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维生素E琥珀酸酯诱导MDA-MB-435乳腺癌细胞的凋亡 被引量:5
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作者 张伟 徐昕昀 +3 位作者 张军初 朱大乔 张玲珍 王强 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期318-321,共4页
目的:检测维生素E琥珀酸酯(vitaminEsuccinate,VES)对MDAMB435乳腺癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用并分析凋亡诱导分子Fas表达的变化。方法:以VES刺激人乳腺癌细胞MDAMB435(雌激素受体阴性)12、24和48h,VES浓度为5、10和20μg/mL,以MTT法... 目的:检测维生素E琥珀酸酯(vitaminEsuccinate,VES)对MDAMB435乳腺癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用并分析凋亡诱导分子Fas表达的变化。方法:以VES刺激人乳腺癌细胞MDAMB435(雌激素受体阴性)12、24和48h,VES浓度为5、10和20μg/mL,以MTT法测定对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面Fas表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数变化,Westernblot法检测VES作用后Fas蛋白水平变化。结果:VES对MDAMB435乳腺癌细胞增殖具有显著的抑制作用并表现为时间和剂量依赖关系。流式细胞仪分析细胞凋亡,MDAMB435细胞的自然凋亡率为1.5%,5、10和20μg/mLVES分别作用48h后凋亡率升高至13.1%、20.2%和46.5%。TUNEL法检测VES作用后乳腺癌细胞凋亡指数由1.1±0.4升高至10.8±1.0、30.4±2.7和51.4±4.7,细胞Fas蛋白水平分别升高1.3、1.9和4.3倍,细胞表面Fas平均荧光强度由46.29升高至59.66、84.54和103.41。结论:VES对MDAMB435乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用,并诱导细胞的凋亡,其机制与细胞表面Fas表达上调有关。 展开更多
关键词 维生素E 琥珀酸酯 乳腺肿瘤 细胞凋亡 Fas蛋白质 mda-mb-435细胞
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粉防己碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S的作用 被引量:4
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作者 李桃花 裴晓华 《世界中西医结合杂志》 2015年第7期934-936,958,共4页
目的探讨粉防己碱(Tet)对雌激素受体(ER)阴性人乳腺癌MDA-MB-435S细胞的作用。方法 MTT方法检测Tet对MDA-MB-435S细胞体外生长的影响。用碘化丙啶单染流式细胞术测定法检测Tet对MDA-MB-435S细胞周期的影响。结果 Tet对MDA-MB-435S细胞... 目的探讨粉防己碱(Tet)对雌激素受体(ER)阴性人乳腺癌MDA-MB-435S细胞的作用。方法 MTT方法检测Tet对MDA-MB-435S细胞体外生长的影响。用碘化丙啶单染流式细胞术测定法检测Tet对MDA-MB-435S细胞周期的影响。结果 Tet对MDA-MB-435S细胞生长的抑制作用随着Tet浓度的增加、时间的延长而增大,Tet剂量与时间之间存在交互作用(P<0.01)。Tet作用于MDA-MB-435S细胞24 h后,G0/G1期细胞比例均显著增多,随Tet浓度增加,G0/G1期细胞比例增多;S期、G2M期细胞比例均明显降低,并且随Tet浓度增加,S期、G2M期细胞比例降低。结论 Tet对雌激素受体阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-435S增殖有明显抑制作用,且存在浓度和时间依赖性。Tet阻滞MDA-MB-435S细胞于G0/G1期,降低S期比例,抑制DNA合成是其抑制乳腺癌细胞生长的机制之一。 展开更多
关键词 粉防己碱 乳腺 周期 mda-mb-435S
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下调TSG101对乳腺癌细胞系MDA-MB-435S的影响
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作者 张莹 李春艳 +2 位作者 张四洋 崔泽实 宋敏 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第7期1519-1522,共4页
