乳腺癌转移抑制基因1对乳腺癌细胞运动能力的影响

目的:研究乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor gene1,BRMS1)对人乳腺癌细胞运动能力的影响。方法:构建BRMS1真核表达载体,利用Lipofectin2000转染肺高转移潜能乳腺癌细胞MDA-MB-231-HM,荧光实时定量PCR检测目的基因表达,Transwell实验检测细胞运动能力。同时,设计3对针对BRMS1的特异小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),通过荧光实时定量PCR筛选出最有效的siRNA,干扰人乳腺癌细胞MDA-MB-231,观察干扰后细胞运动能力的变化。结果:与转染空载体的细胞相比,稳定转染BRMS1的MDA-MB-231-HM细胞穿过膜的数量减少51.9%。筛选出1对有效siRNA能明显下调BRMS1,用此siRNA干扰MDA-MB-231细胞后,其穿过膜的细胞数量增加17.9%。结论:BRMS1能抑制人乳腺癌细胞的运动,提示其可能通过抑制人乳腺癌细胞运动而抑制肿瘤远处转移。

乳腺癌转移抑制基因1在乳腺癌中的表达及其意义

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，全世界每年的新发病例超过120万，且发病率呈逐年上升趋势。肿瘤的转移是导致患者死亡的主要原因，目前控制肿瘤转移是乳腺癌研究的重点之一。乳腺癌转移抑制基因1（BRMSl）是近年新发现的一种抑制肿瘤转移和扩散的基因。本研究拟通过检测BRMSl蛋白在乳腺癌组织、癌旁组织及乳腺良性病变组织中的表达情况，初步探讨其与乳腺癌各临床病理因素之间的关系。

基因芯片表达在乳腺癌转移过程中的聚类分析

利用基因芯片可以得到不同基因在不同生命过程中的表达,因此在医学诊断与病变分析中受到重视,并开始大量应用.经测定发现,不同基因在病变过程的不同阶段中的表达是不相同的,由此可以得到在病变过程的不同基因的表达特征.在本文中,我们给出了乳腺癌在转移过程中的基因表达特征的聚类分析法分析,并改进了k-means聚类算法,使之具有自动搜索聚类数的功能,并且有助于改善k-means算法的聚类结果陷入局部最小值的状况.通过对平均聚类误差指标的比较,kr-means要优于k-means算法.本文所得到的结果可供乳腺癌诊断与病变分析参考,同时可以应用于小型基因检测芯片的制备,也可以用于构建基因网络调控图.

乳腺癌转移抑制基因BRMS1与肿瘤

乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)是2000年在乳腺癌细胞中发现的肿瘤转移抑制基因,研究发现其在多种恶性肿瘤中具有抑制肿瘤细胞转移的能力,可明显减少转移灶的发生,但其具体作用机制仍不清楚。对BRMS1基因的深入研究必将有助于对肿瘤转移的早期诊断及治疗,本文就BRMS1的基因结构、蛋白功能及其与肿瘤的关系、作用机制等予以综述。

乳腺癌转移抑制基因、尿激酶型纤溶酶原激活剂在乳腺癌组织中的表达

目的探讨乳腺癌组织中乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)蛋白和尿激酶型纤溶酶原激活剂(u PA)表达及其临床意义。方法采用免疫组化(Envision二步法)检测90例乳腺癌组织和30例癌旁组织中BRMS1、u PA的蛋白表达情况,并结合临床病理特征分析其临床意义。结果乳腺癌组织中BRMS1和u PA的阳性表达率分别为45.56%和60.00%,乳腺癌旁正常乳腺组织中BRMS1和u PA的阳性表达率分别为93.33%和20.00%,两组比较,差异均有统计学意义(χ2分别=21.02、14.40,P均<0.05);常规苏木精-伊红染色和免疫组化染色显示,BRMS1蛋白表达于细胞核和细胞质内,u PA蛋白阳性表达主要定位于肿瘤细胞胞质。阳性细胞染色呈棕黄色细颗粒状。BRMS1蛋白和u PA表达在TNM分期中Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌中的表达阳性率明显高于Ⅲ期者,差异有统计学意义(χ2分别=5.64、6.13、9.46、36.75,P<0.05);BRMS1和u PA表达在乳腺癌淋巴结转移之间比较,差异均有统计学意义(χ2分别=9.64、36.75,P均<0.05);Spearman相关性分析显示,在乳腺癌组织中,BRMS1蛋白表达与u PA呈明显负相关(r=-0.75,P<0.05)。结论 BRMS1与u PA的异常表达可能参与了乳腺癌的浸润转移,两者在转移的信号转导中可能有一定的相关性。

