紫外线消毒海水培育九孔鲍苗的研究

2000年以来自福建省南部海域至广东、海南岛沿海,陆续发生九孔鲍人工培育种苗大量死亡现象—“脱板症”,造成九孔鲍苗的严重短缺。经研究初步认为“脱板症”是一种疑似病毒性疾病[1]。本文针对九孔鲍人工培育种苗疑似病毒性疾病,利用紫外线发生装置消毒海水培育九孔鲍苗,取得了一定的成效,比较药物处理海水培育九孔鲍苗提高出苗率达50%以上。

1999年春季东山九孔鲍暴发性病害研究

对 １９９９ 年春季福建省东山县九孔鲍的暴发性流行病进行调研和检测，对细菌性病原进行分离纯化、回归感染确定致病原、对致病菌进行形态（包括电镜和光镜观察）和生理生化鉴定；对病毒性病原进行电镜负染和超薄切片观察、以及病理变化分析．结果表明引起此次东山养殖九孔鲍暴发性流行病的主要致病原是 ３ 种球状病毒（５０ ｎｍ 、１１０ ｎｍ 、１５０ ｎｍ ）、溶藻弧菌和副溶血弧菌．还探讨了这些病菌和病毒的致病性，并以 ４９ 种药敏纸试验寻求防治的有效药物．

引起九孔鲍大量死亡的一种球状病毒

对 1999年初春福建省东山县工厂化养殖九孔鲍中发生的流行性死亡 ,开展了九孔鲍的病理学研究 ,电镜下发现病鲍的肝脏细胞质中有大量具被膜 2 0面体、大小约为 10 0nm的病毒粒子。通过感染实验 ,推断该病毒是造成此次九孔鲍大量死亡的病原体 ;由于肝脏细胞的大量病变和坏死引起九孔鲍的大量死亡。

东山九孔鲍细菌性疾病研究

本文分离纯化了 1 999年春东山县患病九孔鲍的 2株主要病原菌 ,进行了回归感染、药敏试验、病变组织的超薄切片观察 .结果表明此次暴发性流行鲍病的致病菌主要是溶藻弧菌和副溶血弧菌 .在所进行的 48种药物的药敏试验中 ,2株菌仅对氯霉素和复方新诺明等 8种药物共同敏感 ,药物联合抗菌试验还表明复方新诺明与磺胺甲基异恶唑等有协同作用 ,氯霉素与复方新诺明等有加成作用 .

盐度对九孔鲍摄食、生长及存活的影响

九孔鲍摄食人工饲料的盐度范围为 2 0～ 38,其中较适宜的盐度范围为 2 5～ 35 ,在此盐度范围内 ,小规格鲍 (平均壳长 1 .30cm ,平均体重 0 .37g)的壳长日增长为 91 .5～ 1 0 2 .3μm ,日增重为 8.6 0～ 1 2 .5 5mg ;大规格鲍 (平均壳长 2 .6cm ,平均体重 2 .3g)的壳长日增长为 5 6 .30～ 81 .80 μm ,日增重为 1 2 .6 8～ 2 2 .48mg ,其最适生长的盐度为 30～ 35 ,存活率为 97%～ 1 0 0 %。九孔鲍所能忍受的盐度变化范围为 :日渐变幅度 (2 4h内盐度变化 )为 1 6 ;日突变幅度 (瞬间变化 )为 1 4 ,这些研究结果对开展九孔鲍人工养殖将有一定的参考意义。

九孔鲍摄食江蓠与人工配合饵料的能量收支比较

通过投喂江蓠 (Gracilariaceaelicheniodes)和配合饵料对九孔鲍 (Haliotisdiversicoloraquatilis)的能量收支进行了比较研究 .结果表明 :两种饲料组的九孔鲍耗氧率在昼夜之间均并没有明显差异 (P >0 .0 5 ) ,九孔鲍摄食两种饵料的吸收率也没有显著差异 (P >0 .0 5 ) ,而饵料系数、蛋白质效率、总生长效率则有显著的差异 (P <0 .0 5 ) .配合饵料组的排泄能显著高于江篱组的 (P <0 .0 5 ) ,而代谢能和粘液能却显著低于江篱组的 (P <0 .0 5 ) ,两组饲料的排粪能和壳能没有显著差异 (P >0 .0 5 ) .因壳能很少 ,在测定中可以忽略 .配合饵料组的软体部生长能显著高于江篱组的 (P <0 .0 5 ) .摄食江蓠和配合饵料的九孔鲍能量收支方程分别为 :江蓠组10 0C =(12 .76± 1.2 2 )F +(76 .4 7± 5 .33)R +(2 .74± 0 .4 0 )U +(6 .75± 0 .4 6 )M +(2 .78± 0 .4 8)Pg+(0 .0 3±0 .0 1)Psh- (1.5 3± 4 .19)配合饵料组10 0C =(12 .15± 1.6 9)F +(5 4 .94± 5 .10 )R +(4.5 0± 0 .70 )U +(3.99± 0 .0 7)M +(2 9.79± 4 .77)Pg+(0 .0 3±0 .0 1)Psh- (5 .4 0± 7.4 3)

