乳胶增强散射免疫比浊法测定血清巯基蛋白酶抑制肽C

目的：评价乳胶增强散强免疫比浊法实验性能、探讨其影响因素，并调查了年龄、性别对它的影响。方法：采用乳胶增强散射免疫比浊法测定血清Cystatin-C浓度。结果：该法精密度：批内和批间CV分别为1．09％和2．13％，回收率为98％。类风湿因子、胆红素、甘油三脂、血红蛋白对本方法无干扰。血清Cystatin-C浓度不受年龄、性别的影响。结论：乳胶增强散射免疫比浊法测定血清Cystatin-C是一个灵敏、可靠的方法。

颗粒增强免疫透射比浊测定血中Cyst C全自动分析法的建立与评价

目的:建立颗粒增强免疫透射比浊测定血中胱蛋白酶抑制剂C(Cyst C)全自动分析,评价该法常规用于检测血中胱蛋白酶抑制剂C的可行性。方法:将含有Cyst C血样本与乳胶颗粒增强的Cyst C多克隆兔抗体按一定体积比混合,在一定量的兔免疫球蛋白及表面活性剂存在条件下,抗原、抗体结合反应在一定温度、时间内产生一定大小的颗粒,许多颗粒在反应液体中形成一定的浊度,利用Olympus AU2700全自动生化分析仪透射比浊测定,并对方法的不精密度、准确度、干扰试验及与Dade Behring BN ProSpec免疫散射比浊测定方法比较等进行评价。结果:Cyst C浓度为1.03mg/L、5.67mg/L样本的批内不精密度CV分别为4.8%、1.9%。向Cyst C浓度为0.79mg/L、1.18mg/L、1.46mg/L、2.46mg/L样本中加入1.65mg/L的标准液测定回收率分别为100%、95%、85%、87%,平均回收率为92%。样本中的类风湿因子、胆红素、血红蛋白、三酰甘油等干扰物浓度分别达975U/ml、400μmol/L、5g/L、6.7mmol/L时对检测无显著性影响。Cyst C浓度在0.41mg/L^6.60mg/L范围内检测线性良好。血清、肝素抗凝血浆及EDTA抗凝血浆样本测得的Cyst C结果未发现显著性差异(F=0.065,P=0.938)。与Dade Behring BN ProSpec免疫散射比浊测定方法比较有良好的相关性,Y=0.98x-0.054,r=0.997,P<0.01,但两者存在非常显著性差异(P<0.01),本法结果较Dade Behring BN ProSpec免疫散射仪测定结果略低,两种方法的平均偏差为-0.0678mg/L。结论:建立的颗粒增强免疫透射比浊法测定血CystC重复性好、准确度高。血清、肝素抗凝血浆及EDTA抗凝血浆均可用于分析。测定不受类风湿因子(≥975U/ml),胆红素(≥400μmol/L),血红蛋白(≥5g/L)及三酰甘油(≥6.7mmol/L)的干扰。与Dade Behring BNProSpec免疫散射比浊测定方法测定结果比较有良好的相关性,适用于在全自动生化分析仪上作常规检测。

斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估

目的建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能。方法选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAADOT)以定量检测SAA。按照EP文件,评估SAA-DOT的分析性能(检测限、精密度、准确性、线性范围等)。结果SAA-DOT最低检测限为5 mg/L;10和100 mg/L的批内变异系数(CV)分别为9.07%和10.21%,天间CV分别为11.33%和11.53%;线性范围为5～230 mg/L;SAA-DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法(LERN)试剂具有良好的相关性(r=0.995,P<0.05)。表观健康者血清SAA浓度中位数为5.7 mg/L,95%可信区间为0～9.6 mg/L。结论基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速,能在5 min内完成检测,各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局(SFDA)对体外诊断试剂的要求,可用于临床患者血清标本的检测。