乳腺癌转移抑制基因1抑制乳腺癌转移的作用机理研究进展

目的综述乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)在抑制乳腺癌转移中的作用机理研究进展。方法采用文献回顾的方法,对目前国内、外有关BRMS1在乳腺癌中的研究状况加以分析与综述。结果BRMS1与其他肿瘤转移抑制基因一样,主要抑制肿瘤的转移,并不影响肿瘤的生长,在乳腺癌中主要通过调节细胞间的信号转导及其他转移抑制基因的表达而抑制乳腺癌的转移。结论对BRMS1基因的深入研究有助于进一步深化对乳腺癌转移的认识,为肿瘤转移的分子诊断和基因治疗提供新的思路。

乳腺癌转移抑制基因1对卵巢癌细胞血管生成的影响及其机制探讨

目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)对人卵巢癌细胞OVCAR3诱导血管内皮细胞形成管腔能力的影响及可能的机制。方法应用脂质体介导的方法将BRMS1shRNA重组质粒转染人卵巢癌细胞OVCAR3,经G418筛选获得稳定转染株。荧光定量PCR和Western blot法检测BRMS1mRNA和蛋白的表达水平;体外血管形成实验检测OVCAR3诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的血管形成能力;Western blot法检测生长抑制因子4(ING4)和白细胞介素-6(IL-6)的蛋白表达情况。结果稳定转染BRMS1shRNA后,OVCAR3细胞BRMS1的表达在mRNA和蛋白水平均受到明显抑制。体外血管形成实验提示,BRMS1表达下调后能显著促进卵巢癌细胞诱导的HUVECs形成管腔样结构的能力;Western blot法显示干扰组中ING4蛋白表达量较对照组下降30%,而IL-6蛋白表达上调,是空白对照组的1.5倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰BRMS1基因的表达可促进卵巢癌细胞诱导血管形成能力,其机制可能与调节下游基因ING4和IL-6的表达有关。

鼻咽癌细胞株中乳腺癌转移抑制基因表达的研究

目的:检测乳腺癌转移抑制(BRMS1)基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中的表达情况。方法:应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链式反应法在m RNA和蛋白2方面检测人鼻咽癌细胞株高分化磷癌、低分化磷癌、低分化细胞株、高成瘤高转移性细胞株、低成瘤低转移性细胞株中BRMS1的表达。结果:5种细胞株中BRMS1的蛋白表达皆为阳性,在不同转移习性的细胞株中其表达强度明显不同。4种细胞株中扩增出BRMS1 m RNA,而BRMS1 m RNA在高转移性细胞株中未扩增出,高分化鳞癌、低分化鳞癌、低分化细胞株BRMS1 m RNA表达水平均显著高于低成瘤低转移性细胞株(P<0.01)。结论:BRMS1的表达与细胞株的转移能力有明显相关性,表明BRMS1可能作为鼻咽癌细胞转移的重要指标。

共词分析及网络分析法探测乳腺癌转移相关基因

目的:探测乳腺癌转移相关的基因,为乳腺癌转移的早期诊断和个性治疗提供参考。方法:检索Pub Med数据库获取文献,利用Meta Map进行概念匹配,下载匹配结果,并导入到数据分析软件,得到乳腺癌转移相关基因和基因-基因矩阵;使用Ucinet6建立乳腺癌转移相关基因的相互作用网络,分析网络的相关指标。结果:tp53、thra、erbb2、esr1、cdh1、egfr、nr4a1、cd69等是乳腺癌转移核心基因。结论:基于共词分析法能获得乳腺癌转移相关基因,但cd69对于乳腺癌转移的具体过程尚不明确,需要进一步验证。

