BRCA1/2胚系突变对三阴性乳腺癌患者放疗后第二原发肿瘤的影响

背景与目的:乳腺癌易感基因1/2(BRCA1/2)的编码产物在维持机体基因组稳定性方面发挥着重要的作用。BRCA1/2致病突变是否会导致机体对放射线的脆弱度增加,从而诱发第二原发肿瘤尚不清楚。本文旨在探讨BRCA1/2基因胚系突变的三阴性乳腺癌患者术后接受放射治疗是否是增加罹患第二原发肿瘤的危险因素。方法:基于复旦大学附属肿瘤医院2007年1月1日—2014年12月31日收集的回顾性三阴性乳腺癌队列(292例为BRCA1/2突变的女性三阴性乳腺癌患者),针对其开展分析,分别在非BRCA1/2胚系突变患者(n=261)与BRCA1/2胚系突变患者(n=31)中进行多元logistic回归分析,以评估影响第二原发肿瘤的风险因素,并对上述两人群中的分析结果进行交互作用分析,从而评估BRCA1/2胚系突变与放疗的交互作用。本研究除特殊说明外,均采用双侧检验且检验水准α=0.05。本研究所有样本的获得与使用均得到了复旦大学附属肿瘤医院伦理委员会的批准(050432-4-2108),且每个患者均提供了书面知情同意。结果:在BRCA1/2胚系突变患者中进行多元logistic回归分析提示术后接受放疗相对于未接受放疗显著增加了第二原发肿瘤的风险[比值比(odds ratio,OR)=2.479,95%CI:1.971~3.118,P<0.001)。而在非BRCA1/2胚系突变患者中,放疗对第二原发肿瘤的效应则不显著。BRCA1/2胚系突变与放疗对于第二原发肿瘤的发生无显著的交互作用(OR=9.71,95%CI:0.32~295.25,P=0.193)。结论:虽然统计学分析结果显示,与未接受放疗的患者相比,BRCA1/2胚系突变的患者术后放疗会增加罹患第二原发肿瘤的风险,但BRCA1/2胚系突变与放疗对第二原发肿瘤的发生并无相互交叉作用,因而BRCA1/2胚系突变患者术后接受放疗可能并不会增加罹患第二原发肿瘤的风险。

BRCA1蛋白在犬乳腺肿瘤中的表达及意义

犬乳腺肿瘤是犬最常见的肿瘤之一，它的发生、发展与多种因素有关。人类医学研究认为，乳腺肿瘤易感基因1（Breastcancersusceptibilitygene1，BRCAl）是一种肿瘤抑制基因，编码抑癌蛋白，对肿瘤生长起抑制作用。国外关于犬乳腺肿瘤的研究也显示其表达下降或失表达对乳腺癌的发生发展有重要作用。

《中国肿瘤临床》文章推荐:BRCA1/2突变乳腺癌临床诊治新进展——机遇和挑战

BRCA1和BRCA2是乳腺癌迄今最常见的两个高外显率易感基因。BRCA1/2胚系突乳腺癌具有特殊的发病机制及临床病理特征,其临床决策有别于散发性乳腺癌。随着基因测序技术的发展,越来越多的BRCA1/2突变乳腺癌被检测出。BRCA1/2突变乳腺癌的相关临床管理越来越得到重视。为此,2021年第49卷第23期《中国肿瘤临床》的家族遗传性肿瘤专栏-专家论坛栏目刊发了由北京大学肿瘤医院家族遗传性肿瘤中心主任解云涛教授撰写的《BRCA1/2突变乳腺癌临床诊治新进展—机遇和挑战》一文。

乳腺癌高危人群BRCA1/2基因突变检测的临床应用价值

【目的】探讨乳腺癌高危人群乳腺癌易感基因(BRCA1/2)基因突变检测的临床应用价值。【方法】采用高通量基因测序法对200例乳腺癌高危女性进行BRCA1/2易感基因检测,分析受检者BRCA1/2基因突变情况。根据乳腺癌发病风险分为低危组、普通组和高危组,对高危组进一步进行乳腺癌B超以及钼靶筛查,比较检测结果与乳腺癌筛查结果的一致性。对筛查发现的可疑者及高危人群进行穿刺活检,对乳腺癌确诊患者进行治疗。随访2年,比较三组人群乳腺癌发病情况和确诊患者的治疗效果。【结果】本次基因检测共获得32个突变位点,去重后为19个突变位点,BRCA1突变7个(36.84%),BRCA2突变12个(63.16%),其中6个(31.58%)位点未在本研究所使用的数据库中检出。200例中共发现21例(10.50%)突变携带者,其中15例(7.50%)携带有致病性突变,设为高危组;6例(3.00%)为非致病性突变,设为低危组;其余179例(89.50%)未携带突变,设为普通组。高危组乳腺癌筛查结果BI-RADS分级4~5级共12例,两种检查方法乳腺癌高危人群诊断符合率为80.00%;随访2年内,BRCA1/2突变携带组21例受检者乳腺癌发病率显著高于179例普通组(P<0.05),平均发病年龄显著低于普通组(P<0.05)。BRCA1与BRCA2突变携带乳腺癌患者的病理完全缓解率与未携带乳腺癌患者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】对乳腺癌高危人群进行BRCA1/2基因突变检测,其乳腺癌风险预测准确性与乳腺癌常规筛查有很高的一致性,且携带有致病性突变的患者乳腺癌发病率更高、发病年龄更小,预后也更差。