氟苯尼考在九孔鲍体内的药代动力学初步研究

初步研究了新型抗菌兽药氟苯尼考(florfenicol)在健康九孔鲍体内的药代动力学特征;建立了高效液相色谱法(HPLC)检测鲍血淋巴中氟苯尼考含量的可靠方法,平均回收率为85.69%,最低检测限0.05μg/cm3.以20×10-6(m/m)剂量对九孔鲍腹足单次肌注,血药浓度-时间数据用非房室模型的统计矩原理(SMT)处理后的主要药代动力学参数为:血药浓度-时间曲线下面积(AUC)为21.25mg/(h.dm3),平均滞留时间(MRT)为2.41h,清除率(C lB)为0.94dm3/(kg.h),稳态表观分布容积[Vd(ss)]为2.27dm3/kg,消除半衰期(t1/2β)为3.61h.结果显示氟苯尼考在九孔鲍体内吸收良好,分布广泛,代谢消除快.

不同类群九孔鲍免疫防御机能的比较

对不同类群的九孔鲍细胞与体液免疫机能进行比较,结果表明,不同类群的九孔鲍免疫机能具有显著的差异性,复壮鲍(养殖10个月,个体大小为51.8～59.2mm)细胞与体液免疫机能都明显高于退化鲍(养殖20个月,个体大小为37.4～43.1mm)(P<0.01),与野生九孔鲍(个体大小为67.7～76.7mm)相比,复壮鲍细胞免疫机能略高于野生鲍,体液免疫机能则明显低于野生鲍。九孔鲍血细胞在吞噬活动中具有呼吸爆发产生活性氧的功能与特点,活性氧的产生与九孔鲍自身生理、环境温度以及异物数量等因素有显著的相关性(P<0.01)。环境温度由25℃下降至18℃,九孔鲍的细胞与体液免疫机能都有明显的下降。退化鲍在25℃和18℃条件下血淋巴液的抗菌活力水平差异性不明显。酚氧化酶存在于九孔鲍血淋巴液中,但其活性水平不高,在各类九孔鲍之间的差异性也不明显,不能确认为九孔鲍的主要体液免疫因子。

氨氮对九孔鲍过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活力的影响

通过测定不同氨氮条件下的九孔鲍内脏囊中的过氧化氢酶（ＣＡＴ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力，观察氨氮对九孔鲍ＣＡＴ和ＳＯＤ酶活力的影响。实验结果表明：不同氨氮浓度下的这两种酶活力不同，ＣＡＴ活力随氢氮浓度的升降而变化，当氨氮浓度为３～４ｍｇ／Ｌ时，其活力高于对照组，当浓度增大至５～６ｍｇ／Ｌ时，ＣＡＴ活力低于对照组；在氨氮为１～４ｍｇ／Ｌ时，ＳＯＤ活力随氨氮浓度增大而上升，在４ｍｇ／Ｌ时达到最大，而当氨氮增至５～６ｍｇ／Ｌ时，ＳＯＤ活力下降。不同温度下的氨氮浓度对九孔鲍的ＣＡＴ和ＳＯＤ酶活力变化也有一定的影响。

副溶血弧菌感染的九孔鲍血细胞均一化全长cDNA文库的构建

采用Trizol试剂提取副溶血弧菌感染的九孔鲍血细胞的总RNA,经Oligotex纯化得到mRNA.根据SMART技术原理合成双链cDNA.双链cDNA采用双链特异核酸酶进行cDNA的均一化,构建成九孔鲍血细胞的均一化全长cDNA文库.原始文库的库容为3.4×106cfu/cm3,重组率为92.3%,扩增后文库的滴度为2.6×1011cfu/cm3以上.从文库中随机挑取897个克隆,测序获得高质量ES-Ts814条,其中有23条Contigs;762条Singlets,Unigenes共785条,冗余率只有3.56%.以上结果说明所构建的文库质量好,完全可以满足后续基因克隆和表达序列标签测序工作的需要.

