乳腺癌并发抑郁症模型小鼠血液及组织中白介素类细胞因子含量的变化

目的:观察乳腺癌并发抑郁症(BCRD)模型小鼠行为、白介素类细胞因子的变化。方法:BALB/c雌性小鼠,腋下接种1×106个4T1炎症乳腺癌细胞,7 d后观察是否成模,成模后的小鼠连续21 d背部皮下注射皮质酮(30 mg/kg)复制BCRD模型。所有小鼠按糖水消耗随机分为4组:乳腺癌组、抑郁症组、BCRD组、空白对照组。21 d后,测定各组小鼠糖水偏嗜度、旷场实验等行为学变化;采用悬液芯片技术检测血清、海马、肿瘤、皮质组织中IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12含量。结果:与空白组比较,BCRD小鼠蔗糖偏嗜度及垂直活动次数降低(P<0.01或P<0.05),血清、海马中IL-2、IL-6、IL-12含量显著升高(P<0.01或P<0.05),海马中IL-10含量显著增加(P<0.01或P<0.05);与乳腺癌组比较,BCRD组血清、海马、皮质中IL-6含量显著升高(P<0.05),与抑郁症组比较,血清、海马、皮质中IL-6含量差异无统计学意义(P>0.05),但均有升高趋势。结论:IL-6在血清、海马、皮质中表达均较高且均一,可能是BCRD的重要标志物。

基于IL-6/gp130信号研究逍遥抗癌解郁方调节乳腺癌并发抑郁症模型小鼠肿瘤、海马组织免疫的机制

目的 观察逍遥抗癌解郁方(Xiaoyao Kang’ai Jiyu Formula,XYKAJY)对乳腺癌并发抑郁症(breast cancer related depression, BCRD)模型小鼠肿瘤、海马组织免疫的影响。方法 BALB/c雌性小鼠腋下接种1×106个/m L 4T1炎性乳腺癌细胞,7d后观察成瘤情况,将所有成瘤小鼠根据糖水偏好随机分为5组:模型组、紫杉醇合氟西汀组、逍遥抗癌解郁高剂量组、逍遥抗癌解郁低剂量组,并连续21 d背部皮下注射皮质酮(30 mg/kg)以复制BCRD模型,另设空白组。通过旷场、强迫游泳实验检测各组小鼠行为学变化;采用悬液芯片技术检测小鼠血清、海马、肿瘤、前额皮质中白细胞介素(interleukin, IL)-6的含量;采用免疫组化和Western blot法检测肿瘤、海马中白细胞介素6受体(interleukin 6 receptor, IL-6R)、糖蛋白130(glycoprotein 130, gp130)的蛋白表达。结果 与空白组比较,BCRD小鼠的水平及垂直活动次数降低(P<0.01),强迫游泳不动时间延长(P<0.01);血清、肿瘤、海马、前额皮质中IL-6的含量均显著升高(P<0.01,P<0.05);海马组织中IL-6R、gp130表达均显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,逍遥抗癌解郁高剂量能显著增加模型小鼠的水平及垂直活动次数(P<0.01,P<0.05),缩短游泳不动时间(P<0.01),降低血清、海马、前额皮质、乳腺肿瘤中IL-6含量(P<0.01或P<0.05),并有效降低肿瘤、海马组织中IL-6R、gp130表达(P<0.01,P<0.05)。结论 XYKAJY具有良好的抗癌解郁功效,其机制可能与IL-6/gp130信号异常紧密相关。

