陡脉冲电场对兔VX_2乳腺移植瘤毛细淋巴管的影响

背景与目的:以细胞膜电穿孔效应为核心的电化学治疗已开展二十余年,其主要机理为脉冲电场的膜穿孔促进外源药物、抗体或基因向胞内弥散。本课题组的前期研究已证实高能陡脉冲电场能使肿瘤细胞膜发生不可逆性电穿孔,从而导致肿瘤细胞的直接死亡。本实验主要观察陡脉冲电场对兔VX2乳腺移植瘤毛细淋巴管的影响。方法:成功建立VX2兔移植性乳腺瘤模型,采用美蓝灌注、酶组织化学5-核苷酸碱性磷酸酶(5′-AMP-ALPase)双重染色法、电镜技术观察陡脉冲处理后瘤体局部毛细淋巴管的形态学变化。结果:经美蓝灌注显示,陡脉冲处理后的癌组织边缘模糊,无线样或环状的淋巴管;双重染色显示,靶区内未见任何呈阳性染色的淋巴管,瘤体边缘仅见毛细淋巴管碎片样结构;透射电镜下见毛细淋巴管的完整性和连续性均被破坏。结论:陡脉冲电场破坏了靶区癌组织边缘的毛细淋巴管,因此可减少治疗后局部癌细胞淋巴转移的可能性。

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察槲皮素 ( Quercetin)对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法 以 MCF- 7细胞复制裸鼠异种移植瘤模型 ,2 4只荷瘤鼠随机分组用药 :对照组、槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组。用药 15 d收集肿瘤标本 ,采用光镜、电镜观察 ,Tunel法行原位凋亡检测 ,免疫组化分析 Ki67、Bcl- 2的表达。结果 1槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组瘤重明显低于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;2 Ki67免疫组化显示 :槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组 Ki67指数 ( Ki67- L I)明显低于对照组 ,差异有显著性 ( P<0 .0 1) ;Bcl- 2免疫组化显示 :槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组与对照组差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;3原位凋亡检测显示 :槲皮素组、5 -Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组凋亡指数 ( AI)高于对照组 ( P<0 .0 1) ,槲皮素 + 5 - Fu组高于槲皮素组、5 - Fu组 ,差异有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。结论 槲皮素可抑制人乳腺癌细胞 MCF-

化疗联合中药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSG-1表达的影响

目的探讨磷酰胺(CTX)与破壁灵芝孢子粉联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长及TMSC-1蛋白表达的影响,为转移性乳腺癌的分子诊断和临床用药治疗提供实验理论依据。方法将乳腺癌细胞株MCF-7注入裸鼠体内,建立移植瘤模型。将24只移植瘤接种成功的裸鼠分为CTX模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组和生理盐水对照组,每组6只。观察各组裸鼠的一般情况、体重及移植瘤体积、重量,用免疫组化检测各组移植瘤细胞TMSG-1蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测各组移植瘤癌细胞凋亡情况。结果 CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组能有效抑制裸鼠皮下移植瘤体积及重量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的抑瘤率高于模型组(P<0.01);CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组移植瘤的TMSG-1蛋白表达明显高于对照组和模型组(P<0.05);流式细胞仪定量分析显示模型组、CTX与破壁灵芝孢子粉联合用药组、CTX与健脾益肾颗粒联合用药组的细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。结论破壁灵芝孢子粉与CTX联合用药、CTX与健脾益肾颗粒联合用药对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长有显著抑制增殖和促凋亡作用,同时还可以上调TMSG-1蛋白的表达起到抗肿瘤转移作用。

聚(对氧环己酮-co-l-苯丙氨酸氮芥)纳米颗粒用于乳腺癌移植瘤治疗

目的:探讨具有缓释功能的聚(对氧环己酮-co-l-苯丙氨酸氮芥)静电喷雾纳米颗粒(PDCM NP)对乳腺癌细胞及裸鼠移植瘤的增殖抑制作用。方法:不同l-苯丙氨酸氮芥含量的PDCM NP分别与人乳腺癌细胞MCF-7共同培养1、3、5、7 d后观察PDCM NP对细胞增殖的影响。荧光标记的PDCM NP与MCF-7细胞共同培养24 h后在荧光显微镜下观察MCF-7对PDCM NP的吞噬情况。0.1 mL 10 mg/mL的PDCM-2 NP混悬液用于治疗皮下种植MCF-7细胞的移植瘤裸鼠20 d,期间测量、记录肿瘤体积变化。20 d后处死,肿瘤组织进行苏木精-伊红染色(HE)、TUNEL染色以统计瘤内细胞坏死、凋亡状况。结果:PDCM NP可抑制MCF-7细胞增殖,其抑制能力与PDCM所含l-苯丙氨酸氮芥量成正比,另外PDCM NP可被MCF-7吞噬,单次瘤内注射PDCM NP可有效抑制MCF-7移植瘤的增殖。结论:PDCM NP可有效抑制MCF-7细胞及其裸鼠移植瘤的增殖。