目的:研究肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的下调对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S细胞的影响。方法:应用脂质体法将靶向TSG101的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染入乳腺癌细胞系MDA-MB-435S细胞中。分... 目的:研究肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的下调对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S细胞的影响。方法:应用脂质体法将靶向TSG101的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染入乳腺癌细胞系MDA-MB-435S细胞中。分别使用MTT法、流式细胞仪检测siRNA干扰后MDA-MB-435S细胞增殖能力、细胞周期的变化。结果:MTT结果显示,TSG101 siRNA转染后的MDA-MB-435S细胞与对照组相比,增殖能力减弱。细胞周期结果显示,TSG101 siRNA转染后的MDA-MB-435S细胞周期与对照组相比,G0/G1期比例增多,S期比例减少,细胞周期阻滞于G1/S期。结论:TSG101的下调能够抑制乳腺癌细胞系MDA-MB-435S细胞的增殖,并导致细胞周期阻滞。TSG101可能参与乳腺癌的发生、发展过程。 展开更多
关键词 TSG101 乳腺癌细胞 mda-mb-435S 肿瘤易感基因 小干扰
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反义人DNMT1基因对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖和细胞周期的影响
4
作者 孙荣斌 鲁雅洁 魏钦俊 《山西医科大学学报》 CAS 2010年第3期205-209,240,共6页
目的构建表达人DNMT1基因(DNA methyltransferase 1,DNMT1)反义RNA的真核表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖的影响。方法应用DNA重组技术,将人DNMT1基因的cDNA片段克隆至pcDNA3.1(-)载体中,构建DNMT1反义RNA真核表达质粒,测... 目的构建表达人DNMT1基因(DNA methyltransferase 1,DNMT1)反义RNA的真核表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖的影响。方法应用DNA重组技术,将人DNMT1基因的cDNA片段克隆至pcDNA3.1(-)载体中,构建DNMT1反义RNA真核表达质粒,测序验证,将其转染入人乳腺癌细胞系中,利用荧光定量PCR法检测转染前后细胞DN-MT1基因mRNA表达水平的变化;Western blot检测转染后DNMT1蛋白表达变化;应用MTT法检测细胞生长状况,绘制细胞生长曲线;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果成功构建出能够表达DNMT1反义RNA的真核表达质粒。转染该质粒后,与未转染组和转染正义质粒组相比,MDA-MB-435s细胞中DNMT1基因mRNA和DNMT1蛋白表达量均显著下降;细胞生长变慢;细胞周期分析可见S期明显减少,而G1/G0期细胞显著增加。结论反义DNMT1能够特异性下调该基因的表达,并抑制乳腺癌细胞的增殖,为乳腺癌基因治疗提供了新的靶标。 展开更多
关键词 DNMT1基因 反义RNA 乳腺 mda-mb-435S
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miR-101增强多柔比星对乳腺癌细胞株MDA-MB-435的杀伤活性
5
作者 张根花 张桢 《浙江实用医学》 2016年第2期79-81,90,共4页
目的探讨microRNA-101(mi R-101)增强多柔比星对乳腺癌细胞的杀伤活性及机制。方法用荧光定量PCR方法检测人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435miR-101的表达水平。MTT法检测mi R-101对多柔比星体... 目的探讨microRNA-101(mi R-101)增强多柔比星对乳腺癌细胞的杀伤活性及机制。方法用荧光定量PCR方法检测人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435miR-101的表达水平。MTT法检测mi R-101对多柔比星体外杀伤MDA-MB-435能力的影响。利用生物信息学及Western blot方法验证mi R-101是否调节MDA-MB-435细胞Mcl-1的表达。构建Mcl-1真核表达载体,MTT法检测Mcl-1表达载体转染对mi R-101联合多柔比星杀伤MDA-MB-435细胞疗效的影响。结果 (1)多柔比星对转染了mi R-101的乳腺癌细胞MDA-MB-435的细胞活力抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01);(2)pc DNA3.1-Mcl-1的共转染显著抑制了mi R-101联合多柔比星对MDA-MB-435细胞的杀伤活性。结论 mi R-101通过下调Mcl-1的表达增强多柔比星对乳腺癌细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 miR-101 MCL-1 乳腺 mda-mb-435 多柔比星
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435增殖及促凋亡的作用机制 被引量:2