非浓缩晨尿微量蛋白检测在诊断早期肾损伤中的价值

目的探讨尿蛋白组分分析在肾损伤中的筛查、诊断价值。方法用乳粒增强免疫散射比浊法检测178例肾损伤患者非浓缩晨尿高、中、低分子尿蛋白水平,并与肾活检病理学结果比较。结果根据尿蛋白水平及变化特点归纳为肾小管性蛋白尿、白蛋白尿、选择性蛋白尿、混合性性蛋白尿4类型,每种升高的尿蛋白与健康对照组比较差异均有显著性(P<0.001),诊断肾损伤程度、性质、部位与病理诊断结果相符。结论非浓缩晨尿蛋白组分分析是评价肾脏功能、筛查或诊断肾脏疾病的敏感、可靠手段。

沧州地区PENIA法测定血清胱抑素C参考区间调查

目的探讨血清胱抑素C(Cys-C)的测定方法及健康人血清Cys-C的参考区间。方法采用颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA),对436例健康人进行血清Cys-C水平测定。结果健康人血清Cys-C水平为0.876mg/L,标准差0.101;批内变异系数1.21%,批间变异系数3.60%,回收率99.8%。血清Cys-C水平与年龄、性别无相关性。结论沧州地区健康人群血清Cys-C的参考区间为0.614～1.218mg/L,该法准确、灵敏、稳定、简便。

Logistic回归和ROC曲线综合评价检测四种尿蛋白排泄对早期肾小球疾病的诊断价值

目的:应用LogistIc回归和ROC曲线探讨尿白蛋白、α2-巨球蛋白、IgG、α1-微球蛋白4种蛋白排泄单独或联合检测对早期肾小球疾病的诊断价值。方法:收集肾小球疾病组患者22例,肾小管间质疾病组患者12例,非肾实质性疾病组患者20例,健康对照组35例,检测患者晨尿白蛋白、α2-巨球蛋白、IgG、α1-微球蛋白4种蛋白的排泄量。应用Logistic回归模型,绘制ROC曲线并计算曲线下面积(AUC)来评价各指标的诊断价值。结果:尿白蛋白和IgG的检测与肾小球疾病的诊断呈密切正相关(P<0.01;P<0.05),而α2-巨球蛋白、α1-微球蛋白的相关性不大(P>0.05);4种蛋白的联合检测诊断肾小球疾病的AUC为0.94,高于尿白蛋白和IgG的检测的AUC分别为0.861、0.856。结论:尿白蛋白和IgG的检测可作为肾小球疾病的诊断标志物,4种蛋白联合检测有较好的互补作用,可以显著提高诊断肾小球疾病的特异性。

两种测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C方法的结果比较

目的了解颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA)和颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)结果的相关性,为不同的方法学检测血清Cys C是否具有一致性提供参考依据。方法按照美国临床实验标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件进行评估,将测得的数据进行相关回归分析,计算2种方法间的偏倚。结果PENIA和PETIA测定Cys C的相关方程为YPETIA=1.352XPEN IA-0.009,相关系数(r)=0.976。结论这2种方法测定血清Cys C有良好的相关性。当实验室内同一项目存在2套以上分析系统检测时,应对其进行对比分析和偏倚评估,为室间评价结果提供参考依据。

PETIA法检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C方法学评价

目的对颗粒增强透射免疫比浊法（PETIA）测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）进行方法学评价。方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP5-A、EP6-A、EP9-A及EP7-P文件对PETIA测定血清Cys C的精密度、可报告范围、方法学比较及干扰实验进行评价和比较。结果PETIA的低水平样本批内变异系数（CV）为1.34%、批间CV为2.19%、日间CV为1.82%、总CV为2.56%;高水平样本批内CV为1.15%、批间CV为1.40%、日间CV为2.23%、总CV为2.58%。可报告范围为0.44-4.46 mg/L。PETIA与颗粒增强散射免疫比浊法（PENIA）呈显著相关[决定系数（r^2）=0.997 2,P〈0.01]。血红蛋白（Hb）〈5 g/L、三酰甘油（TG）〈12 mmol/L、总胆红素（TB il）〈150μmol/L时,PETIA测定Cys C高、低水平样本的干扰值均在干扰限度值（1.96s）范围内。结论PENIA具有良好的重复性,与PENIA有良好的相关性,抗干扰能力较强。因此PETIA是测定血清Cys C较理想的方法,可应用于临床检测。