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症模型小鼠抑郁样指征的影响

目的观察逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症模型小鼠的影响,探讨其作用机制。方法以BALB/c雌性小鼠为研究对象,采用腋下注射4T1炎性乳腺癌细胞联合腹腔注射皮质酮(CORT)建立乳腺癌并发抑郁症模型小鼠。根据糖水消耗量随机分为空白组、模型组、紫杉醇组、逍遥抗癌解郁方组、化疗+氟西汀组、化疗+逍遥抗癌解郁方组,分别给予相应药物21 d后,采用糖水偏好实验、Open-field实验和新奇摄食实验检测小鼠行为学变化;ELISA检测小鼠血浆促肾上腺激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、CORT,血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE),肿瘤标志物糖类抗原CA153、CA125和癌胚抗原(CEA)的含量。结果与空白组比较,模型组小鼠糖水偏好度、水平与垂直运动明显降低(P<0.01,P<0.05),摄食潜伏期明显增加(P<0.01,P<0.05),肿瘤标志物CA153、CA125和CEA含量及下丘脑-垂体-肾上腺轴相关指标显著升高(P<0.01);单胺神经递质NE、DA和5-HT明显下降(P<0.01);与模型组比较,化疗+逍遥抗癌解郁方组小鼠糖水消耗量显著升高,自主行为活动增加,行为绝望状态改善(P<0.01,P<0.05);肿瘤标物及HPA轴相关指标含量明显降低(P<0.01,P<0.05);5-HT、DA和NE含量明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论逍遥抗癌解郁方联合紫杉醇可有效缓解乳腺癌并发抑郁症的抑郁样指征。

4T1炎性乳腺癌细胞接种联合皮质酮注射诱导乳腺癌并发抑郁症小鼠模型的研究

目的研究4T1炎性乳腺癌细胞接种联合皮质酮注射所致BABL/c小鼠病理行为和核心标志物的变化。方法采用4T1炎性乳腺癌细胞接种的方法建立乳腺癌小鼠模型,并随机分为2组,乳腺癌组和乳腺癌皮质酮组;另将未接种乳腺癌细胞的小鼠也随机分为2组,正常对照组和抑郁症组。随后给予抑郁症组和乳腺癌皮质酮组21 d皮质酮注射(30 mg/kg)。实验结束后,采用糖水消耗实验、旷场实验、新奇摄食实验观察各组小鼠的抑郁样行为。小鼠断头处死后,测量各组小鼠乳腺肿瘤瘤重和瘤体积,采用ELISA法检测小鼠肿瘤标志物肿瘤抗原CA153、糖类抗原CA125、癌胚抗原(CEA)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的含量。结果乳腺癌皮质酮组小鼠瘤重和瘤体积明显增大,血浆CA153、CA125和CEA水平显著升高,糖水偏嗜度明显降低,对环境的好奇探索欲望减弱,体内5-HT、DA、NE含量显著降低。结论乳腺癌小鼠在接受慢性皮质酮注射后,可表现出明显的抑郁样行为、神经递质和乳腺癌标志物以及肿瘤瘤体变化,可为乳腺癌并发抑郁症动物实验提供模型参考。

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症小鼠海马神经元突触后致密蛋白95表达的影响

目的观察逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症(BCRD)小鼠海马神经元突触后致密蛋白95(PSD95)的影响,探讨其对海马组织的可能保护机制。方法腋下注射4T1炎性乳腺癌细胞联合背部皮下注射皮质酮建立BCRD小鼠模型。随机分为模型组、紫杉醇组、紫杉醇+氟西汀组、逍遥抗癌解郁方组、紫杉醇+逍遥抗癌解郁方组,另取未造模BALB/c小鼠作为正常组。采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,HE染色观察小鼠海马和乳腺肿瘤病理变化,免疫组化染色和Western blot检测小鼠海马PSD95的表达。结果与正常组比较,模型组小鼠悬尾实验、强迫游泳实验不动时间显著增加(P<0.01),海马结构损伤明显,PSD95表达水平显著降低(P<0.01);给予逍遥抗癌解郁方干预后,模型小鼠悬尾实验、强迫游泳实验不动时间明显减少(P<0.05),海马结构损伤得以恢复,PSD95表达显著升高(P<0.01),联合紫杉醇出现肿瘤细胞大面积坏死。结论逍遥抗癌解郁方可改善BCRD小鼠抑郁症状,有效辅助化疗药物抑制乳腺肿瘤增殖,并通过上调突触可塑性相关蛋白PSD95的表达,保护海马组织。

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症小鼠海马CRHR1、GR、BDNF mRNA表达的影响

