九龙公牦牛κ-酪蛋白CSN3基因两个位点的多态性研究

为了研究九龙牦牛κ-酪蛋白CSN3基因中两个位点的遗传多态性,试验采用Chelex 100法从九龙公牦牛(n=100)肌肉中快速提取基因组DNA,用PCR法扩增κ-CN CSN3基因第4外显子部分片段,并利用非变性PAGE和PCR-SSCP法分析扩增序列中存在的多态位点及其关联性。结果表明:九龙公牦牛的CSN3基因具有12 bp重复序列(编码4个氨基酸)多态性,产生3种基因型,即LL、LS和SS,基因型频率分别为0.640,0.280,0.080,且测序发现L等位基因比S等位基因多12 bp重复序列;PCR-SSCP方法可确定CSN3基因第13 064 bp处发生C/T异义突变,表现为不同的基因型,即CC、CT和TT,基因型频率分别为0.680,0.250,0.070。在九龙公牦牛中,CSN3基因中具有12 bp重复序列的L等位基因和编码Thr136的C等位基因占明显优势,说明用非变性PAGE和PCR-SSCP法可精准分析九龙公牦牛CSN3基因型,两个多态性位点在进化上可能有关联。