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作者 王召同 卢锐涛 +2 位作者 刘永红 王红胜 曾军 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1023-1029,共7页
目的观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435增殖、凋亡等的作用及其相关分子机制。方法不同浓度的SAHA作用于MDA-MB-435细胞后,采用MTT、流式细胞分析、Western blot、荧光定量PCR等方法检测细胞增殖、凋亡、周期... 目的观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435增殖、凋亡等的作用及其相关分子机制。方法不同浓度的SAHA作用于MDA-MB-435细胞后,采用MTT、流式细胞分析、Western blot、荧光定量PCR等方法检测细胞增殖、凋亡、周期阻滞情况及相关蛋白及mRNA表达。结果 MTT检测结果表明SAHA可呈剂量依赖性抑制细胞增殖,流式细胞分析发现SAHA可导致G2/M期周期阻滞、线粒体膜电位下降、活性氧(ROS)产生并发生早期凋亡。同时,SAHA可下调周期蛋白cyclin B、活化p38-MAPK及JNK,抑制p53的表达且可能不是通过PI3K通路、P38 MAPK通路、ERK1/2通路和NF-κB、JNK通路起作用。结论 SAHA能抑制MDA-MB-435细胞增殖,诱导其周期阻滞及早期凋亡,活化细胞内相关增殖分子,可作为乳腺癌潜在的候选药物。 展开更多
关键词 SAHA 乳腺mda-mb-435细胞 凋亡 MAPKS p53
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三氧化二砷诱导雌激素受体阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-435s凋亡和bcl-2、bax表达关系的研究 被引量:4
7
作者 张丽娜 王留兴 +2 位作者 樊青霞 赵培荣 王瑞林 《肿瘤基础与临床》 2007年第3期203-206,共4页
目的观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)诱导人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s凋亡的情况及对bcl-2和bax表达的影响,初步探讨了其诱导凋亡的途径。方法不同浓度As2O3体外作用于MDA-MB-435s细胞24h后,采用TUNEL染色法和DNA梯状电泳法检测细胞凋亡情... 目的观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)诱导人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s凋亡的情况及对bcl-2和bax表达的影响,初步探讨了其诱导凋亡的途径。方法不同浓度As2O3体外作用于MDA-MB-435s细胞24h后,采用TUNEL染色法和DNA梯状电泳法检测细胞凋亡情况,应用免疫组化法检测细胞中bcl-2和bax蛋白表达情况。结果As2O3作用后,DNA琼脂糖凝胶电泳法呈现凋亡DNA梯状条带;As2O3作用组的凋亡指数明显高于阴性对照组(P<0.05);bcl-2表达下调,bax表达上调。结论As2O3能诱导MDA-MB-435s细胞凋亡,上调bcl-2蛋白表达、下调bax蛋白表达是其诱导凋亡的途径之一。 展开更多
关键词 三氧化二砷(As2O3) 乳腺mda-mb-435s细胞 凋亡 bcl-2 bax
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CXCL12对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435失巢凋亡的研究
8
作者 杨开 杨越 +1 位作者 曹翌 王政华 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第4期769-772,共4页
目的:研究趋化因子CXCL12对人乳腺癌高转移细胞系MDA-MB-435失巢凋亡的影响。方法:实验组培养基中加入终浓度为50ng/ml的CXCL12,对照组为无CXCL12的DMEM培养基。两组细胞悬浮培养,建立人乳腺癌高转移细胞系MDA-MB-435失巢凋亡抵抗细胞... 目的:研究趋化因子CXCL12对人乳腺癌高转移细胞系MDA-MB-435失巢凋亡的影响。方法:实验组培养基中加入终浓度为50ng/ml的CXCL12,对照组为无CXCL12的DMEM培养基。两组细胞悬浮培养,建立人乳腺癌高转移细胞系MDA-MB-435失巢凋亡抵抗细胞模型。MTT检测CXCL12对于失巢凋亡抵抗MDA-MB-435细胞系生长的影响,流式细胞仪检测两组细胞的凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力改变。结果:CXCL12对于失巢凋亡抵抗MDA-MB-435细胞系在形态学方面与对照组相比无特异性改变。CXCL12作用组失巢凋亡抵抗细胞增殖能力低于对照组,凋亡率增加,侵袭能力增加,穿过膜细胞数明显高于对照组(28±3.0 vs 15±2.4,P<0.05)。结论:在人乳腺癌高转移细胞系MDA-MB-435失巢凋亡过程中,CXCL12能在一定程度上抑制失巢凋亡抵抗细胞的生长,但却能增加存活肿瘤细胞的侵袭性。 展开更多
关键词 乳腺 mda-mb-435 CXCL12 失巢凋亡