他莫昔芬治疗乳腺癌异种移植瘤裸鼠子宫病理改变

目的研究经他莫昔芬治疗后乳腺癌异种移植瘤裸鼠的子宫病理改变,及孕激素治疗是否会影响乳腺癌细胞的增生及他莫昔芬的治疗效果。方法将25只裸鼠皮下植入雌二醇(estradiol,E2)缓释片(0.72 mg/60 d),并建立MCF7乳腺癌细胞荷瘤模型,记录肿瘤体积,荷瘤43 d后,将裸鼠采用数字表法随机分为4个组,每组6只,分别为:安慰剂组、黄体酮组、他莫昔芬组、他莫昔芬联合黄体酮组。56 d后,处死裸鼠取瘤体及子宫,进行HE染色及肿瘤生长曲线绘制。结果裸鼠肿瘤生长速度结果显示:与安慰剂组相比,单用黄体酮未促进乳腺癌的额外增生(P>0.05),他莫昔芬治疗后,乳腺癌组织体积明显缩小(P<0.01)。裸鼠肿瘤HE染色可见:肿瘤组织较疏松,肿瘤细胞数量明显减少,可见坏死的肿瘤细胞及中性粒细胞和淋巴细胞浸润。子宫内膜HE染色结果显示,子宫腺体数目增多,腺细胞核大深染,部分出现异型性,出现子宫内膜不典型增生的病理改变。子宫腺体个数统计结果显示:与安慰剂组相比,经他莫昔芬治疗后的子宫内膜腺体数量增加明显(P<0.01),单用孕激素子宫内膜腺体数量无明显增加(P>0.05)。结论在乳腺癌异种移植瘤裸鼠中,他莫昔芬治疗后肿瘤体积明显缩小,但子宫腺体明显增加,呈不典型增生病理改变;单用孕激素未促进乳腺癌细胞明显增生,子宫内膜无明显增生,孕激素的应用不能拮抗他莫昔芬导致的子宫内膜不典型增生。

破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植性人乳腺癌的抑制作用

目的观察破壁灵芝孢子(GLS)粉对人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤生长增殖作用和TMSG-1 m RNA表达的影响。方法建立人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,把30只成瘤裸鼠随机分为五组,每组6只,分别为不同剂量破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)、磷酰胺(CTX)模型组、生理盐水组。用药4 w后观察破壁灵芝孢子粉对裸鼠移植瘤体积、瘤重的影响,并计算抑制率;用流式细胞术(FCM)测定细胞增殖周期和细胞凋亡水平;用半定量RT-PCR检测肿瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达。结果与对照组比较,中剂量和高剂量破壁GLS组(3、4.5 g/kg)、模型组的移植瘤重瘤体积与对照组比较显著减少(P<0.05),中剂量、高剂量破壁GLS组和模型组的肿瘤抑制率分别为36.7%、44.5%、54.2%;用药4 w后,癌细胞S期和G2/M期细胞所占比例下降,相应的G0/G1期细胞增加,药物抑制了细胞的正常增殖,凋亡实验显示药物组细胞凋亡率增加,药物组总体凋亡率高于对照组(P<0.05或P<0.01);RT-PCR结果,破壁GLS组(1.5、3、4.5 g/kg)可使TMSG-1 m RNA表达明显上调,与生理盐水组比较显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论破壁GLS粉具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,同时上调MCF-7细胞裸鼠移植瘤组织中TMSG-1 m RNA的表达发挥潜在的抗肿瘤细胞转移的作用。

