Skp2和p27kip1在乳腺癌组织中的表达及其相关性的研究

目的:检测乳腺癌组织中Skp2和p27kip1 mRNA的表达,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用及其相关性。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测40例乳腺癌组织,20例乳腺纤维腺瘤组织和20例正常乳腺组织中Skp2 mRNA和p27kip1 mRNA的表达,并分析其在乳腺癌组织中的表达水平与临床病理因素的关系。结果:乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显增高(P<0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中差异无统计学意义(P>0.05);而p27kip1 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显降低(P<0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈正相关;p27kip1 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈负相关。2种基因表达均与患者年龄、绝经状况、肿瘤大小及病理学分期无关(P>0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA与p27kip1 mRNA表达呈负相关。结论:乳腺癌组织Skp2和p27kip1参与了乳腺癌的发生、发展过程,两指标的联合检测可能有助于预测乳腺癌预后。

Skp2、C-myc、p27在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的:探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)、C-myc及p27蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、宫颈癌组织中表达及其临床意义。方法:利用免疫组化S-P法检测Skp2,p27和C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌石蜡组织中的表达情况,分析Skp2、C-myc蛋白与宫颈癌临床病理特征的关系,并且分析3者在宫颈癌组织中表达相互关系。结果:Skp2、C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中阳性表达率表达逐渐增高(Skp2:0%,15.38%,57.5%;C-myc:13.33%、15.38%、55.00%);而p27则相反(73.33%,69.23%,35.00%);Skp2的表达与临床分期,分化程度,淋巴结转移有关;C-myc的表达与肌层浸润深度有关;Skp2和p27在宫颈癌中表达呈负相关(r=-0.641,P<0.05);Skp2和C-myc在宫颈癌中表达呈正相关(r=0.646,P<0.05);C-myc和p27在宫颈癌中表达无相关性(r=0.032,P>0.05)。结论:Skp2及C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌发展中表达逐渐升高,而p27表达逐渐降低;Skp2与C-myc表达呈正相关,Skp2与p27呈负相关。C-myc、Skp2、p27联合检测对判断宫颈癌的发生、发展及预后有重要意义。

Jab1和p27kip1蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨Jun激活区域-连接蛋白1(c-Jun activation domain-binding protein1,Jab1)和p27kip1的表达与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC)发生、发展的关系及两种蛋白之间的相关性。方法免疫组织化学SP法检测23例正常喉黏膜(normal laryngeal tissues,NLT)和68例LSCC组织中Jab1和p27kip1的表达。结果NLT和LSCC组织中,Jab1和p27kip1蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0.01)。LSCC中Jab1的过表达与临床分期及颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),p27kip1的表达与颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),Jab1的表达与p27kip1的表达呈负相关(P<0.05)。生存率分析表明,Jab1的过表达与患者的总生存率呈负相关(P<0.05)。结论Jab1可能通过对周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(cell cycle inhibitory protein,CKI)p27kip1蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展,联合检测Jab1及p27kip1蛋白的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为及预后。

Skp2与p27^(kip1)在人子宫颈鳞癌中的表达及其与HPV感染的关系

目的 S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)与p27kip1在人子宫颈鳞癌中的表达及其与人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染的关系。方法选取子宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of cervix,SCC)组织50例、子宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasias,CINs)组织40例,并选取慢性子宫颈炎(chronic cervicitis,CC)组织15例为对照组。用免疫组织化学法检测p27kip1和Skp2的表达情况,并与临床病理特征进行比较;用原位杂交法检测HPV 16/18的表达,及其与Skp2和p27kip1表达的相关性。结果 50例SCC组织中Skp2蛋白表达阳性率为76.0%,高于CC(13.3%,P<0.01)及CINs(57.5%,P<0.05)组织;p27kip1蛋白在SCC组织中表达阳性率为24.0%,低于CC(92.6%,P<0.01)及CINs(52.5%,P<0.05)组。Skp2和p27kip1的表达在淋巴结转移方面差异有统计学意义(P<0.05),而在年龄、分化程度、临床分期方面差异均无统计学意义(均P>0.05)。子宫颈鳞癌组织中HPV 16/18 DNA表达阳性率为74.0%,高于CC组的13.3%,组间差异有统计学意义(P<0.01);但与CINs组表达阳性率(62.5%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。HPV 16/18感染与Skp2蛋白表达之间呈正相关(r=0.238,P<0.05),HPV 16/18感染与p27kip1蛋白表达之间呈负相关(r=-0.245,P<0.05)。结论 Skp2的高表达和p27kip1蛋白低表达与子宫颈鳞癌的发生、转移以及与HPV感染有密切关系。