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乳腺癌细胞MDA-MB-435s中侧群细胞的分选及其与非侧群细胞的生物学特点比较
9
作者 左铁 李定彪 +1 位作者 杜兴华 雷鸣 《昆明医科大学学报》 CAS 2014年第10期22-24,共3页
目的分离乳腺癌细胞MDA-MB-435s中的侧群细胞(sidepopulation cells,SP),并比较侧群细胞和非侧群细胞(non-side population cells,NSP)的基本生物学特点.方法经Hoechst33342染色后,利用流式细胞技术分选乳腺癌细胞MDA-MB-435s中SP和NSP ... 目的分离乳腺癌细胞MDA-MB-435s中的侧群细胞(sidepopulation cells,SP),并比较侧群细胞和非侧群细胞(non-side population cells,NSP)的基本生物学特点.方法经Hoechst33342染色后,利用流式细胞技术分选乳腺癌细胞MDA-MB-435s中SP和NSP 2个细胞亚群,比较2群细胞的形态、增殖和周期等特点.结果分选得到的SP细胞约占5.2%,其增殖速度较NSP细胞快,且细胞形态较粗大.NSP细胞的G1期所占比例为73.63%,高于SP细胞的G1期所占比例为54.16%.结论 SP和NSP细胞的形态有差异,SP细胞的增殖速度快于NSP细胞,NSP细胞的周期阻滞在G1期,提示SP细胞可能在乳腺癌细胞的生长过程中具有重要的作用. 展开更多
关键词 乳腺癌细胞mda-mb-435s SP细胞 增殖
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乳宁Ⅱ号对人乳腺癌MDA-MB-435细胞株生长转移的影响 被引量:10
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作者 阙华发 高尚璞 +2 位作者 陈红风 陆德铭 唐汉钧 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2002年第7期32-34,共3页
Objective:To explore the effect of “Runing Ⅱ” on the tumor growth and metastasis of Human Breast Cancer Cell Line MDA MB 435 in Vivo and Vitro. Methods: Both in vitro and in Vivo experiments were conducted in the s... Objective:To explore the effect of “Runing Ⅱ” on the tumor growth and metastasis of Human Breast Cancer Cell Line MDA MB 435 in Vivo and Vitro. Methods: Both in vitro and in Vivo experiments were conducted in the study. In Vitro, MTT method was used to detect the ability killing the tumor cells of serum with “Runing Ⅱ”. In vivo, We have observed the effect of “Runing Ⅱ” on the tumor growth and metastasis by nude mice model implanted MDA MB 435. Result: At the dosages of 32g, 16g and 8g per kilogram, “Runing Ⅱ” could kill MDA MB 435 cells 35 88%、29 84% and 8 30% respectively in vitro, the inhibitory effect of tumor growth was statistially significant, as compared with that of the normal group ( P <0 05),there were no statistital difference between the “Runing Ⅱ” group at the dosages of 48g/kg and the CTX group ( P>0 05 ). In the case of animal experiments, the Human Breast Cancer Cell Line MDA MB 435 was inoculated into the m.f.p. of nude mice, the results demonstrated that the growth suppression rate and the Lung metastasis inhibiting rate of “Runing Ⅱ” at the dosages of 48g/kg was 53 64% and 27% respectively, which were no statistial difference than that of CTX group (the growth suppression rate and the Lung metastasis inhibiting rate was 48 8% and 25 2% respectively)( P> 0 05). Conclusion: The results suggest that “Runing Ⅱ” can suppress the tumor growth and metastasis of Human Breast Cancer Cell Line MDA MB 435. 展开更多