乳腺癌转移抑制基因1和核因子相关κB结合蛋白50在宫颈癌变中的表达

目的：探讨乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）、核因子相关κB结合蛋白50（NF-κB p50）在宫颈癌变过程中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化（Super Sensitive TM IHC）法分别检测慢性宫颈炎组织、CINⅠ组织、CINⅡ～Ⅲ组织和宫颈癌组织中BRMS1、NF-κB p50的表达，分析两者的表达水平与宫颈癌临床病理特征的关系。结果：①宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ及CINⅠ组组织中BRMS1蛋白的表达低于慢性宫颈炎组，差异有统计学意义（均P＜0.05），且BRMS1蛋白在ⅡB～Ⅳ期、浸润深度＞1/2、有淋巴结转移者中表达降低甚至缺失（均P＜0.05）。②NF-κB p50蛋白在宫颈癌组、CINⅠ和CINⅡ～Ⅲ组中的阳性表达率高于慢性宫颈炎组（均P＜0.05），且在瘤体直径≥4 cm、低分化癌、浸润深度＞1/2、有淋巴结转移者中NF-κB p50蛋白表达升高，差异有统计学意义（均P＜0.05）。③宫颈癌中BRMS1与NF-κB p50蛋白表达水平呈负相关（rs=0.426，P＜0.001）。结论：宫颈癌中BRMS1蛋白与NF-κB蛋白的阳性表达呈负相关，BRMS1蛋白阳性表达逐渐下降、甚至缺失，而NF-κB蛋白阳性表达逐渐升高，与癌细胞的发展、浸润转移密切相关。

锌指基因家族与乳腺癌转移的相关性研究

目的:用全外显子测序技术筛选与乳腺癌转移的相关基因;方法:通过外显子测序技术对1例转移性乳腺癌的原发肿瘤组织及转移组织分别进行全外显子测序。结果:发现杂合性缺失涉及的基因最多的是19号染色体,统计发现位于该区域的锌指基因家族的杂合性缺失发生率最高,涉及基因26个,主要集中在19p13及19q13上。结论:19号染色体上锌指基因家族的的杂合性缺失可能与乳腺癌的转移密切相关。

乳腺癌转移抑制基因1在消化系肿瘤中的研究进展

乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)是2000年在乳腺癌细胞中发现的一种肿瘤转移抑制基因,他可降低肿瘤细胞的转移潜能,却不影响肿瘤本身的生长.随后发现其在黑色素瘤、膀胱癌、嗜铬细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、子宫内膜癌、鼻腔副鼻窦癌转移中均呈低表达或不表达.近年来又发现BRMS1在口腔鳞癌、胃癌、肝癌、胆囊癌、胰腺癌等消化系肿瘤转移中也起到抑制作用.恶性肿瘤已经成为危害人类健康最严重的疾病之一,在我国以消化系肿瘤最常见;对BRMS1作用机制的深入研究,必将为肿瘤转移的分子诊断、靶向治疗和预后提供潜在的理论依据及广泛的应用前景.现就近年来BRMS1在消化系肿瘤中的相关研究进展作一综述.

5-杂氮-2'-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响

目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响及可能的机制。方法:将MCF-7细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR,SqRT-PCR)与甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测两组细胞的CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)的mRNA表达与启动子区甲基化状况。然后分别将两组细胞通过边缘尾静脉注射到BALB/c nu/nu裸鼠体内,5周后,用荧光定量RT-PCR(fluorescent quantitative RT-PCR,FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内的目的基因HPRT mRNA丰度。结果:处理组CXCR4mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化;两组BRMS1mRNA表达无明显差异(P>0.05),BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度高,转移癌组织较多。结论:5-Aza-CdR通过去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4的表达,从而增强了MCF-7细胞实验性肺转移能力。

