乳腺癌间质细胞对MCF-7细胞Wnt1、Notch 1、β-catenin表达及细胞迁移的影响

目的研究乳腺癌间质细胞对乳腺癌细胞的调控效应,探讨微环境在乳腺癌发生和发展中的作用。方法取5例乳腺癌患者手术后标本进行原代间质细胞的分离、培养和纯化,并行免疫组化鉴定。采用Transwell三维共培养体系,将原代间质细胞与乳腺癌细胞系(MCF-7)共培养3d(实验组),以2%FCS培养基单独培养MCF-7作为对照组。Real-time PCR检测MCF-7的Wnt1、β-catenin、Notch 1 mRNA表达;迁移实验观察MCF-7迁移状况。结果经免疫组化α-SMA、Vimentin、FSP抗体鉴定,证实纯化的细胞为活化的间质成纤维细胞。实验组MCF-7的Wnt1、Notch1表达明显上调,分别为对照组的2.09倍和3.75倍,而β-catenin表达下调为对照组的0.31倍;实验组MCF-7穿过膜的细胞数明显增多,为对照组的2.3倍。结论乳腺癌原代间质细胞对MCF-7 Wnt、Notch1、β-catenin mRNA表达具有调节作用,并促进MCF-7的迁移。

CD4^+CD25^+调节性T细胞对乳腺癌细胞上皮间质转化和ALDH1^+干样细胞的影响

目的:研究CD4^+CD25^+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)对乳腺癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、细胞迁移侵袭能力,及ALDH1^+干样细胞比例的影响。方法:采用免疫磁珠法分离乳腺癌患者外周血中CD4^+CD25^+Tregs,CD4^+CD25^+Tregs与乳腺癌BT474、MCF-7细胞系共培养(共培养组),BT474、MCF-7单独培养(对照组)。检测共培养组和对照组乳腺癌细胞EMT相关标志物表达的变化,及细胞迁移和侵袭能力的变化。此外,检测BT474细胞中ALDH1^+干样细胞、微球形成能力和自我更新能力的变化。结果:CD4^+CD25^+Tregs诱导BT474和MCF-7细胞间质性标志物表达增高,诱导MCF-7细胞上皮性标志物E-cadherin表达降低。CD4^+CD25^+Tregs诱导BT474和MCF-7细胞迁移和侵袭能力上调。共培养组BT474细胞中ALDH1^+干样细胞比例、微球体形成能力、自我更新能力较对照组增强。结论:CD4^+CD25^+Tregs可诱导乳腺癌细胞发生EMT,增强细胞体外迁移和侵袭能力,同时促进ALDH1^+干样细胞增加。