敌百虫对九孔鲍稚鲍和真猛水蚤的毒性作用

不同温度下 ,敌百虫对稚鲍的毒性作用不同 ,在水温 2 1～ 2 2℃下 ,2 4h、 4 8h、72h、96h的半致死浓度分别为 182mg/L、 4 6mg/L、10 6mg/L ,6 6mg/L ,安全浓度为 4 6mg/L ;水温 2 6～ 2 7℃ ,在相同时间内的半致死浓度分别降至 12 9mg/L、 11 1mg/L、 8 2 5mg/L和5 1mg/L ,安全浓度为 1 11mg/L ;敌百虫对真猛水蚤的毒性也是随着水温升高而增强 ,水温2 1～ 2 2℃ ,2 4h、 4 8h、 72h的半致死浓度分别为 2 7× 10 - 1mg/L、 3 5× 10 - 2 mg/L、 2 0×10 - 2 mg/L ,安全浓度为 3 5× 10 - 2 mg/L ;当水温升至 2 6～ 2 7℃时 ,半致死浓度分别为 8 3× 10 - 2mg/L、8 3× 10 - 3mg/L、3 6× 10 - 3mg/L ,安全浓度为 8 3× 10 - 4mg/L 敌百虫对稚鲍的亚急性作用结果是 :在 0 4～ 2 0mg/L下生活 2 0d ,稚鲍的壳长、体重、摄食及存活率随其浓度的增大而降低

九孔鲍和杂色鲍等位酶的生化遗传分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对九孔鲍(Haliotisdiversicolorsupertexta)的养殖群体和杂色鲍(H.diversicolordiversicolor)的自然群体进行了10种等位酶的电泳检测和谱带遗传分析,在研究九孔鲍的18个等位酶位点和27个等位基因中,单态位点有Ldh -1、Adh -1、Sod-1、Sod-2、Sod-3、Est-1、Mdh -2、Me-1、Idh -1、Sdh-1、Sdh -2、Amy-2、Amy-3,在这些位点只有一个等位基因(Sdh -2除外);有5个位点是多态的,它们是Est-2、Est-3、Mdh-1、Aat-1、Amy-1(P0.99 标准),多态位点的百分数为27.78%,在这些位点有2～4个等位基因。在研究杂色鲍的18个等位酶位点和26个等位基因中,单态位点有Ldh -1、Adh -1、Sod-1、Sod -2、Sod -3、Est-1、Mdh-2、Idh -1、Sdh-1、Sdh -2、Amy-2、Amy-3,在这些位点只有一个等位基因;有6个位点是多态的,它们是Est-2、Est-3、Mdh-1、Me-1、Aat-1、Amy-1(P0.99标准),多态位点的百分数为33.33% ,在这些位点有2～4个等位基因。九孔鲍和杂色鲍在所有位点中共享大多数常见等位基因 ,因此在生化遗传上它们非常相似。本研究揭示了九孔鲍和杂色鲍群体等位酶位点及其等位基因带谱的变异式样 ,为九孔鲍和杂色鲍的遗传结构及遗传育种的研究提供了一批等位酶位点及其等位基因的参考图谱。

闽南养殖九孔鲍暴发性流行病的病原研究

从1999年春季东山县九孔鲍暴发流行病的病鲍内脏提取病原粗提液,经电镜观察和回归感染实验,证实其病原主要是病毒合并细菌感染,细菌为两种弧菌,病毒为球形,其发生基质为细胞质中一种双层膜的泡状结构,观察到病原入侵后引起鲍的组织细胞产生严重的病理变化,探讨病原的入侵途径,提出预防该流行病的一些措施.

九孔鲍育苗池附着基上底栖微藻群落及其多样性

2006年9月14至10月26日对福建省漳浦县下蔡九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)育苗池进行定点采样。检测结果共鉴定底栖微藻24属62种,其中硅藻21属59种,绿藻、蓝藻和褐藻各1种。附着基上底栖微藻的优势种有12种,全部为硅藻,如盾卵形藻微小变种(Cocconeis scutellum var.parva)、小形舟形藻(Navicula parva)、咖啡双眉藻(Amphora coffeaeformis)、琴式菱形藻(Nitzschia panduriformis)等。优势种的优势度突出。常见种有25种,少见种有27种。优势种和常见种多是能够适应底栖环境的种类。附着基上底栖微藻种类及多样性指数育苗早期波动大,后期逐渐稳定,底栖微藻多样性指数平均为0.980～1.959,结果表明,底栖微藻群落结构的演变与鲍幼体摄食活动有很大的相关性。

