miR-200家族在西农萨能奶山羊乳腺组织中的表达分析

笔者拟获得山羊miR-200家族乳腺组织表达谱,研究miR-200家族成员之间表达相关性及miR-200家族成员与山羊乳成分的相关性。通过定量PCR,检测miR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳中期和干奶期乳腺组织中的表达量;利用Pearson相关系数分析miR-200家族不同成员表达量之间的相关性,同时分析miR-200家族成员与山羊乳成分之间的相关关系;利用miRanda和TargetScan 6.2软件分析、RNAhybrid和PITA软件预测miR-200家族的靶基因。结果表明,miR-200家族在奶山羊泌乳中期的乳腺组织中的表达量极显著高于干奶期(P<0.01);miR-200a与miR-141之间的表达量显著相关(P<0.05),miR-200b与miR-200c之间的表达量极显著相关(P<0.01);泌乳中期奶山羊乳腺组织中miR-200c的表达量与乳蛋白、非脂固形物(SNF)、冰点(FPD)的含量显著相关(P<0.05);经软件分析及预测发现,miR-200a/miR-141靶向作用于在乳脂合成中起关键作用的基因STAT4。miR-200家族可能对山羊乳蛋白及乳脂合成具有一定的调控作用。

tPA乳腺组织特异性表达载体构建及转基因小鼠建立

以 p KB、pc DNA 3和 p CPA为原始质粒 ,构建 BL G启动子调控的组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)乳腺组织特异性表达载体 p BTA。以 Sal I酶切质粒 p BTA,回收 5 .45 kb基因片段 BL G- t PA- b GHpoly A,通过显微注射 ,导入昆明小鼠受精卵的雄原核内。共注 136 5枚 ,将存活的 10 5 3枚移植到 5 0只同期发情假孕母鼠的输卵管内。怀孕 2 4只 ,共产仔79只 ,上述仔鼠通过 PCR检测 ,结果 19只阳性。Southern blotting检测上述 19份 PCR阳性小鼠基因组 ,其中 4只为整合阳性 ,说明已获得了乳球蛋白启动子调控下的 t PA转基因小鼠 ,为 t PA在小鼠体内表达研究提供了必要条件。

重组腺病毒介导的人凝血Ⅸ因子cDNA在奶山羊乳腺中的分泌表达

利用含ｈＦＩＸｃＤＮＡ和腺病毒片段的质粒ｐＡｄＣＭＶｈＦＩＸ与质粒ｐＪＭ１７共转染２９３包装细胞，制备含ｈＦＩＸ的重组腺病毒颗粒，经纯化、浓缩后通过直接转染活体奶山羊乳腺小叶的方法，建立了ｈＦＩＸ蛋白的乳腺表达系统。转染处理４天后，ｈＦＩＸ蛋白在羊奶中的最高表达量为２１ｎｇ／ｍｌ乳汁，活性检测表明乳汁中的人凝血ＩＸ因子蛋白８０％以上具有生物学活性。此研究结果证实了人凝血ＩＸ因子全长ｃＤＮＡ在奶山羊乳汁中分泌表达的可行性，同时也为验证外源基因在奶山羊乳腺组织中的分泌表达提供了一个快速检测系统。

曲妥珠单抗对乳腺癌化疗患者血管内皮生长因子及乳腺组织凋亡相关分子表达的影响

目的观察曲妥珠单抗对乳腺癌化疗患者血管内皮生长因子及乳腺组织凋亡相关分子表达的影响。方法选择于2017年1月—2018年6月间河南科技大学附属许昌市中心医院治疗的68例乳腺癌患者,按随机数字表法分为两组,每组各34例。对照组接受新辅助化疗,观察组则加用曲妥珠单抗治疗。比较两组血管内皮生长因子(VEGF)、捕获受体3(DcR3)、环氧合酶-2(COX-2)及不良反应。结果治疗后观察组VEGF(87.12±15.20)pg/ml、DcR3(55.61±6.89)pg/ml、COX-2(78.50±7.84)pg/ml,均低于对照组的(95.71±16.38)pg/ml、(92.16±8.74)pg/ml、(98.14±10.25)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论乳腺癌化疗患者接受曲妥珠单抗治疗不良反应少且疗效显著,利于调节VEGF、DcR3、COX-2水平,控制疾病进展。

围刺配合电针对乳腺增生大鼠乳头大小、乳腺病理变化、血清性激素含量和雌激素受体表达的影响

目的:探讨围刺配合电针治疗乳腺增生的作用机制。方法:将40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和药物组。采用己烯雌酚联合黄体酮肌肉注射的方法建立乳腺增生模型。针刺组在大鼠第2对左右乳房进行围刺后,电针30min,并针刺"膻中"穴,留针30min,1次/d,共治疗30d;药物组每日予以三苯氧胺(1.8mg/kg)灌胃。于治疗前,治疗10、20、30d测量各组大鼠第2对乳头高度、直径;于末次治疗后采用放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)含量;取大鼠第2对乳房常规H.E.染色,光镜下观察组织形态表现;运用免疫组化法观察乳腺组织雌激素受体(ER)表达情况。结果:模型组乳头高度、直径均高于正常组(P<0.05),治疗后针刺组和药物组乳头高度、直径均低于模型组(P<0.05)。模型组E2、PRL、T含量明显高于正常组(P<0.05),针刺组和药物组E2、PRL、T含量均低于模型组(P<0.05);模型组P含量低于正常组(P<0.05),针刺组和药物组P含量高于模型组(P<0.05)。模型组与正常组乳腺组织形态比较,乳腺小叶、腺泡、腺导管数目明显较多,腺泡腔和腺导管明显扩张;针刺组和药物组与模型组比较,乳腺小叶、腺泡、腺导管数均减少,腺泡腔及腺导管萎缩。模型组乳腺组织ER阳性细胞表达与正常组相比明显增高(P<0.05),针刺组和药物组大鼠乳腺组织ER阳性细胞表达与模型组比较明显降低(P<0.05)。结论:围刺配合电针能够改善大鼠乳腺组织病理形态,其作用与调节血清性激素含量及降低乳腺组织ER表达有关。