5-杂氮-2′-脱氧胞苷降低了乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外迁移能力

目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对高转移性人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外迁移能力的作用及可能的机制。方法实验分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过Transwell趋化迁移及划痕实验、半定量逆转录PCR(SqRT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)等方法检测MDA-MB-231细胞的体外迁移能力、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)与CXC趋化因子受体-4(CXCR4)基因表达、BRMS1与CXCR4启动子区甲基化状况。结果对照组与处理组细胞穿过Transwell聚碳酸酯滤膜的数量分别为1 290.00±214.64与673.00±44.00,处理组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);24、36、48 h时间点对照组与处理组细胞划痕愈合率分别为20.34±0.69、59.31±0.38、91.77±0.13与20.19±0.67、49.32±0.24、69.47±0.46,其中36 h与48 h时间点处理组愈合率明显降低(P<0.05);对照组与处理组BRMS1的相对于内参GAPDH的灰度值(IDV)分别为0与0.39±0.001,处理组BRMS1 mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使BRMS1启动子区甲基化的CpG岛B完全去甲基化,对照组与处理组CXCR4的相对于内参GAPDH的IDV分别为0.58±0.003与0.58±0.01,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),CXCR4启动子区CpG岛1的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR通过去甲基化机制重新激活肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达,从而降低了MDA-MB-231细胞体外迁移能力。

乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中SATB1和BRMS1的表达变化

目的观察乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中核基质结合区结合蛋白1(SATB1)和乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)的表达变化。方法乳腺浸润导管癌患者78例,均接受手术治疗,全部留取原发灶组织标本,其中52例同时留取腋窝淋巴结转移灶组织标本、63例同时留取癌旁组织标本。采用免疫组化法和荧光实时定量PCR法检测三种组织标本中的SATB1、BRMS1蛋白及mRNA。结果原发灶、淋巴结转移灶组织中SATB1蛋白阳性表达率分别为75.6%、82.7%,与癌旁组织的28.6%相比,P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶组织中BRMS1蛋白阳性表达率分为25.6%、23.1%,与癌旁组织的87.3%相比,P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶组织SATB1 mRNA的相对表达量分别为7.93±1.42、7.27±0.42,与癌旁组织的9.88±1.28相比,P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶组织BRMS1 mRNA的相对表达量分别为10.21±1.82、10.23±1.28,与癌旁组织的8.69±1.03相比,P均<0.05。原发灶组织SATB1表达与乳腺浸润性导管癌转移淋巴结数及临床分期有关(P均<0.05)。原发灶SATB1蛋白和BRMS1蛋白表达无相关关系(r=-0.523,P>0.05),SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA表达量无相关关系(r=-0.093,P>0.05)。结论乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中SATB1蛋白及mRNA呈高表达,BRMS1蛋白及mRNA呈低表达,SATB1蛋白及mRNA表达与乳腺浸润癌性导管癌的淋巴结转移和临床分期有关。

5-杂氮-2′-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响及机制探讨

目的观察5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7细胞分两组,观察组用含5.0μM5-Aza-CdR的培养液处理4 d,对照组加入等体积的DMSO。采用细胞划痕实验观察细胞体外迁移能力,采用RT-PCR、甲基化特异性PCR(MSP)法检测CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)mRNA及其启动子区甲基化状态。结果与对照组比较,观察组36、48 h细胞划痕愈合率明显升高,MCF-7细胞的CXCR4 mRNA表达量明显增加(P<0.05);5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化,BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR增强了MCF-7细胞的体外迁移能力,可能与其去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4表达有关。

肿瘤转移抑制基因BRMS1的研究进展

肿瘤转移抑制基因是指抑制肿瘤细胞转移而不影响原发肿瘤生长的基因。乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)是在2000年新发现的转移抑制基因,现已发现它能抑制多种肿瘤细胞的转移。本文就BRMS1的基因结构、生物学功能及与多种肿瘤的关系、作用机制及其临床意义作一综述。