人类错配修复基因hMSH2及p27在结直肠癌及癌旁组织中的表达及意义

目的探讨人类错配修复基因hMSH2和p27在结直肠癌及癌旁组织中的表达及其意义。方法以免疫组化方法检测54例结直肠癌组织中hMSH2和p27蛋白的表达。结果结直肠癌组织中hMSH2蛋白的阳性表达率为70.4%,显著高于癌旁组织的38.9%(P<0.05);p27蛋白的阳性表达率为40.7%,显著低于癌旁组织的75.9%(P<0.01)。结直肠癌癌组织中hMSH2蛋白的表达与肿瘤临床病理特征无相关性;p27蛋白的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期相关。hMSH2和p27蛋白在结直肠癌组织中的表达呈负相关。结论hMSH2表达异常和抑癌基因p27表达下调可能与结直肠癌的发生有关。

PPAR-γ和p27^(kip1)、Skp2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)-γ、p27kip1和细胞S期激酶相关蛋白(Skp)2蛋白在肝癌发生发展过程中的作用。方法:肝细胞癌组织标本57例(肝癌组)和正常肝组织标本(对照组)20例。采用免疫组织化学方法检测2组PPAR-γ、p27kip1及Skp2蛋白的表达,分析它们之间及其与肝癌临床病理特征的关系。结果:肝癌组PPAR-γ及Skp2蛋白的阳性表达率高于对照组,p27kip1蛋白阳性表达率低于对照组(P<0.05),PPAR-γ蛋白与Skp2、P27kip1蛋白在不同TNM分期中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。PPAR-γ蛋白与Skp2、p27kip1蛋白表达无相关性(P>0.05);Skp2与p27kip1蛋白的表达呈负相关(r=-0.307,P=0.020)。Skp2蛋白低表达组的1、3、5年生存率高于高表达组(P<0.001)。结论:PPAR-γ和Skp2蛋白表达与肝细胞癌的恶性生物学行为密切相关,Skp2可作为判断肝细胞癌预后的指标。

胃癌和癌旁组织中hMSH2和p27蛋白的表达及其意义

背景:错配修复(MMR)基因是保证DNA复制高保真度的重要基因,与消化道肿瘤的发生密切相关。抑癌基因p27可阻止细胞周期G1/S期转换,p27表达下调在肿瘤的进展、转移过程中起有一定作用。目的:探讨MMR基因hMSH2和p27在胃癌和癌旁组织中的表达及其意义。方法:以免疫组化方法检测93例胃癌患者癌组织和癌旁组织中hMSH2和p27蛋白的表达。结果:胃癌组织中hMSH2蛋白的阳性表达率为65.6%,显著高于癌旁组织的38.7%(P<0.01);p27蛋白的阳性表达率为46.2%,显著低于癌旁组织的80.6%(P<0.01)。胃癌组织中hMSH2蛋白的表达与肿瘤临床病理特征无相关性;p27蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关。hMSH2和p27蛋白在胃癌组织中的表达呈负相关。结论:MMR基因hMSH2表达异常和抑癌基因p27表达下调可能与胃癌的发生有关。

