酶解乳清浓缩蛋白WPC80制备乳清肽的研究

用乳清浓缩蛋白WPC80为原料,在复合酶A的作用下,研究乳清肽的制备工艺。复合酶A的反应条件为[S]12g/100mL、温度50℃、[E]/[S]3%、pH9.0。选用截留分子质量10kD的磺化聚砜膜,常温并在工作压差0.25MPa下对水解液进行超滤处理后,选用树脂HZ00x对水解液进行脱苦,得到的处理液无明显的苦涩味,只有轻微的蛋腥味,最后肽得率36.54%。产品中肽的分子质量分布以二、三和四肽为主,分别占峰面积的27.45%、34.88%和26.65%。

添加不同分子量乳清肽对快速成熟干酪的影响

以干酪成熟期间的p H值、可溶性氮质量分数、游离脂肪酸及质构特性为检测指标,通过研究添加不同分子量的乳清肽对干酪快速成熟影响,确定乳清肽具有促进干酪快速成熟的作用。结果表明:添加乳清肽能够促进干酪成熟期间p H值、可溶性氮及干酪质构特性产生变化,提高成熟速度;分子量为3 000 u以下的乳清肽促进干酪快速成熟效果最佳,在35 d成熟期内,添加分子量3 000 u乳清肽的干酪,p H值由5.62降至5.35,p H4.6 SN由4.8%增至19.32%,质量分数12%TCA SN由3.02%增至11.7%,游离脂肪酸(FAA)由2.5%增至11.97%,硬度和凝聚性呈先下降后增加的趋势,弹性和呈先上升后下降的趋势。

模拟消化对乳清肽结构和抗氧化活性的影响

为开发乳清肽在抗氧化食品方面的应用,该研究通过酶解乳清蛋白获得乳清肽,以分子质量分布、紫外全波长扫描及圆二色光谱表征乳清肽在经模拟胃肠液消化后结构方面的变化;对比模拟胃肠液消化前后乳清肽的DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、铁离子还原能力(ferric ion reducing antioxidant power,FRAP)及氧自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)。结果表明,乳清肽主要由分子质量为150 Da~1000 Da的小肽组成,所占比例均高于80%;紫外全波长扫描显示模拟胃肠液消化以后乳清肽的氨基酸芳香杂环电子跃迁发生变化;圆二色光谱结果表明乳清肽对胃蛋白酶和胰蛋白酶的消化均具有一定的稳定性。此外4个抗氧化指标中除了DPPH自由基清除率外,其余3个指标在模拟胃肠液消化后抗氧化活性均有所提高,ORAC值在经模拟胰液消化后提升最明显(p<0.05)。

乳清蛋白肽在抗血压、血糖、血脂方面的研究进展

目的:综述了乳清蛋白肽在降血压、降血糖、降血脂方面近几年的情况,对该方向进行了展望。方法:阅读参考乳清蛋白肽相关的研究性论文、综述等。结果:乳清蛋白肽能抑制血管紧张素-I转换酶、二肽基肽酶IV、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶等。结论:乳清蛋白肽可以在降血压、降血糖以及降血脂等方面发挥功效。

乳清蛋白肽对阿尔兹海默症的改善作用研究进展

目的:乳清蛋白肽具有多种生物活性功能,其可以预防和改善阿尔兹海默症。方法:综述阿尔兹海默症的发病机制和研究现状。结果:乳清蛋白肽可以减少氧化应激损伤,Tau蛋白过度磷酸化及胆碱能神经元丧失引起的阿尔兹海默症。结论:开发具有益智功能的蛋白多肽类产品对未来临床治疗发挥重要作用,其在未来发展趋势中有一定的发展前景。

乳清多肽对猪肉糜氧化和凝胶特性的影响

目的：研究乳清多肽对猪肉糜氧化和凝胶特性的影响作用。方法：实验分为6组,第1组为空白对照组,第2组加入20%（质量分数,下同）的乳清分离蛋白未水解物,第3~5组中分别加入10%、15%、20%的乳清分离蛋白水解物冻干粉,第6组中加入0.02%的丁基羟基茴香醚（butylated hydroxyanisole,BHA）。在肉糜冷藏7 d过程中测定过氧化值、羰基含量、巯基含量及凝胶的质构、白度、保水性、流变学特性的变化。结果：在贮藏初期,处理组和对照组之间无显著差异（P〉0.05）。贮藏7 d后,添加乳清分离蛋白水解物组在抑制氧化和保护凝胶品质方面都要比对照组和未水解组好（P〈0.05）。其中添加20%乳清分离蛋白水解物冻干粉的储能模量的极大值最高,而在抑制脂肪、蛋白氧化及保护凝胶质构、保水性方面,添加15%乳清分离蛋白水解物冻干粉效果更好（P〈0.05）,接近甚至达到了BHA组水平。结论：乳清多肽具有抑制猪肉糜氧化和保护肉糜凝胶品质的作用。