乳腺癌转移抵制基因和CD44v6在声门上型喉癌中的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)蛋白和转移相关基因CD44v6蛋白在声门上型喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法:免疫组织化学法检测70例手术切除的原发性声门上型喉癌组织(肿瘤组)和其相邻的癌旁喉黏膜组织(对照组)石蜡标本中BRMS1蛋白及CD44v6蛋白的表达,分析BRMS1蛋白及CD44v6蛋白的表达与患者年龄、性别、临床分期、病理分级、有无颈淋巴结转移以及预后的关系。结果:BRMS1在对照组中呈阳性表达,阳性表达率为85.7%(60/70),在肿瘤组中不表达或低表达,阳性表达率为35.7%(25/70),二者之间差异有统计学意义(P<0.01);CD44v6在大多数肿瘤组中呈阳性表达,阳性表达率为82.9%(58/70),在对照组中不表达,二者之间的差异有统计学意义(P<0.01)。BRMS1蛋白和CD44蛋白的表达在患者的性别、年龄方面比较,均差异无统计学意义(均P>0.05);而BRMS1蛋白与CD44蛋白的表达在肿瘤的病理分级、临床分期和颈淋巴结转移方面比较,均差异有统计学意义(均P<0.01);2种蛋白的表达呈负相关(r=-0.9042,P<0.01)。Kaplan-Meier法计算,BRMS1蛋白阳性组患者与BRMS1蛋白阴性组患者的术后生存率比较,二者之间的差异无统计学意义(P>0.05);而CD44v6蛋白阳性组患者与CD44v6蛋白阴性组患者的术后生存率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BRMS1蛋白在声门上型喉癌组织中表达显著降低,CD44v6蛋白在声门上型喉癌组织中表达显著增高。BRMS1蛋白及CD44v6蛋白的异常表达与声门上型喉癌的病理分级、临床分期和颈部淋巴结转移密切相关。联合检测2种蛋白的表达对声门上型喉癌患者颈部淋巴结转移的判断有一定指导意义。

BRMS1对卵巢癌细胞c13*转移侵袭的影响及机制

目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)对c13*细胞转移侵袭、粘附的影响及机制。方法由质粒PC-MV-HA-BRMS1中扩增目的基因BRMS1,将其插入pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1(+)-BRMS1质粒。经酶切及测序鉴定正确后,转染c13*细胞,PCR、Real-time PCR、Western blot检测BRMS1的表达;划痕实验、Transwell实验、粘附实验检测c13*细胞运动、侵袭、粘附能力;Western blot检测整合素β1、p-AKT、AKT表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)-BRMS1质粒;转染目的基因的c13*细胞中,BRMS1的mRNA和蛋白表达均显著增加,细胞运动、侵袭、粘附能力降低,整合素β1及p-AKT表达均下降,AKT表达无改变。结论成功构建pcDNA3.1(+)-BRMS1质粒。BRMS1可能通过抑制整合素β1/AKT通路,抑制卵巢癌c13*细胞的运动、侵袭和粘附能力。

乳腺癌转移抑制基因和骨桥蛋白在前列腺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)和骨桥蛋白(OPN)在前列腺癌组织的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法分别检测46例前列腺癌组织和29例良性增生组织中BRMS1、OPN蛋白的表达水平,并分析其与前列腺癌患者临床病理资料的关系。结果BRMS1在29例良性增生组织中多为阳性表达,表达率86.2%(25/29),而前列腺癌组织中表达率为21.7%(10/46);前列腺癌组织中OPN表达率为70.0%(32/46),良性增生组织中OPN阳性表达率27.6%(8/29);两种蛋白在前列腺癌组织和增生组织中的表达差异均有统计学意义(P=0.000)。BRMS1的表达与前列腺癌有无转移有关(P=0.046),与年龄、Gleason评分、前列腺特异性抗原(PSA)、肿瘤大小无关。OPN的表达与前列腺癌细胞Gleason评分、肿瘤大小和远处转移有关(P=0.046、0.029、0.035),与性别和PSA水平无关。BRMS1与OPN的表达呈负相关(P=0.021)。BRMS1阴性表达伴OPN阳性表达者易发生远处转移。结论BRMS1和OPN在前列腺癌的转移过程中发挥重要且相反的作用,两者联合检测可作为评判前列腺癌恶性程度的辅助指标。