肝靶向配体半乳糖基白蛋白和多聚谷氨酸

化学合成两类去唾液酸糖蛋白受体（ＡＳＧＰＲ）的人工配体———半乳糖基白蛋白（ＧａｌｎＨＳＡ）和半乳糖基多聚Ｌ谷氨酸（ＧａｌｎＰＬＧＡ），并以１２５Ｉ标记的去唾液酸胎球蛋白（ＡＳＦ）为标准配体，测定了合成配体抑制１２５ＩＡＳＦ与大鼠肝细胞膜ＡＳＧＰＲ结合的ＩＣ５０值．结果表明，Ｇａｌ１２ＨＳＡ、Ｇａｌ１５ＨＳＡ、Ｇａｌ２６ＨＳＡ、Ｇａｌ３０ＨＳＡ和Ｇａｌ３４ＰＬＧＡ均能够有效地抑制１２５ＩＡＳＦ与ＡＳＧＰＲ的结合，且前者与ＡＳＧＰＲ的亲和力随半乳糖基化程度的增加而增加．这些合成配体来源丰富、制备简单，适合于作为药物或基因肝靶向运送的导向配体．

半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备及性质评价

目的制备具有半乳糖基和稳定磁性的半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒,并对半乳糖白蛋白磁性纳米粒的糖化比率、磁性及药物含量进行检测。方法将乳糖和白蛋白用还原胺法合成半乳糖基人血白蛋白(galactosylated human serum albumin,Gal-HSA);采用滴定水解法制备直径在70nm左右Fe3O4磁性纳米粒。再将半乳糖白蛋白、Fe3O4磁性纳米粒及纯盐酸阿霉素按一定的比率混合,通过在精制棉子油中超声乳化、加热固化变性、乙醚洗涤等工艺制备出半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒;用苯酚-硫酸比色法测定半乳糖白蛋白的糖化比率;用乙醇提取法提取半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中的阿霉素,并用液相色谱仪测定其含量。将纳米粒溶于生理盐水中,并在光学显微镜下观察在磁场的作用下,半乳糖基磁性纳米粒的运动情况,用激光粒度分析仪、原子力显微镜和透射电子显微镜观察纳米粒粒径的大小和内部结构。结果半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的糖化比率为32;Fe3O4纳米粒径在(70±30)nm左右,粒径均匀;阿霉素的含量为58.45μg/g,阿霉素的包含率为97.53%;半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒溶液在光学显微镜下观察,在磁场的作用下,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集,当磁铁与纳米粒的距离加大时,纳米粒运动速度减慢,并沿磁力线的方向成串珠状聚集。透射电子显微镜下观察Fe3O4颗粒均匀分布在半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中。结论半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒具有较高糖化比率、稳定的磁性、靶向性强、药物包含率高以及释药速率可控制等特点,为靶向药物治疗,提供了可靠的载药工具。

Gal-BSA-SPIO制备及兔VX2肝癌模型与人肝脏ASG受体的MRI研究

目的尝试合成肝脏靶向对比剂乳糖基白蛋白超顺磁氧化铁(Gal-BSA-SPIO),探讨Gal-BSA-SPIO对肝癌的检出及其诊断价值。材料和方法采用还原胺法合成Gal-BSA。Gal-BSA与SPIO混合后超声振荡。建立20只兔的VX2肝癌模型,随机分为SPIO组和Gal-BSA-SPIO组,行MR平扫及增强。测定肝脏及肿瘤的T2值。对13例人肝脏标本(肝癌6例、肝硬化4例、正常肝组织3例)Gal-BSA-SPIO孵育后,Perl's染色,观察去唾液酸糖蛋白(ASG)受体分布。统计学方法:对增强前后各组的T2值进行t检验。结果Gal-BSA-SPIO平均粒径34.4nm。20只兔VX2肿瘤直径3～12mm,T1WI肝实质呈中等信号,肿瘤呈低信号,T2WI肝实质低信号,病灶为略高信号;GRET2*WI肝实质中等信号,肿瘤略高信号。增强扫描,SPIO组T2WI肝实质信号轻中度下降,与肿瘤对比提高;Gal-BSA-SPIO组T2WI肝实质信号显著下降,肿瘤呈明亮的"灯泡征"。正常肝脏的SPIO组和Gal-BSA-SPIO组增强后T2值明显下降,与增强前有显著性差异。肿瘤的SPIO组和Gal-BSA-SPIO组增强后T2值无明显下降,与增强前无显著性差异。组织学检查SPIO组,Kupffer细胞内见蓝染的铁颗粒;Gal-BSA-SPIO组,肝细胞内见较多的蓝染的铁颗粒,两组的肿瘤内未见蓝染的铁颗粒。Gal-BSA-SPIO孵育后,正常肝组织可见大量蓝染色,肝硬化及癌旁肝硬化组织均可见蓝染色;肝细胞癌罕见蓝染色。结论Gal-BSA-SPIO可以与肝细胞膜的ASG受体可特异性结合,通过受体介导的特异性对肝脏产生负向增强作用,明显提高肿瘤对比噪声比。