关键词 mda-mb-435 乳宁Ⅱ号 乳腺 细胞 生长转移 动物实验
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FRNK对人乳腺癌MDA-MB-435细胞迁移的抑制作用
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作者 秦瑾 刘正湘 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期833-838,共6页
背景与目的:粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)的高表达或过度激活与肿瘤迁移密切相关。粘着斑相关非激酶(FAKrelatednon-kinase,FRNK)是FAK内源性抑制剂,通过与FAK竞争粘着斑结合位点抑制FAK活性。本研究旨在探讨FRNK对人乳腺癌细胞... 背景与目的:粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)的高表达或过度激活与肿瘤迁移密切相关。粘着斑相关非激酶(FAKrelatednon-kinase,FRNK)是FAK内源性抑制剂,通过与FAK竞争粘着斑结合位点抑制FAK活性。本研究旨在探讨FRNK对人乳腺癌细胞MDA-MB-435迁移的抑制作用及相关机制。方法:RT-PCR法克隆目的基因FRNK,构建pcDNA3.1-FRNK重组质粒;利用脂质体转染MDA-MB-435细胞,经G418筛选抗性单细胞克隆,通过Westernblot鉴定稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞并检测其与野生型MDA-MB-435细胞中基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase9,MMP-9)表达水平;采用体外划痕修复实验和Boyden趋化小室比较野生型和稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞的非定向及定向迁移运动能力。结果:成功构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-FRNK,建立稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞。高表达FRNK的细胞较野生型MDA-MB-435细胞MMP-9蛋白表达降低73.1%。在划痕修复实验中,稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞移行面积与空白面积之比为0.35±0.02,与野生型MDA-MB-435细胞(0.58±0.06)相比划痕修复能力明显减弱(P<0.05);在趋化小室实验中,高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞迁移数为65.15±8.56,仅为野生型MDA-MB-435细胞迁移数(97.86±5.44)的66.57%。结论:FRNK可抑制MDA-MB-435细胞迁移运动,该抑制作用与MDA-MB-435细胞中MMP-9表达下调有关。 展开更多
关键词 粘着斑相关非激酶 乳腺肿瘤 mda-mb-435细胞 细胞迁移 基质金属蛋白酶-9
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亲骨转移乳腺癌细胞MDA-MB-231BO成瘤性的初步研究
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作者 王江涛 丁彦青 王捷 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第5期23-25,F0003,共4页
目的通过比较亲骨转移乳腺癌细胞(MDA-MB-231BO)和亲代乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的生长曲线和致瘤性,初步探讨MDA-MB-231BO细胞的生物学特性。方法MTT法测定两种细胞的生长曲线,并将两种乳腺癌细胞接种于裸鼠腋窝处皮下,建立乳腺癌细胞异... 目的通过比较亲骨转移乳腺癌细胞(MDA-MB-231BO)和亲代乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的生长曲线和致瘤性,初步探讨MDA-MB-231BO细胞的生物学特性。方法MTT法测定两种细胞的生长曲线,并将两种乳腺癌细胞接种于裸鼠腋窝处皮下,建立乳腺癌细胞异种移植瘤动物模型,30 d后处死裸鼠,肿瘤组织及相关脏器官做病理检查。结果MTT法测得MDA-MB-231BO细胞生长速率高于MDA-MB-231细胞。接种两种乳腺癌细胞的裸鼠均长出肿瘤,成瘤率为100%。病理检查符合人乳腺癌细胞特征,MDA-MB-231BO组瘤体体积明显大于MDA-MB-231组(P<0.05)。结论MDA-MB-231BO细胞生长速率高于MDA-MB-231细胞,而且MDA-MB-231BO在裸鼠体内的致瘤性强于MDA-MB-231。 展开更多