散发性乳腺癌组织中BRCA1基因启动子甲基化与蛋白表达的相关性

目的:探讨BRCA1基因启动子甲基化对BRCA1蛋白表达的影响,及与散发性乳腺癌发病之间的关系。方法:甲基化特异性PCR(MSP)法检测51例散发性乳腺浸润导管癌和10例乳腺良性组织的BRCAl基因启动子甲基化状态,SP法检测BRCA1蛋白表达水平。结果:10例乳腺良性组织中均未检测到BRCA1启动子的异常甲基化,BRCA1蛋白在细胞核均阳性表达,其中70%(7/10)为强阳性表达。在51例散发性乳腺浸润性导管癌组织中检测到7例(13.73%)BRCA1启动子发生异常甲基化,其余44例(86.27%)未检测到BRCA1启动子甲基化。7例BRCA1启动子甲基化的组织均未见BRCA1蛋白细胞核阳性表达(0/7),仅有1例BRCA1蛋白细胞质表达;44例未检测到BRCA1启动子甲基化的浸润性导管癌中,30例(68.18%)BRCA1蛋白在细胞核阳性表达,14例(31.82%)BRCA1蛋白在细胞核阴性表达。BRCA1启动子甲基化与BRCA1蛋白核低表达密切相关,χ2=11.959 1,P=0.000 5;BRCA1蛋白的表达在乳腺良性组织与癌组织之间差异有统计学意义,χ2=4.587 9,P=0.032。结论:乳腺癌易感基因BRCA1启动子甲基化可抑制BRCA1蛋白表达,并影响其参与散发性乳腺癌的发生发展过程。

新疆地区不同肿瘤家族史的乳腺癌患者BRCA1/2基因突变的分析及临床意义

目的:分析有不同家族史的乳腺癌患者BRCA1/2基因突变的临床意义。方法:对98例有家族史的乳腺癌患者,取外周静脉血进行BRCA1/2基因检测,采用高效液相色谱分析(DHPLC)预筛,结果经DNA测序验证。结果:98例患者的BRCA1/2突变率为20.41%;同时有乳腺癌及卵巢癌家族史的突变率明显高于仅有一种家族史的患者;随着家族中患癌人数增加(2、3、4人),BRCA1/2突变率也明显增高(16.25%、33.3%、66.67%)。结论 :在乳腺癌患者中,同时有乳腺癌和卵巢癌家族史,BRCA1/2突变率明显增高,且随着家族中患癌人数的增加,BRCA1/2突变检出率呈增高趋势。

散发性三阴乳腺癌中BRCA1启动子甲基化与蛋白表达

目的:通过检测散发性三阴乳腺癌(TNBC)中乳腺癌易感基因(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)启动子甲基化和蛋白表达,探讨BRCA1与散发性TNBC的关系。方法:应用重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)法检测50例散发性TNBC组织及配对癌旁组织中BRCA1启动子甲基化状态,用免疫组织化学方法检测上述组织中BRCA1蛋白的表达情况,分析BRCA1启动子甲基化与蛋白表达的相关性。结果:散发性TNBC组织中BRCA1启动子甲基化率为42.0%(21/50),癌旁组织未检测出甲基化,两者比较差异有统计学意义(P=0.000)。BRCA1蛋白在散发性TNBC癌组织中的表达率为32.0%(16/50),明显低于癌旁组织68.0%(34/50)(P<0.05)。散发性TNBC癌组织中BRCA1蛋白表达与启动子甲基化呈负相关(r=-0.323,P=0.022)。结论:BRCA1启动子的高甲基化引起BRCA1蛋白表达下降或缺失,可能是散发性TNBC重要的发病机制之一。

朝、汉族乳腺肿瘤中BRCA1、p53的表达及临床分析

目的探讨延边地区朝、汉族妇女乳腺癌BRCA1和p53的表达及其意义。方法利用免疫组织化学技术,检测124例乳腺癌、14例乳腺纤维腺瘤中BRCA1和p53的表达。结果BRCA1在乳腺癌中的表达率59.7%,纤维瘤为92.9%(P<0.05);BRCA1表达与乳腺癌组织学分级呈负相关(r=-0.306,P=0.021);BRCA1与年龄、组织学类型、TNM分期及ER&PR状况无关;p53在乳腺癌表达率38.7%,纤维腺瘤无表达(P<0.05),Ⅲ期p53表达率高于Ⅰ、Ⅱ期,Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅲ期与Ⅱ期之间存在显著性差异;乳腺癌BRCA1与p53表达之间无相关性;BRCA1和p53表达率在朝、汉族之间无显著性差异(P>0.05)。结论BRCA1在乳腺癌表达低于良性肿瘤;乳腺癌组织分级升高,BRCA1的表达率降低;TNM分期高,p53表达率高;BRCA1与p53表达之间无明显相关;BRCA1及p53在朝、汉族乳腺癌中表达无显著差异。