东山九孔鲍病毒病病毒的分离观察

运用电镜负染和超薄切片技术 ,在福建东山患病的九孔鲍的肾组织细胞、肝细胞和肠上皮细胞中可见有大小为 1 0 0nm的具包囊的六角形病毒颗粒 ,病鲍组织匀浆后 ,经蔗糖分步超速离心 ,RNA酶及DNA酶消化去除组织内DNA、RNA后 ,获得纯化的病毒颗粒 .又经蛋白酶K消化后得到病毒的核酸 ,以DNaseI或RNaseA分别消化 ,经 1 % (m/m)的琼脂糖凝胶电泳证实该病毒为DNA病毒 .

九孔鲍双列杂交家系子代的杂种优势与配合力分析

为解决中国南方九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)种质资源近交衰退的难题,笔者以汕尾养殖群体(BD)与深圳野生群体(YS)的九孔鲍作为亲本,采用完全双列杂交建立了4个交配组合,在120日龄、150日龄、210日龄和270日龄时分别对这些交配组合的生长性状(壳长、壳宽和体质量)进行了杂种优势分析和配合力估算。结果显示,杂交子代壳长、壳宽和体质量性状的中亲优势与超亲优势范围分别为5.3~17.0、6.3~15.3、7.8~9.0和-1.0~11.2、-1.2~6.6和-10.9~4.1,反交组相对正交组有较高的中亲优势;BD群体各阶段生长性状的一般配合力效应值均为负值,范围分别为-0.19^-0.09,-0.11^-0.07和-0.40^-0.24,YS群体各生长阶段生长性状的一般配合力效应值均为正值,范围分别为0.09~0.19,0.07~0.11和0.24~0.40。YS群体与BD群体各生长阶段生长性状的特殊配合力效应值分别为0.01~0.14、0~0.07和0.02~0.07。BD群体的一般配合力、特殊配合力和母本效应效应值均小于YS群体,表明增加野生群体在交配亲本中的数量可有效提高九孔鲍生长性能。

九孔鲍摄食海带的能量收支研究

在室内水族箱投喂新鲜海带养殖九孔鲍(Haliotisdiversicoloraquatiliis).实验结果表明,个体耗氧率在夜晚高,白天低,最高是在17∶30～21∶30.摄食能(C)中,只有少部分(2.60%)的能量用于软体部和壳的生长,而很大一部分能量(52.86%)是在代谢能(R)中,排泄能(U)、排粪能(F)、粘液(M)和壳能(Psh)分别占摄食能的9.69%、12.33%、6.61%和0.26%,鲍能量收支方程为:100%(C)=12.33%(F)+52.86(R)%+9.69%(U)+6.61%(M)+2.33%(Pg)+0.26%(Psh)+15.90%

我国南方九孔鲍工厂化养殖可持续发展的探讨

综述了九孔鲍工厂化养殖的现状和存在问题 ,并对九孔鲍养殖业走出困境 ,恢复持续发展提出四点看法 :1)减少污染 ,保持良好的生态环境 ;2 )提倡养殖废水的综合利用 ;3)加强鲍的健康苗种培育及杂交育种研究工作 ;4 )加强鲍病的综合防治 .

杂色鲍与九孔鲍消化酶活力的比较

对人工养殖的、不同体长的杂色鲍与九孔鲍消化酶活力大小进行了研究。酶学分析表明,无论是杂色鲍还是九孔鲍,其纤维素酶随着鲍的体长的增大活性逐渐增强;淀粉酶随着其体长的增大活性逐渐减弱;脂肪酶活性均很小;九孔鲍的纤维素酶活力和淀粉酶活力均大于相同体长的杂色鲍。

一种消除九孔鲍苗细菌性病原的无公害绿色生物方法的研究

从海洋环境中分离出4株蛭弧菌(Bdellovibriosp.),并对34株九孔鲍(Haliotisdiversicolor)苗细菌性病原进行了裂解试验。结果表明,Bh04-4、Bh04-41a、Bh04-A+和Bh04-1f等4株蛭弧菌分别可裂解11株、13株、22株和28株病原菌,裂解率为32.4%、38.2%、64.7%和87.5%;4株共同作用,则可裂解32株病原菌,裂解率高达94.1%。研究结果展示了应用蛭弧菌控制九孔鲍苗细菌性病原的可行性。