关键词 亲代乳腺癌细胞(mda-mb-231) 亲骨转移乳腺癌细胞(mda-mb-231BO) 骨转移 肿瘤移植模型
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染料木黄酮对人乳腺癌细胞肌动蛋白细胞骨架和黏附能力的影响 被引量:6
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作者 宋鸣子 戈应滨 +2 位作者 范玲玲 李迎春 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期424-427,I0001,共5页
目的:体外研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架及黏附能力的影响。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0!mol/L)孵育MDA-MB-435细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,分别用荧光... 目的:体外研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架及黏附能力的影响。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0!mol/L)孵育MDA-MB-435细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,分别用荧光显微镜和流式细胞仪技术分析肌动蛋白细胞骨架的重组情况;噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞对人工重组基膜的黏附能力。结果:不同浓度染料木黄酮均导致细胞内肌动蛋白细胞骨架发生解聚,同时细胞内F-肌动蛋白排列和分布及细胞形态发生明显改变;此外,染料木黄酮可明显降低MDA-MB-435细胞对人工重组基膜的黏附能力,其效应呈剂量依赖性。结论:染料木黄酮在体外可抑制乳腺癌细胞的黏附能力,其作用可能与其诱导肌动蛋白细胞骨架重组有关。 展开更多
关键词 染料木黄酮 细胞骨架 黏附 乳腺癌细胞(mda-mb-435)
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MTT法检测乳腺癌细胞株对化疗药物5-氟脲嘧啶的敏感性 被引量:8
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作者 韩方璇 林慧 汝玲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期97-99,共3页
目的探讨四氮唑蓝比色分析法(MTT法)用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为乳腺癌临床化疗用药提供参考。方法采用MTT法测定乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S对不同浓度的化疗药物5-氟脲嘧啶(5-Fu)的体外敏感性。结果不同浓度的5-F... 目的探讨四氮唑蓝比色分析法(MTT法)用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为乳腺癌临床化疗用药提供参考。方法采用MTT法测定乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S对不同浓度的化疗药物5-氟脲嘧啶(5-Fu)的体外敏感性。结果不同浓度的5-Fu对高转移和低转移乳腺癌细胞株的生长均有一定的抑制作用,且抑制率呈剂量依赖性。结论MTT法检测有助于指导临床选择化疗药物剂量,提高化疗效果,减少毒副作用,为乳腺癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据。 展开更多
关键词 乳腺 5-氟脲嘧啶 MTT法 MCF-7 mda-mb-435S
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p38激酶-HSP27信号通路在染料木黄酮诱导人乳腺癌细胞肌动蛋白细胞骨架解聚中的作用 被引量:1
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作者 王树树 宋鸣子 +1 位作者 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期9-12,共4页
目的:研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架的影响,探讨p38激酶-HSP27信号通路对染料木黄酮诱导的细胞骨架肌动蛋白重组调控的可能机制。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0μmol/L)体... 目的:研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架的影响,探讨p38激酶-HSP27信号通路对染料木黄酮诱导的细胞骨架肌动蛋白重组调控的可能机制。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0μmol/L)体外孵育MDA-MB-435细胞24h后,用免疫印迹法研究细胞内p38激酶和HSP27表达及磷酸化水平的改变,同时分析肌动蛋白,HSP27其在细胞内定位的改变。结果:染料木黄酮处理24h,胞浆中的G-肌动蛋白含量明显增多,而细胞骨架中的F-肌动蛋白含量明显减少;p38激酶和HSP27的蛋白总量无明显改变,但二者磷酸化水平随着染料木黄酮处理浓度的增加逐渐降低;与此相应的是HSP27在胞浆中含量明显减少,在细胞骨架中含量明显增多。结论:p38激酶途径以及HSP27磷酸化/脱磷酸化过程可能介导染料木黄酮所致MDA-MB-435细胞肌动蛋白细胞骨架的重组。 展开更多