喉鳞状细胞癌中Skp2和p27蛋白的表达

目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P<0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P<0.01)。p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P<0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P<0.01)。将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001)。结论Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用。

棘豆素对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞的作用研究

目的研究棘豆素(2',4'-dihydroxychalcone,TFC)对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞的作用,并探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测药物对细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色、荧光显微镜观察细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期的变化;Western blot检测药物对肿瘤细胞中P27kip1和PTEN蛋白表达的影响。结果 TFC能显著抑制PC-3细胞的增殖,细胞呈现凋亡形态学改变,凋亡率明显增加,细胞周期阻滞于G0/G1期。此外,P27kip1和PTEN蛋白表达量明显增加。结论 TFC通过诱导PC-3细胞凋亡抑制肿瘤细胞增殖,可能与其G0/G1细胞周期阻滞,以及PTEN和P27Kip1蛋白表达上调有关。

P21P27和P53蛋白在结肠癌组织中的表达

目的分析研究P21、P27和P53蛋白在结肠癌组织中的表达水平及关联。方法选择2011年2月至2014年11月来我院就诊的144例经外科手术切除的原发性结肠癌组织标本进行分析研究。采用免疫组织化学染色方法进行染色,根据相关评价标准计算出阳性细胞率和染色强度,并最终确定阳性率等级。结果P21蛋白在有淋巴结转移的结肠癌组织中的阳性率达70.5%,高于无淋巴结转移的结肠癌的阳性率(30.3%),差异具有统计学意义(P<0.05),与其他临床病理因素的关联性很小(P>0.05)。P27蛋白在无淋巴结转移的结肠癌组织中的阳性率达84.8%,高于有淋巴结转移的结肠癌的阳性率(55.1%),差异具有统计学意义(P<0.05);在结肠癌高中分化阳性率(80.6%)高于低分化阳性率(69.4%),差异具有统计学意义(P<0.05),但是与其他临床病理因素的关联性很小(P>0.05)。P53蛋白在结肠癌组织的阳性表达率与TNM分期、分化程度及浸润深度相关性大(P<0.05),但是与其他临床病理因素的关联性小(P>0.05)。结论 P21、P27、P53蛋白表达可以作为结肠癌的辅助诊断指标,3种蛋白在判断结肠癌的生物学行为上具有协同作用。

黄芩苷通过调控c-Myc介导的细胞周期抑制胆管癌细胞增殖

目的探究黄芩苷(BC)对人胆管癌(CCA)细胞QBC939和RBE增殖的影响及其潜在机制。方法取对数生长期QBC939和RBE细胞,不同浓度的BC处理细胞24 h后,采用CCK-8法分别检测BC对CCA细胞增殖及敲低原癌基因蛋白质(c-Myc)后对BC引起细胞增殖活性改变的影响;高倍显微镜观察BC对细胞生长状态的影响;流式细胞术检测BC对CCA细胞周期的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)实验分别检测BC及小干扰RNA(siRNA)敲低CCA细胞中c-Myc后对周期相关蛋白周期素依赖激酶抑制剂(p27)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及c-Myc表达的影响。结果与0μmol/L组相比,BC明显抑制QBC939和RBE细胞的增殖活性(P<0.01),且高倍显微镜下观察到细胞生长减缓;BC可将QBC939细胞周期阻滞于S期(P<0.05);随着BC浓度的增加,p27的蛋白水平明显上调,而Cyclin D1则显著降低(P<0.01);BC可下调c-Myc的蛋白表达,且敲低c-Myc后p27和Cyclin D1蛋白表达的变化趋势与BC处理时一致(P<0.05);单独敲低c-Myc后可明显抑制QBC939和RBE细胞的存活率(P<0.01),并能进一步增强BC的抑制作用。结论BC通过抑制c-Myc信号通路阻滞细胞周期,进而抑制CCA细胞的增殖。