乳清蛋白肽美拉德反应产物的抗氧化活性与稳定性

以乳清蛋白碱性蛋白酶水解物为原料与葡萄糖发生美拉德反应，制备得到乳清蛋白肽美拉德反应产物（wheyproteinpeptideMaillardreactionproducts，WPP—MRPs），并研究其抗氧化活性以及温度、pH值、光照、金属离子和过氧化氢对其抗氧化活性的影响。结果表明，WPP—MRPs具有较强的总还原力、羟自由基（·OH）清除能力和2，2’．连氮基。双-（3．乙基苯并二氢噻唑啉．6．磺酸）二铵盐自由基（ABTS’·）清除能力，且抗氧化活性随着WPP—MRPs质量浓度的增加而加强。WPP—MRPs在90-100℃时具有较高的活性；在碱性环境中的抗氧化活性大于在中性及酸性环境中；室外自然光照射会降低wPP—MRPs抗氧化活性；金属离子Cu2＋、Fe＋、Fen和氧化剂一过氧化氢能够显著降低wPP．MRPs的抗氧化活性。

乳清蛋白肽的制备及羟自由基的清除作用

以全乳清为原料,利用碱性蛋白酶对乳清蛋白进行降解。结果表明,水解后的蛋白多肽对Fenton体系产生的羟自由基有清除能力。并通过正交试验,得出最优水解条件,即碱性蛋白酶[E/S]=1%,温度为60℃,pH=8.0,时间为1h,水解度12.46%的条件下,乳清蛋白肽的羟自由基清除能力最强,达到93.50%。

菠萝乳清多肽饮料的研制

利用菠萝汁中所含蛋白水解酶将乳清蛋白部分水解成功能性多肽,再进行脱苦调配成菠萝乳清多肽饮料。酶解条件的优选采用L9(34)正交实验法,以蛋白质水解度为评价指标,确定最佳酶解条件为:乳清蛋白酶解的最佳条件为菠萝汁用量20%,乳清蛋白2%,酶解时间为60 min,酶解温度为45℃。乳清多肽菠萝饮料风味调配最佳配方为蔗糖量为5%、酸量(柠檬酸和苹果酸1∶1)0.1%、β-环状糊精量为1.5%和CMC量为0.3%。所得产品口感良好,品质稳定。

超滤分级研究乳清蛋白肽美拉德反应产物的抗氧化活性的影响

以乳清蛋白肽（WPP）为研究对象,利用葡萄糖对其进行美拉德修饰,制备得到关拉德反应产物（Maillard reaction products,MRPs）,然后利用超滤技术将MRPs分成相对分子量不同的3个组分（组分Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）,测定各组分的抗氧化活性.研究结果表明,组分Ⅱ（0.8～5 ku）具有最高的还原能力、自由基清除能力和金属离子螯合能力以及最强的抑制脂质氧化能力（p＜0.05）,且随着各组分浓度的增高,其抗氧化活性显著增强（p＜0.05）.总之,分子量会对MRPs的抗氧化活性产生影响.

黑豆乳清多肽抗皮肤光老化作用的研究

以昆明小鼠为对象,研究了黑豆乳清多肽对皮肤光老化的保护作用。试验设空白组(动物不照射紫外线),阳性对照组(脱毛区皮肤涂抹10%Vc溶液),给药大、小剂量组(分别涂乳清多肽含量为15%和5%的乳液),模型组(涂抹蒸馏水)和基质组(涂抹基质乳液)。除空白组外,其余各组小鼠均用长波紫外线照射12周。试验结束后处死动物,取受试部位皮肤进行切片观察和生化指标检测。结果表明,与模型组相比,给药大剂量组动物皮肤中CAT活力水平和HYP含量均显著升高(P<0.01)、单位面积的皮肤质量和MDA含量显著降低(P<0.01),皮肤红斑量和受损程度明显减轻。表明黑豆乳清多肽有抗皮肤光老化的作用。