喘可治注射液缓解阿霉素对4T1移植瘤小鼠的心脏毒性

目的考察喘可治注射液(淫羊藿、巴戟天等)与阿霉素联合用药对4T1乳腺癌移植瘤小鼠的治疗作用和对阿霉素心脏毒性的缓解作用。方法建立小鼠乳腺癌移植瘤模型。随机分为4组,生理盐水组、阿霉素组、喘可治注射液组、联合用药组。测量各组小鼠生存情况、肿瘤体积、抑瘤率,计算联合用药参数Q值,测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,心脏病理学切片。结果联合用药组生存率高于阿霉素组;联合用药组和阿霉素组的瘤质量及抑瘤率进行比较,没有显著性差异;联合用药组和阿霉素组的CK-MB分别为(1 123.26±166.56)U/L和(1 246.12±170.42)U/L;心脏病理学切片显示联合用药组的心肌损伤较阿霉素组轻。结论喘可治注射液与阿霉素抗肿瘤作用无明显协同效应,但能够降低阿霉素的心脏毒性。

新型黑麦酮酸D衍生物D69抗乳腺癌活性研究

目的研究一种来源于海洋微生物次级代谢产物的新型黑麦酮酸D衍生物D69对人乳腺癌的体内外抑制活性,并初步探讨其分子机理。方法通过镜下观察以及MTT比色法检测D69的细胞毒作用,构建人乳腺癌裸鼠移植瘤模型研究D69体内抗肿瘤活性。结果 D69对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435和ZR-75-30的生长具有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性增强。其对MDA-MB-435和ZR-75-30细胞半数抑制浓度(IC50)分别为0.031μmol/L和0.036μmol/L,而对人永生化乳腺上皮细胞HMEC的抑制作用较低,IC50为0.686μmol/L。人乳腺癌裸鼠移植瘤模型验证D69能显著抑制在体肿瘤的生长。结论 D69可能是一种潜在的乳腺癌化疗药物的先导化合物。

β-榄香烯对小鼠乳腺癌移植瘤放疗的增敏效果及对血管形成的影响

目的研究β-榄香烯对小鼠乳腺癌移植瘤放疗增敏效果以及对乳腺癌移植瘤血管形成的影响。方法采用随机数表法将64只雌性小鼠分为8组,空白对照组(生理盐水组)、3个质量浓度(100,50,25 mg·kg-1)β-榄香烯组、放射组(仅给予放疗)、3个质量浓度(100,50,25 mg·kg-1)β-榄香烯分别联合放疗组,计算肿瘤生长时间及增敏系数。并对几组的移植瘤组织进行血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达情况进行观察。结果与空白对照组比较,各组的移植瘤明显生长(P<0.05)。在移植瘤的增倍时间、增敏系数上,各组同样存在差异(P<0.05),其中50 mg·kg-1β-榄香烯联合放疗组的抑制效果更加明显。结论 50 mg·kg-1β-榄香烯可作为乳腺癌放疗的有效增敏剂,同时可有效的降低VEGF和MVD的表达,从而抑制肿瘤内微血管的形成。

负载盐酸阿霉素的羟基磷灰石玉米醇溶蛋白pH敏感性纳米载体的体内药效学研究

目的:研究负载盐酸阿霉素(DOX)的羟基磷灰石(HA)/玉米醇溶蛋白(Zein)pH敏感型纳米给药系统(HA/Zein-DOX NPs)对小鼠乳腺癌移植瘤的药效,探讨药物新剂型。方法:体内通过构建Balb/c小鼠乳腺癌移植瘤模型,并随机分成生理盐水对照组、DOX组和HA/Zein-DOX NPs组,每隔3日测量小鼠体重及肿瘤体积。尾静脉注射3周,完整剥离肿瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率。然后剥取主要脏器(心、肝、脾、肺、肾),通过H&E染色切片观察,评价HA/Zein-DOX NPs的抗肿瘤效果。结果:移植瘤小鼠肿瘤体积变化结果显示HA/Zein-DOX NPs能有效抑制小鼠乳腺肿瘤生长,且HA/Zein-DOX NPs组小鼠存活时间比生理盐水组和DOX组长,DOX组与HA/Zein-DOX NPs组的抑瘤率分别为50.28%和83.24%。H&E切片表明HA/Zein-DOX NPs组的心脏毒性明显降低,其他器官毒性差异不明显。结论:体内抗肿瘤实验表明DOX和HA/Zein-DOX NPs均能抑制肿瘤生长,HA/Zein-DOX NPs能够显著提高抗肿瘤疗效和小鼠存活率,且能明显降低DOX原料药的心脏毒性。