关键词 染料木黄酮 乳腺癌细胞(mda-mb-435细胞) 肌动蛋白细胞骨架 P38激酶 热休克蛋白27(HSP27)
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肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸致乳腺癌细胞迁移中的作用 被引量:2
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作者 杜军 杨郁 +1 位作者 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期609-612,共4页
目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组... 目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布改变;用二维电泳法分离并比较细胞内骨架组分及胞浆组分中磷酸化和非磷酸化的肌动蛋白含量。结果:10μmol/L浓度的LPA可明显增加MDA-MB-231细胞迁移速度。LPA处理后细胞内F-肌动蛋白含量明显增加,而肌动蛋白总量并未出现明显变化。此外,LPA处理还可明显升高细胞内胞浆组分中磷酸化的肌动蛋白量;在骨架组分中,肌动蛋白仅以磷酸化的形式存在,且含量在LPA刺激前后无明显差异。结论:LPA可促进乳腺癌细胞的迁移能力及细胞骨架发生聚合,其作用可能与其改变细胞胞浆中肌动蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 LPA 细胞骨架 迁移 肌动蛋白 乳腺癌细胞(mda-mb-231细胞)
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Src激酶抑制剂PP2对乳腺癌MDA-MB-231细胞黏附、迁移能力的影响 被引量:2
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作者 杜军 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期850-854,共5页
目的:研究Src激酶抑制剂PP2对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架及黏附、迁移能力的影响。方法:不同浓度Src激酶抑制剂PP2(0.2、1.0、5.0和25.0!mol/L)孵育MDA-MB-231细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,用荧光显微... 目的:研究Src激酶抑制剂PP2对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架及黏附、迁移能力的影响。方法:不同浓度Src激酶抑制剂PP2(0.2、1.0、5.0和25.0!mol/L)孵育MDA-MB-231细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,用荧光显微镜分析肌动蛋白细胞骨架的重组情况;用免疫印迹技术检测细胞内骨架组分(Triton不溶组分)及胞浆组分(Triton可溶组分)中肌动蛋白的分布;划痕损伤实验检测细胞迁移速度;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞对人工重组基底膜(Matrigel)的黏附能力。结果:PP2处理可导致细胞内肌动蛋白细胞骨架发生解聚,F-肌动蛋白排列和分布及细胞形态发生明显改变;此外,PP2可明显降低MDA-MB-231细胞迁移速度及其对人工重组基底膜的黏附能力,其效应呈剂量依赖性。结论:Src激酶抑制剂PP2可影响乳腺癌细胞的黏附及迁移能力,其作用可能与其对肌动蛋白细胞骨架的重组有关。 展开更多
关键词 SRC 细胞骨架 黏附 迁移 PP2 乳腺癌细胞(mda-mb-231细胞)
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超氧阴离子和细胞外信号调节激酶在金雀异黄素抑制人乳腺癌细胞浸润中作用的研究 被引量:1
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作者 金建明 杜军 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1351-1355,共5页