乳清蛋白肽抗氧化活性的研究进展

综述了乳源蛋白肽的研究现状和乳清蛋白肽的抗氧化途径。乳清蛋白肽通过清除自由基,螯合金属离子,减少氢过氧化物和改变食品物理性状等方式起到抗氧化作用。探讨了氨基酸组成及乳清蛋白肽的结构与抗氧化活性之间的关系。易于供氢的氨基酸最易被氧化起到抗氧化作用,抗氧化活性还受到多肽空间结构的影响。测定乳清蛋白肽抗氧化活性的方法很多,由于测定条件和测定指标的不同,研究者往往得出截然相反的结论。抗氧化活性肽来源丰富,乳清蛋白肽显示出一定的优势,具有广泛的市场应用前景。

乳清多肽对抑制反复冻融猪肉糜氧化和改善品质的影响

为研究乳清多肽(whey protein hydrolysates,WPH)对反复冻融猪肉糜氧化和品质的影响规律及机理,本实验将不同质量分数(5%、10%、15%)WPH添加到生猪肉糜中,进行不同冻融循环(0~9)处理,检测冻融后肉糜解冻损失、硫代巴比妥酸(thiobarbituricacid reactive substances,TBARS)值、挥发性盐基氮(total volatile base nitrogen,TVB-N)值、质构特性、流变学模量损耗、蛋白羰基含量以及拉曼光谱的变化情况。结果表明,未经冻融时,样品组与空白组各指标之间都无明显差异(P>0.05)。冻融处理后,猪肉糜的解冻损失率由2.67%~2.93%升高至7.00%~12.4%,其中15%WPH明显抑制了解冻损失的增加(P<0.05),提高了肉糜保水性。当冻融循环达到7~9次后,添加15%WPH组抑制肉糜TVB-N值、TBARS值以及羰基含量升高均比空白组和未水解乳清多肽组效果好(P<0.05)。在质构方面,随着冻融次数的增加,猪肉糜硬度、弹性、内聚性和咀嚼性均呈现明显的下降趋势。冻融9次时,15%WPH可使猪肉糜咀嚼性从9.63 g升高到17 g;冻融5次时,15%WPH组的弹性高达到0.69,超过丁基羟基茴香醚(butylatedhydroxyanisole,BHA)阳性空白组;WPH组和BHA组的硬度和内聚性均显著高于空白组;不同添加量WPH对猪肉糜质构都有改善作用,其中高剂量组效果最好。流变学结果显示,WPH组猪肉糜损耗模量G’’降低比较明显。拉曼光谱表明,添加15%WPH有效抑制了冻融循环过程中肉蛋白α-螺旋含量下降、β-折叠含量上升的现象,保护了蛋白质二级结构。实验表明,在冻融循环过程中,WPH起到抑制猪肉糜氧化和改善产品品质的作用。

乳清蛋白肽对幼年大鼠生长发育的影响

目的:探讨乳清蛋白肽对幼年大鼠体格、长骨发育及血液参数的影响。方法:40只雄性断乳SD大鼠随机分为1个阴性对照组和低(0.225%)、中(0.45%)、高(1.35%)3个乳清蛋白肽干预组,每组10只动物。连续喂养42d,期间每周测量体重和身长一次,计算食物利用率,实验结束时对每只大鼠进行血液常规和生化指标检测,并测定股骨长度、直径、骨矿物质含量和密度。结果:中、高剂量乳清蛋白肽干预组大鼠体重及食物利用率较对照显著增高;高剂量组大鼠股骨近端骨密度及矿物质含量较对照显著增加;乳清蛋白肽干预组大鼠股骨干重、长度和直径较对照有增加趋势,但尚未见统计学差异;中、高剂量组大鼠血肌酐和血尿酸含量较对照组显著降低。结论:一定剂量的乳清蛋白肽能够促进幼年大鼠体格发育和增加长骨矿物质密度。

乳清蛋白肽对自然衰老小鼠抗氧化效果及脑内乙酰胆碱脂酶的影响

利用碱性蛋白酶水解制得的乳清蛋白肽(WPP),以青年小鼠、自然衰老的小鼠和灌胃脑复康的自然衰老的小鼠作对照,以灌胃低中高剂量乳清蛋白肽即100,200和400 mg/(kg·d)自然衰老的小鼠为实验组,通过体内抗氧化指标(SOD、MDA、GSH-Px、蛋白质羰基)和脑内乙酰胆碱脂酶来研究乳清蛋白肽对自然衰老的小鼠抗氧化效果及乙酰胆碱脂酶活力的影响,并探究WPP对老龄小鼠学习记忆的影响。灌胃乳清蛋白肽自然衰老小鼠的SOD和GSH-Px活性显著增加,MDA和蛋白质羰基浓度显著降低,同时乙酰胆碱脂酶的活性也有所降低,高剂量组与脑复康对照组结果相近;实验结果表明乳清蛋白肽能显著提高自然衰老小鼠抗氧化能力,并能调节脑组织乙酰胆碱酯酶的活性,提高衰老小鼠学习记忆认知功能。