两种方法检测超敏C反应蛋白诊断2型糖尿病患者颈动脉内中膜厚度的价值

目的探讨两种方法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)对2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内中膜厚度(IMT)增加的诊断价值。方法选择2013年4月至2015年4月我院收治的84例T2DM患者,以彩色多普勒超声诊断仪检查患者颈动脉的结果为标准,按IMT<0.9 mm和IMT≥0.9 mm分成颈动脉正常组40例和颈动脉增厚组44例。同期另选42例健康查体者为正常对照组,分别采用乳胶增强免疫散射比浊法和颗粒增强免疫透射比浊法检测所有受检者的全血hs-CRP和血清hs-CRP的水平,用受试者工作特征(ROC)曲线评价两种方法检测hs-CRP对T2DM患者IMT增加的诊断效能。另用总胆固醇(TC)联合全血hs-CRP检测评价对T2DM患者IMT增加的诊断效能。结果两种方法显示IMT增厚组的全血[(4.78±1.04)mg/L]和血清hs-CRP水平[(4.43±0.95)mg/L]均高于IMT正常组[(1.85±0.78)mg/L和(1.70±0.89)mg/L]和正常对照组[(0.98±0.67)mg/L和(0.87±0.59)mg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。用ROC曲线分析得全血hs-CRP的诊断灵敏度(76.2%)较高,而特异性(47.1%)较低,曲线下面积为0.612,而颗粒增强免疫透射比浊法检测血清hs-CRP的诊断灵敏度(69.0%)较低,特异性(52.9%)较高,曲线下面积为0.596;全血hs-CRP联合总胆固醇(TC)诊断的灵敏度(83.3%)和特异性(64.7%),曲线下面积为0.732,均高于hs-CRP单项指标诊断效能。结论 T2DM患者IMT增加时,血液中hs-CRP水平升高;乳胶增强免疫散射比浊法检测hs-CRP对T2DM患者IMT增加的诊断效能优于颗粒增强免疫透射比浊法;全血hs-CRP联合TC检测能提高对T2DM患者IMT增加的诊断灵敏度和特异性。

Cystatin C的检测及临床应用

Cystatin C(Cys C)是近年来研究发现的一种特异性高、准确性好、较肌酐清除率更为敏感的评价肾小球滤过率的新指标．Cys C能自由通过肾小球滤过膜，在近曲小管几乎被完全重吸收，然后完全分解代谢，不再重新回到血液循环中去，同时肾小管也不分泌，所以在血液中的浓度较为恒定，成为反映肾小球滤过率的灵敏指标．常用颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)和颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA)检测Cys C，操作简单、速度快，在儿科疾病、糖尿病、心血管疾病、肿瘤化疗及肾移植后评估肾小球滤过率等方面具有很高的临床价值．

两种CRP检测方法的灵敏度比较

目的比较速率散射免疫比浊法和乳胶增强透射免疫比浊法检测CRP结果的灵敏度。方法收集我院正常健康体检者100例,分别采用两种检测方法分析CRP浓度。结果速率散射免疫比浊法和乳胶增强透射免疫比浊法的分析下限分别是0.1mg/L和0.5mg/L。速率散射免疫比浊法测得50岁以下组CRP值<1mg/L占42%,用乳胶增强透射免疫比浊法检测的该组CRP值均>1mg/L,速率散射免疫比浊法测得50岁以上组CRP值<1mg/L占26%,用乳胶增强透射免疫比浊法检测的该组CRP值均>1mg/L。结论乳胶增强透射免疫比浊法测定的正常健康人群的CRP值偏高(P<0.05),其灵敏度较速率散射免疫比浊法低。

宝鸡地区成年健康人群血清胱抑素C参考区间调查

目的：建立宝鸡地区成人血清胱抑素C（Cys-C）的参考区间。方法对健康成人男性720例、女性722例采集静脉血标本，采用颗粒增强散射免疫比浊法测定其血清 Cys-C的浓度。结果宝鸡地区健康成年人 Cys-C水平男性高于女性（t＝11.625，P＜0.05）。男性、女性 Cys-C 水平均随年龄升高而增高（男：F＝48.908，P＜0.05；女：F＝59.801，P＜0.05）。该地区健康人群血清Cys-C的参考区间男性：44岁以下为0.56～0.98 mg／L，45～59岁为0.59～1.08 mg／L，60～74岁为0.69～1.24 mg／L，75岁以上为0.72～1.28 mg／L；女性：44岁以下为0.52～0.98 mg／L，45～59岁为0.56～0.99 mg／L，60～74岁为0.59～1.12 mg／L，75岁以上为0.69～1.22 mg／L。结论健康人群血清Cys-C浓度存在着年龄和性别差异，应建立自己实验室健康人群血清Cys-C的参考范围。

