人初乳与牛初乳中乳脂肪球膜蛋白质组成的对比研究

通过十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDSPAGE)将人初乳与牛初乳中乳脂肪球膜蛋白进行分离并结合液一质联用技术鉴定,在人初乳乳脂肪球膜蛋白中鉴定出1 076种蛋白质,牛初乳乳脂肪球膜蛋白中鉴定出682种蛋白质,其中人初乳中有757种特异性表达蛋白质,牛初乳中有363种特异性表达蛋白质,两者有319种相同表达蛋白质。通过基因本体(gene ontolpgy,GO)功能注释分析发现,人初乳乳脂肪球膜蛋白在生物过程中发挥的作用高于牛初乳,尤其表现在细胞组成组织功能上;在分子功能上,人初乳乳脂肪球膜蛋白主要体现在结合作用方面;在细胞组成上,与牛初乳乳脂肪球膜蛋白相比人初乳乳脂肪球膜参与的细胞组成均较多,其中在细胞胞内区的组成上参与最多。通过京都基因与基因组百科全书系统(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢通路分析可知,人初乳乳脂肪球膜蛋白中有15种蛋白参与了与消化吸收相关的KEGG通路-酶酵解。

基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道离子阱质谱的羊乳脂肪球膜全蛋白谱泌乳期时序差异研究

该文利用高通量质谱结合非标记蛋白质定量技术对不同泌乳期羊乳的乳脂肪球膜蛋白质(MFGM)进行鉴定,在羊初乳和羊常乳中分别定量到331和252种乳脂肪球膜蛋白质,其中164种蛋白质在两组乳样中共同表达。对所鉴定脂肪球膜蛋白质进行单变量及多变量分析,建立偏最小二乘判别分析模型,分别以2、0.05和1.2为倍数变化、显著性差异及变量投影重要性分析值的阈值,筛选羊初乳和羊常乳中的差异性标志物。经生物信息学分析发现,鉴定的蛋白质标志物主要参与炎症过程、整合素信号通路及半乳糖代谢过程。研究结果对提高对羊乳蛋白质的深入认识与羊乳及其制品的营养改良具有重要意义。

乳脂肪球膜制备方法及其乳化特性的研究进展

乳脂肪球膜是包裹在乳脂肪球外层的复杂三层膜结构,主要成分为蛋白质和脂质。近年来研究表明乳脂肪球膜具有亲水亲油性,能有效地阻止乳脂肪球之间的聚集,是一种性能良好的天然乳化剂。该文主要介绍了工业规模制备乳脂肪球膜原料来源、制备方法和影响条件及乳脂肪球膜良好的乳化特性,并对其潜在工业应用进行了详细综述,旨在为乳脂肪球膜的进一步综合利用提供参考。

评价与改良牛乳品质的研究最终报告

该研究利用蛋白质组学的方法对中国荷斯坦奶牛、美国荷斯坦奶牛、娟姗牛和中国水牛的牛奶蛋白质进行了定性及定量的研究,其中包括初乳和常乳的牛奶乳清蛋白质及乳脂肪球膜蛋白质进行了细致的研究,建立牛乳清蛋白差异表达谱、乳脂肪球膜差异蛋白质表达谱,挖掘与乳品质改良相关的功能性蛋白,揭示不同奶牛品种乳蛋白质合成、分泌信号传导通路的差异,为牛乳品质的改良提供素材,同时通过牛乳蛋白质组技术平台和牛乳蛋白质数据库的建立,进行转基因牛奶蛋白质表达差异的食品安全研究。在4种牛乳初乳和常乳的乳清及乳脂肪球膜蛋白质中,利用高效液相色谱和质谱联用的方法,鉴定出1148种蛋白质;将娟珊牛与水牛中表达的全部蛋白质分别与荷斯坦牛进行比较,在水牛中特异表达的蛋白质有132种,在娟珊牛中特异表达的蛋白质有131种。对这些特异表达的蛋白质结合4种牛泌乳特性和牛奶的特性进行分析,发现了大量与乳脂肪合成分泌相关的蛋白质。采用同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)定量蛋白质组学质谱技术对这些蛋白质进行表达量的检测。对中国荷斯坦牛、美国荷斯坦牛、娟珊牛和水牛中初乳乳清和常乳乳清中168种具有定量结果的蛋白进行聚类及主成分分析,并根据聚类及主成分分析比较美国荷斯坦牛、娟珊牛及水牛与中国荷斯坦牛蛋白表达差异之间的相关性。在乳脂肪球膜蛋白质i TRAQ实验中,在8种乳脂肪球膜蛋白质样品中共有710种蛋白质具有定量的结果。我们以中国荷斯坦牛牛乳蛋白质相对表达量为本底,其他3种牛奶蛋白质相对含量与其比较。通过对差异表达蛋白的鉴定与功能分析我们找到了多个与脂代谢与炎症反应及其他疾病相关的蛋白,这些蛋白可以作为候选基因转入牛乳中,提高牛奶品质或增强奶牛抗病性,从而能够形成高品质牛奶生产种群。经建立了从样品收集、前期处理、高效液相色谱与质谱联用(LC-MS/MS)分析到后期样品质谱数据的分析处理等一整套全面系统的对乳制品进行蛋白质组学分析的流程。通过已经建立的乳蛋白质组学技术平台,我们还完成了对一种克隆牛奶、3种转基因克隆牛奶的乳清蛋白质表达谱的分析,为转基因牛乳食品安全评价提供了科学数据,也为转基因生物安全评价提供了技术分析手段。