乳清多肽酒的开发

采用蛋白酶水解乳清粉,并对乳清多肽进行酵母菌发酵,对发酵所得乳清酒进行风味调配。乳清粉最佳的水解条件为:[E/S]=1%、T=60℃、pH=9.0、时间=120min,水解度为DH=21.22%。乳清多肽酒的最优发酵条件:接种量为5%、起始pH为7.5、温度为22℃、发酵60h,酒度可达到3.9。多肽乳清酒的最佳基本调配是:酸量(苹果酸∶柠檬酸=1∶1)为0.1%、蔗糖为7%、环状糊精为0.6%。

乳清多肽螯合钙的制备与结构表征

以乳清蛋白为原料,用酶法水解制得乳清多肽,研究乳清多肽与Ca2+螯合反应的规律。以产物中Ca2+的含量和螯合率为指标,优化得到制备乳清多肽螯合钙的最佳工艺条件:乳清多肽与钙盐质量比为1∶5(g/g),多肽溶液初始pH为10.5,反应温度为65℃,反应时间为50min,所得产物Ca2+含量为10.5%±0.5%。采用紫外光谱、红外光谱、扫描电镜等手段,研究了乳清多肽螯合钙的结构,结果表明Ca2+和乳清多肽的羧基与氨基均发生了配位反应。

功能性乳清多肽的研制

研究了碱性蛋白酶和胰蛋白酶对乳清蛋白的水解作用。通过正交试验 ,得出各自的最优水解条件。结果表明 :碱性蛋白酶较适合底物乳清蛋白 ,水解乳清蛋白的最优组合为 :[E/S] =5%、T =6 0℃、pH =8 0 ,水解度 =2 1 6 %。多肽水解液在等电点附近溶解度为 90 % ,经灭菌处理后溶解度高达 94 %以上。

小黑豆乳清蛋白和水解多肽对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究小黑豆乳清蛋白(SBWP)和水解多肽(SBWPE)对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠肝脏损伤的保护作用。方法:分别将SBWP和SBWPE按照6g/(kg.d)和2g/(kg.d)加入到饲料中,饲喂小鼠30d。实验第30天,CCl4经胃给药(5mL/kg)建成急性肝损伤模型;实验结束后,处死动物,检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(AST)和肝脏丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、谷胱甘肽(GSH)。结果:与模型组相比,SBWP和SBWPE组动物的血清ALT活性和肝脏MDA、TG含量显著降低(P<0.01),肝中GSH含量显著升高(P<0.05),其中以SBWPE组效果最明显。结论:SBWP和SBWPE对CCl4引起的小鼠急性肝损伤有保护作用。

乳清蛋白抗氧化肽对H_2O_2所致人胚肺成纤维细胞MRC-5过氧化损伤的保护作用

【目的】探讨纯化后的乳清蛋白抗氧化肽P4对人胚肺成纤维细胞(human lung fibroblast)MRC-5过氧化损伤的保护作用及可能的作用机制。【方法】采用H2O2诱导建立细胞氧化损伤模型,应用四唑蓝快速比色法(MTT法)检测细胞存活率,通过检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,来确定P4对过氧化损伤MRC-5细胞的保护作用,并利用电镜观察细胞形态学变化。【结果】1mmol·L-1H2O2孵育24h可显著诱导MRC-5细胞损伤,使细胞存活力下降到22.47%,细胞经不同浓度的抗氧化肽P4(4、20、100μg·mL-1)与H2O2共孵育后,特别是100μg·mL-1(高剂量组)抗氧化肽P4可使细胞存活率达到44.77%。同时,提高乳清蛋白抗氧化肽P4的浓度,可促进受损的MRC-5细胞修复,提高了SOD、CAT、GSH-Px酶活性,降低MDA含量。扫描电镜和透射电镜观察结果也表明,一定浓度的乳清抗氧化肽对MRC-5细胞具有保护作用。【结论】乳清抗氧化肽通过拮抗H2O2而对MRC-5的过氧化损伤具有保护作用。