p27^(kip1)与妇科肿瘤

p27^(kipl)(p27)是一种多功能周期素依赖激酶抑制剂(CDKI),直接对细胞周期实行负性调控,还可作为细胞外刺激信号的潜在媒介调控细胞周期另外,p27还对细胞分化,增殖和凋亡以及对实性肿瘤细胞的抗药性,某些细胞的炎性损伤发挥作用。综述p27与妇科肿瘤关系的研究。

p27的表达在胃癌演变过程中的意义

目的观察周期素依赖激酶抑制剂p27在胃炎、胃上皮内瘤变及胃癌中表达量的变化及其可能的影响因素。方法应用免疫组化法,检测p27在慢性胃炎、萎缩性胃炎、肠上皮化生性胃炎、胃上皮内瘤变及胃癌组织中的表达,分析p27的表达状况与胃癌临床参数的关系。结果 p27在慢性胃炎组、萎缩性胃炎组和肠上皮化生性胃炎组中的表达水平较高,在上皮内瘤变中表达有所降低,在胃癌组织中的表达水平明显低于另4组,与上皮内瘤变组比较,差异有统计学意义。胃癌中p27的表达在不同浸润深度、TNM分期,是否淋巴转移及是否存在Hp感染中差异明显,有统计学意义。结论 p27虽然不能作为早期胃癌的筛查指标,但可考虑作为反映肿瘤恶性表型的一个指标。

CyclinD1、p21^(WAF1)、p53及Ki-67在肝细胞癌中的表达及与预后的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染色,分析其表达水平与HCC病理特征的关系,并进行生存分析。结果 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67在HCC中的阳性表达率分别为38.8%、40.5%、65.4%及80.0%,均明显高于癌旁肝组织(分别为19.0%、11.5%、0.0%、6.3%,P<0.005)。相关分析显示,cyclin D1阳性表达与核分级呈正相关(P=0.041),p21WAF1及p53阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.032、P=0.031)和血管浸润(P=0.036、P=0.011)呈正相关,Ki-67阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.004)、核分级(P=0.045)和血管浸润(P=0.001)呈正相关。生存分析显示,cyclin D1及Ki-67高表达者预后较差。Ki-67阳性表达与p53(P=0.000)及p21WAF1(P=0.047)阳性表达有明显相关性,其他各蛋白之间表达无明显相关。Cox回归模型分析显示,肿瘤大小(P=0.042)、肿瘤数目(P=0.004)及血管浸润(P=0.000)为HCC的独立预后因素。结论 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67可能参与了HCC的生物学进程;cyclin D1及Ki-67阳性表达对HCC预后的判断有一定价值。

粗毛豚草素对人肺癌细胞A-549的抑制作用研究

目的探讨粗毛豚草素体外对人肺癌细胞A-549增殖的抑制作用及其作用机制。方法粗毛豚草素作用人肺癌细胞A-549后,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期蛋白cyclin D1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21和p27的表达;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达。结果 A-549细胞经不同浓度(15、30、60、120μmol/L)粗毛豚草素作用72h后,细胞存活率分别为(57.30±3.92)%、(43.91±4.32)%、(17.82±2.73)%和(13.20±2.46)%,均低于对照组(96.30±2.08)%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。粗毛豚草素(15、30μmol/L)作用A-549细胞24h,可使细胞发生G1/S期阻滞。3种浓度(15、30、60μmol/L)的粗毛豚草素作用24h,可抑制A-549细胞周期蛋白cyclinD1、CDK4的表达,使p21蛋白表达增高,但对p27蛋白表达无明显影响。粗毛豚草素(15、30、60μmol/L)可显著抑制PCNA表达,其表达强度分别为(35.7±2.3)%、(26.6±2.1)%和(14.1±2.2)%,均低于对照组(45.2±3.3)%(P﹤0.01)。结论粗毛豚草素可抑制肺癌细胞A-549增殖,其机制可能与改变细胞周期分布,下调cyclinD1、CDK4表达,上调p21的表达等有关。