目的研究复方中药逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症(breast cancer related depression,BCRD)小鼠海马促肾上腺皮质激素释放激素受体1(corticotropin releasing hormone receptor 1,CRHR1)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA的调控作用,阐明其对海马组织的可能保护机制。方法通过腋下注射4T1炎性乳腺癌细胞联合背部皮下注射皮质酮建立BCRD小鼠模型并随机分为模型组、紫杉醇组、紫杉醇+氟西汀组、逍遥抗癌解郁方组、紫杉醇+逍遥抗癌解郁方组,同时设正常组。采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,HE染色观察小鼠海马的病理结构变化,实时荧光定量PCR检测CRHR1、GR、BDNF mRNA的表达。结果与正常组相比,模型组小鼠悬尾实验、强迫游泳实验中不动时间显著增加(P<0.01),海马结构损伤明显,GR、BDNF mRNA表达显著下降(P<0.01),CRHR1 mRNA表达显著上升(P<0.01);给予逍遥抗癌解郁方干预后,模型小鼠悬尾实验、强迫游泳实验中不动时间下降(P<0.05),海马结构损伤得以恢复,GR、BDNF mRNA表达显著上升(P<0.01)、CRHR1 mRNA表达显著下降(P<0.01)。结论逍遥抗癌解郁方可以改善BCRD小鼠的抑郁症状,保护海马组织,其作用机制与上调GR、BDNF和下调CRHR1的mRNA表达有关。

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症小鼠海马NMDAR相关蛋白表达的影响

目的:研究逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁小鼠海马中N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)相关蛋白表达的影响。方法:构建乳腺癌并发抑郁症模型,设立空白组、模型组、紫杉醇组、逍遥抗癌解郁方组、紫杉醇联合氟西汀组和紫杉醇联合逍遥抗癌解郁方组。悬尾实验和强迫游泳实验检测各组小鼠抑郁样行为,免疫组化和实时荧光定量PCR检测小鼠海马NR2A,NR2B及cAMP结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)与钙调蛋白激酶Ⅱ(calmodulin kinaseⅡ,CaMKⅡ)蛋白和mRNA的表达以及NR2A,NR2B在肿瘤组织中的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组小鼠不动时间显著上升(P <0. 01或P <0. 05),海马中NR2A,NR2B,CaMKⅡ表达显著上升(P <0. 01),CREB表达显著下降(P <0. 01)。给予逍遥抗癌解郁方干预后小鼠不动时间显著下降(P <0. 01或P <0. 05),海马中NR2A,NR2B及CaMKⅡ表达显著降低(P <0. 01),CREB表达明显升高(P <0. 01)。与模型组相比,逍遥抗癌解郁方组小鼠肿瘤中NR2A,NR2B mRNA表达显著降低,肿瘤瘤重与瘤体积也显著减小(P <0. 01或P <0. 05)。结论:逍遥抗癌解郁方能明显改善乳腺癌并发抑郁小鼠抑郁样行为,在一定程度上抑制乳腺癌肿瘤生长,其作用机制与调节NMDAR相关蛋白表达及增强海马突触可塑性有关。

HPA轴紊乱致海马损伤与乳腺癌并发抑郁症相关性研究

目的探讨HPA轴紊乱致海马损伤与乳腺癌并发抑郁症(BCRD)的相关性。方法将BALB/c雌性小鼠分为4组:对照组、乳腺癌组(腋下1次性接种0.1 mL的107/mL 4T1炎性乳腺癌细胞)、抑郁症组(背部sc皮质酮混悬液30 mg/kg,每天1次,连续21 d)和BCRD(先进行乳腺癌造模后进行抑郁症造模)组,每组10只。每周1次糖水偏好测试;连续注射皮质酮21 d后,进行旷场、悬尾行为学实验;杀鼠取材,HE染色观察各组大鼠海马、肾上腺和肿瘤的病理改变;Elisa法检测血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮含量。结果与对照组比较,BCRD组小鼠糖水消耗明显降低(P<0.01),第3周与乳腺癌组比较显著下降(P<0.05)。与对照组、抑郁症组、乳腺癌组比较,BCRD组小鼠旷场实验中水平运动与垂直运动显著减少(P<0.05),悬尾实验中不动时间显著上升(P<0.01)。HE染色结果显示,与对照组比较,BCRD组小鼠海马、肾上腺出现明显病理改变,乳腺肿瘤细胞异常增生。与对照组比较,BCRD组血浆HPA轴相关指标皮质酮、ACTH和CRH含量显著升高(P<0.01、0.05);与抑郁症组比较,BCRD组皮质酮、ACTH和CRH明显升高(P<0.05、0.01);与乳腺癌组比较,BCRD组皮质酮、ACTH明显升高(P<0.05)。结论 BCRD小鼠存在快感缺乏、自主行为下降和绝望行为,并且海马和肾上腺存在明显损伤,HPA轴紊乱。

