的北京市汉族60岁及以上患者162例,分为A、B两组;A组54例,为急性心肌梗死(acute myocardial infarction AMI)组;B组108例,为稳定性心绞痛(stable angina pectoris SAP)组;冠脉造影阴性组34例,为C组。全部入选患者分别详细记录病史及查体情况,于次日晨空腹采集静脉血,检测ALDH-2基因型(野生纯合型记为GG,突变型杂合型为GA,突变纯和型为AA)、血常规以及生化全套等。结果三组分别两两相比,A组与B组相比;A组与C组相比,ALDH-2突变基因型明显增多,差别有显著统计学差异(P<0.05)。B组与C组相比,ALDH-2突变基因型有减少趋势,但两组间未见统计学差异(P>0.05),见表1所示。结论 ALDH-2突变基因型是北京汉族老年冠心病患者发生急性心肌梗死的危险因素之一。

乙醛脱氢酶-2基因及其rs671多态性与相关疾病

乙醛脱氢酶-2(ALDH2)是酒精代谢过程中的关键酶,在酒精代谢产生的高毒性物质乙醛的催化过程中起着重要作用,其基因多态性(尤其是rs671位点多态性)与肝脏疾病、心血管疾病、呼吸道疾病、癌症、阿尔茨海默病(AD)等的发生或发展关系密切,成为近年关注和研究的主要课题。

基于PCR-金磁纳米微粒层析技术检测乙醛脱氢酶2基因多态性方法的建立及应用

目的基于"PCR-金磁纳米微粒层析法"建立用于口腔拭子样本类型的乙醛脱氢酶2(ALDH2)Glu504Lys基因分型检测技术。方法以口腔拭子为样本类型,利用ARMS-PCR技术,针对ALDH2 Glu504Lys基因设计特异性引物,在实验室PCR常规反应条件上以金磁纳米层析试纸条为检测平台对各项条件进行优化,以确定最优PCR-金磁微粒ALDH2Glu504Lys口腔拭子反应体系和PCR反应程序。收集60例口腔拭子样本,利用金磁纳米层析检测技术进行检测,并用测序结果进行验证。结果检测的60例口腔拭子样本中杂合突变型16例,野生型42例,纯合突变型2例,金磁微粒层析法检测基因分型结果与测序结果符合率100%。结论建立了基于金磁纳米微粒ALDH2 Glu504Lys口腔拭子基因检测技术,该方法具有快速、简便和准确的特点,迎合了当下POCT的发展趋势,值得临床推广和应用。