急性肾损伤不同肌酐清除率测定、胱抑素C对连续肾替代治疗上机时机评估作用

目的:探讨急性肾损伤(AKI)危重患者由传统内生肌酐清除率(CCr)测定和经Cockcroft-Gault公式血肌酐估测内生肌酐清除率(ECCr)的相关性,及对连续肾替代治疗(CRRT)开始时机评估作用。方法:急性肾损伤20例,APACHE II评分15.6±7.3分;入科时即留置尿管,导尿后弃去之前尿液,尿管置入后留取24h尿液,混匀后取5mL送检并计总量。入科后及次日采外周血3mL两份送检血清肌酐(SCr)、胱抑素C(Cys-C)。结果:全组血清肌酐(0h)189.6±37.5μmmol/L、(24h)258.4±43.6μmmol/L,CCr24.1±4.8 mL/min、ECCr(0h)32.2±6.4 mL/min、(24h)28.6±7.4 mL/min。且按性别分组后与全组病例结果相比差异无统计学意义。全组:ECCr(0h)与传统CCr相比ICC为0.7246,但CCr与ECCr(24h)间ICC为0.8731。其中男性:ECCr(0h)与传统CCr相比ICC为0.6941,但是CCr与ECCr(24h)间ICC为0.9032;女性ECCr(0h)与传统CCr相比ICC为0.7124,但CCr与ECCr(24h)间ICC仅为0.9106。各时点Cys-C与SCr呈明显线性正相关。结论:本研究结果显示CCr与ECCr(24h)间具有较好的一致性,经性别校正后其值与性别不相关;而且ECCr方法简便易行,有助于初步评测施行CRRT干预时机。

兰州地区不同人群胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平研究

目的 建立兰州地区不同人群胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatinc）的正常参考值，使其应用于临床治疗。方法随机收集无肾脏病史及其他慢性病史的1250名住院患者或健康体检者的血清标本，按其来源人群的年龄段进行分组，用颗粒增强散射免疫比浊法检测CystatinC浓度，根据统计学总体均数的置信区间t分布（95％置信区间）方法分析结果。结果5个月以内儿童组Cystatinc的正常参考值为0．80～2．30ms／L；5个月-13岁儿童组的正常参考值为0．50—1．10mg／L；14—59岁男性成人组的正常参考值为0．52-0．87ms／L；14～59岁女性成人组的正常参考值为0．43—0．72mg／L；60岁及以上老年人组的正常参考值为0．65～1．73mg／L。结论正常儿童出生后到5个月内Cystatinc含量明显高于5个月以上小儿，随着肾小球滤过功能的成熟。1岁左右接近成人水平；60岁以下的成年人，女性的CystatinC水平比男性略低，并且女性不受经期、避孕药、激素及酒精摄入等因素影响；60岁及以上的老年人可能由于生理因素对肾功能的影响，血清中CystatinC含量高于14—59岁男、女性成人组。

应用CLSI评价方案分析超敏C-反应蛋白不同测定方法的结果偏倚

目的分析超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)不同测定方法的结果偏倚。方法依据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)批准的EP9-A文件,3种实验方法分别与比较方法组成3个比对组,对每组比对数据作散点图、偏倚图,计算线性方程和相关系数,进行偏倚评估。结果各比对组中,每2种方法均相关良好(r2=0.991 8、0.986 8、0.996 7);在Hs-CRP为3 mg/L时,预期相对偏倚分别为6.4%、32.3%、24.4%。结论检测Hs-CRP时,免疫增强透射比浊法不同试剂结果基本相符;免疫增强透射比浊法与免疫增强散射比浊法结果偏倚较大;独立检测Hs-CRP浓度的方法与同时检测Hs-CRP及CRP浓度的方法相比,前者可减少Hs-CRP检测结果的偏差。