目的:研究金雀异黄素对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)浸润能力的影响及其可能机制。方法:不同浓度的金雀异黄素(25~100μmol/L)孵育MDA-MB-231细胞24 h,用Transwell assay检测细胞浸润能力;用免疫印迹法比较细胞内磷酸化和总细胞外信号调节激... 目的:研究金雀异黄素对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)浸润能力的影响及其可能机制。方法:不同浓度的金雀异黄素(25~100μmol/L)孵育MDA-MB-231细胞24 h,用Transwell assay检测细胞浸润能力;用免疫印迹法比较细胞内磷酸化和总细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白含量的改变;用免疫荧光实验检测细胞内磷酸化ERK的分布;用DHE染色及荧光显微镜检测细胞内超氧阴离子水平。结果:金雀异黄素处理使细胞浸润能力降低;同时,金雀异黄素的处理引起细胞内磷酸化ERK量明显降低,且磷酸化ERK在核内含量明显下降;ERK抑制剂U0126作用于细胞亦能明显降低细胞的浸润能力;金雀异黄素处理还能使细胞内超氧阴离子含量明显下降,超氧阴离子清除剂TEMPOL不仅明显抑制磷酸化ERK含量,同时细胞浸润能力也明显降低。结论:金雀异黄素可能通过抑制乳腺癌细胞的超氧阴离子水平和ERK活性,进而抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的浸润能力。 展开更多
关键词 金雀异黄素 乳腺癌细胞(mda-mb-231) 细胞外信号调节激酶 超氧阴离子 浸润
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细胞凋亡在人乳腺癌细胞拟态血管形成中的作用
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作者 李卫星 孙重期 杜军 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期179-184,共6页
目的:研究细胞凋亡对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)体外形成拟态血管的影响。方法:建立体外人工基底膜三维细胞培养模型,观察乳腺癌细胞能否形成血管样结构。用Annexin-FITC细胞凋亡检测试剂盒测定血管样结构形成过程中细胞凋亡情况;加入cas... 目的:研究细胞凋亡对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)体外形成拟态血管的影响。方法:建立体外人工基底膜三维细胞培养模型,观察乳腺癌细胞能否形成血管样结构。用Annexin-FITC细胞凋亡检测试剂盒测定血管样结构形成过程中细胞凋亡情况;加入caspase抑制剂Z-VAD-FMK和caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO后观察其对血管样结构的影响。结果:三维培养24 h时,乳腺癌细胞伸出细长突起,彼此相互连接,形成腔隙样结构;经PAS染色,可见环状PAS阳性图案,表明乳腺癌细胞在体外可以形成拟态血管。细胞三维培养后凋亡细胞数开始增多,8 h达到高峰,此后凋亡细胞数下降,24 h时凋亡细胞数与对照组相比无明显差异。Z-VAD-FMK和Ac-DEVD-CHO均能明显抑制三维培养状态下细胞拟态血管的形成。结论:在体外三维培养条件下,人乳腺癌细胞可形成拟态血管,而细胞凋亡过程是恶性肿瘤细胞拟态血管形成的关键环节之一。 展开更多
关键词 细胞凋亡 乳腺癌细胞(mda-mb-231) 拟态血管
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去甲泽拉木醛对MDA⁃MB⁃435细胞增殖和凋亡的影响
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作者 沈政洁 徐长亮 +3 位作者 钱和亚 左云 程海波 陈亚楠 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期255-258,共4页
目的探究去甲泽拉木醛对人乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖和凋亡的影响。方法2、4、8μmol/L去甲泽拉木醛作用MDA-MB-435细胞24 h后,在倒置显微镜下观察形态,MTT法检测细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,通过Hoechst单染... 目的探究去甲泽拉木醛对人乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖和凋亡的影响。方法2、4、8μmol/L去甲泽拉木醛作用MDA-MB-435细胞24 h后,在倒置显微镜下观察形态,MTT法检测细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,通过Hoechst单染于荧光显微镜观察细胞凋亡形态,Western blot法检测Bcl-2、Bcl-xL、Bax蛋白表达。结果2、4、8、12μmol/L去甲泽拉木醛处理MDA-MB-435细胞24、48 h后,可呈浓度依赖性地抑制乳腺癌细胞增殖(P<0.05)。2、4、8μmol/L去甲泽拉木醛作用乳腺癌细胞24 h后,细胞凋亡率升高(P<0.05),Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达下调(P<0.05),Bax蛋白表达上调(P<0.05)。结论去甲泽拉木醛可能通过下调Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达,上调Bax蛋白表达来诱导MDA-MB-435细胞凋亡并抑制增殖。 展开更多
关键词 去甲泽拉木醛 乳腺mda-mb-435细胞 增殖 凋亡
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