p15和nm23基因在子宫内膜癌中的表达

目的:探讨p15和nm23在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SP法检测60例子宫内膜癌组织及10例正常子宫内膜组织中p15和nm23的表达,并分析两基因表达与子宫内膜癌临床病理学参数的关系。结果:p15在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的阳性表达率分别为66.7%和100%,差异有统计学意义(P<0.01);nm23在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的阳性表达率分别为60%和70%,差异无统计学意义(P>0.05);p15在不同组织学分级子宫内膜癌组织中的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05);nm23在不同临床分期和有无淋巴结转移子宫内膜癌组织中的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果示组织学分级是p15的表达的影响因素(OR=8.825,95%CI为2.214～35.178,P<0.05),未见影响nm23表达的因素入选;p15和nm23在子宫内膜癌中的表达呈正相关(rs=0.754,P<0.01)。结论:p15的表达对判断子宫内膜癌患者的预后具有重要意义。

口腔黏膜白斑及鳞癌中p57^(KIP2)蛋白的表达及其意义

目的通过检测p57KIP2蛋白在不同程度异型增生的口腔黏膜白斑及鳞癌中的表达,以探讨其在口腔黏膜白斑及鳞癌中的意义。方法以10例正常口腔黏膜作对照,采用免疫组织化学S-P法回顾性研究79例口腔白斑和67例口腔鳞癌中p57的表达情况。统计分析不同程度异型增生中及鳞癌中p57KIP2蛋白表达的差异。结果 79例口腔黏膜白斑组织中p57KIP2表达率为77.2%(61/79),显著低于正常口腔黏膜(10/10)(χ2=22.510,P<0.01)。在白斑组织中,随着异型增生程度增高,p57KIP2蛋白的表达率有下降的趋势(85.0%,70.0%,68.4%),但差异无统计学意义。p57在轻度异性型增生白斑中的表达显著低于正常黏膜组织(P<0.05),而在鳞癌中的表达又显著低于中重度异型增生白斑(P<0.05)。结论口腔黏膜白斑组织中的p57KIP2蛋白表达显著低于正常口腔黏膜组织,提示从正常口腔黏膜到作为癌前病变的口腔黏膜白斑的发展过程中存在p57KIP2蛋白的表达丧失。p57是预测口腔鳞癌进展和预后的一个生物指标。

小干扰RNA沉默巨噬细胞移动抑制因子基因对肝癌细胞p27表达的影响

目的观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和细胞周期调控因子p27在肝细胞癌中表达的相互关系，探讨小干扰RNA（siRNA）沉默MIF基因对肝癌细胞p27表达的影响。方法免疫组织化学法和荧光定量PCR法检测MIF、p27的蛋白和mRNA在肝癌及其癌旁组织中的表达情况。化学合成MIF siRNA和对照siRNA，脂质体法转染肝癌细胞PLC和Hep3B，荧光定量PCR法检测MIF和p27 mRNA在实验组及对照组中的表达情况。根据不同资料分别采用x。检验、Logistic回归分析或单因素方差分析。结果MIF蛋白及其mRNA在肝癌组织中过表达，在癌旁组织中低表达；p27蛋白及其mRNA在癌组织中低表达，在癌旁组织中高表达。Logistic回归分析提示MIF为肝癌发生的危险因素，p27为保护因素。MIF mRNA在肝癌细胞株中过表达（F=61．036，P〈0．01），p27 mRNA在正常肝细胞L02中高表达（F=529．853，P〈0．01）。经MIFsiRNA转染后，MIF mRNA在PLC及Hep3B中的表达水平降低，并且呈剂量依赖关系（F值分别为320．1和201．2，尸值均〈0．01）；p27 mRNA伴随MIFmRNA的降低而增加（F值分别为419．4和459．9，P值均〈0．01）。结论MIF在肝细胞癌中过表达，MIF siRNA能特异性抑制其在肝癌细胞中的表达；MIF可能参与了p27基因表达的调控。