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症小鼠海马保护作用的机制研究

目的研究逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症(BCRD)小鼠海马突触可塑性和神经营养的影响。方法以BALB/c雄性小鼠为研究对象,采用4T1细胞腋下接种联合皮质酮背部注射建立乳腺癌并发抑郁症模型,并随机分为5组,BCRD组、紫杉醇组(20 mg/kg)、氟西汀组(19.5 mg/kg)、紫杉醇联合氟西汀药组(20 mg/kg+19.5mg/kg)、逍遥抗癌解郁方组(26.5 g/kg),每组10只;另选10只正常小鼠作为空白组。造模给药21d后,采用糖水消耗实验检测动物的抑郁样行为变化,采用免疫组化检测海马组织中突触可塑性标志蛋白突触素(SYN)、突触后致密蛋白95(PSD95)的蛋白表达水平,采用蛋白质印迹法检测海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)蛋白表达变化。结果与空白组比较,模型组小鼠的糖水消耗率明显降低(P﹤0.05),存在明显的抑郁样行为,海马组织中SYN、PSD-95蛋白表达下降(P<0.01或P<0.05),突触可塑性受损,BDNF、CREB蛋白表达下降(P<0.01或P<0.05),且PI3K/Akt蛋白表达下降(P<0.01);逍遥抗癌解郁方可提高BCRD小鼠的糖水消耗率(P﹤0.05),改善其抑郁样行为;增加SYN、PSD-95、BDNF、CREB蛋白表达水平(P﹤0.05),修复突触可塑性损伤和神经营养丢失状态,同时还能促进PI3K/Akt信号(P<0.05)。结论逍遥抗癌解郁方可能通过有效调控PI3K/Akt信号,提升神经营养供应,进而促进海马突触可塑性修复,从而改善BCRD小鼠的抑郁样行为。

逍遥抗癌解郁方通过调控COX通路对乳腺癌并发抑郁模型小鼠的治疗作用及机制研究

研究逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁模型小鼠海马小胶质细胞和神经元损伤的干预作用及其机制。采用腋下接种4T1乳腺癌细胞联合皮下注射皮质酮(30 mg·kg^(-1))的方法构建乳腺癌并发抑郁小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性药组[卡培他滨(60 mg·kg^(-1))+氟西汀(19.5 mg·kg^(-1))],逍遥抗癌解郁方组(19.5 g·kg^(-1)),每组6只,另取6只正常小鼠作为正常组。各给药组灌胃相应药物,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每日1次,连续给药21 d。采用糖水消耗实验、旷场实验和新奇摄食实验评价小鼠抑郁行为;苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色和抑瘤率评价腋下肿瘤变化情况;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测小鼠海马白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、环氧酶-2(cyclooxyganese-2,COX-2)、前列腺素受体(glutamyl-prolyl-tRNA synthetase,EPRs)mRNA表达;免疫组化检测海马IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs蛋白的相对表达量,免疫荧光检测海马小胶质细胞活化标志分子CD11b的平均荧光强度;尼氏染色观察海马神经元形态变化;透射电镜观察海马神经元的超微形态变化。结果显示,与正常组比较,模型组小鼠糖水消耗、矿场总活动数均显著降低(P<0.05,P<0.01),新奇摄食实验首次摄食时间显著上升(P<0.01),抑郁样行为显著;海马中IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs表达显著升高(P<0.05,P<0.01),海马小胶质细胞活化,神经元明显损伤。与模型组相比,阳性药和逍遥抗癌解郁方给药后小鼠抑郁行为均明显改善;海马IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs含量均明显降低,海马小胶质细胞激活和神经元损伤情况得以缓解;阳性药抑瘤率为40.32%,逍遥抗癌解郁方抑瘤率为48.83%,肿瘤生长速度都慢于模型组。综上所述,逍遥抗癌解郁方可能通过COX信号通路的激活改善乳腺癌并发抑郁症模型小鼠海马小胶质细胞激活和神经元损伤。