乳腺癌BRCA1基因突变及其蛋白表达研究

目的 :探讨散发性乳腺癌的BRCA1基因突变及其蛋白表达与临床病理因素的关系。方法 :收集乳腺癌患者外周血 10 2份、新鲜肿瘤组织 30份 ,分别采用PCR SSCP、DHPLC和基因测序对BRCA1基因第 2、8- 1、8- 2和 2 0外显子进行突变检测 ;对 10 4例肿瘤组织切片进行免疫组化染色标记BRCA1蛋白表达 ,分析免疫组化结果与临床资料的关系。结果 :分别在外显子 8- 1和 8- 2的 2 882 1和 2 8978位点上发现 3例碱基缺失和置换现象。BRCA1蛋白在乳腺癌组织中表达下降 ,且与患者生存状态有关。结论 :在中国散发性乳腺癌患者中BRCA1基因外显子 2、8和 2 0的突变率较低 (2 3% ) ,可以认为在普通中国人群中乳腺癌的发生与该部分碱基序列突变的关系不大 。

LSG1基因在乳腺癌患者癌组织中表达水平

目的:探讨60S大亚基出核转运GTP酶1(LSG1)基因在乳腺癌患者癌组织中的表达水平。方法:选取2021年3月-2023年11月某院术前未接受任何治疗的乳腺癌患者67例为研究对象,术中采集患者癌组织与癌旁组织标本。采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qRT-PCR)检测LSG1 mRNA水平,比较不同组织和不同特征乳腺癌患者LSG1 mRNA水平;采用蛋白质印迹法(Western blot)测定LSG1蛋白表达。结果:乳腺癌患者癌组织LSG1 mRNA表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学分级Ⅲ级、肿瘤直径≥2 cm及TNM分期Ⅲ期的乳腺癌患者癌组织LSG1 mRNA水平分别高于组织学分级为I~II级、肿瘤直径<2cm及TNM分期I~II期的乳腺癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);乳腺癌患者癌组织LSG1蛋白、β-actin(3.04)表达水平高于癌旁组织(β-actin为0.44),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌患者癌组织中LSG1 mRNA和蛋白水平呈高表达,且不同组织学分级、肿瘤直径及TNM分期的乳腺癌患者癌组织中LSG1 mRNA表达水平不同,可为临床新的诊疗方案制定提供参考。

大剂量维生素C通过减少糖酵解和蛋白质合成抑制乳腺癌细胞增殖

目的:观察大剂量维生素C对乳腺癌细胞增殖及荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,并探索其中的机制。方法:以乳腺癌细胞Bcap37和MDA-MB- 453为体外研究对象,分别给予小(0.01 mmol/L)、中(0.10 mmol/L)、大(2.00 mmol/L)剂量的维生素C。采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖;蛋白质印迹法检测葡萄糖转运蛋白1(Glut1)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达;乳酸脱氢酶比色法测定乳酸含量。同时,取10只6周龄雌性BALB/c裸鼠,采用皮下接种乳腺癌Bcap37细胞建立荷瘤小鼠移植瘤模型,取5只小鼠腹腔注射维生素C( 4 g/kg ),观察肿瘤重量和小鼠体质量的变化。结果:体外细胞学实验结果显示,与空白对照组比较,大剂量维生素C作用下Bcap37和MDA-MB- 453细胞增殖受到抑制(均 P < 0.01 ),Glut1转运蛋白表达减少(均 P <0.05),乳酸分泌量减少(均 P < 0.01 ),mTOR信号通路相关蛋白表达水平下调(均 P < 0.05 )。体内实验结果显示,与对照组比较,大剂量维生素C组肿瘤重量明显减小( P <0.05),但体质量增长无明显变化。结论:大剂量维生素C可抑制乳腺癌细胞增殖,这一效果可能与大剂量维生素C抑制乳腺癌细胞能量摄取和下调mTOR信号通路有关。

三阴性乳腺癌的超声图像特征及其与P53、BRCA1蛋白表达的相关性

目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)的超声图像特征,分析其与P53、BRCA1蛋白表达的相关性。方法将168例乳腺癌患者根据孕激素受体、雌激素受体、人表皮生长因子受体-2的不同表达,分为TNBC组61例和非TNBC组107例。两组均于术前1周行超声检查,观察肿瘤边界、形态、内部钙化、后方回声、病灶大小等情况,彩色多普勒观察病灶内部及周围血流情况。术后行免疫组化检测P53、BRCA1蛋白表达情况,分析TNBC患者P53、BRCA1蛋白表达与超声特征的相关性。应用Logistic回归分析TNBC患者P53、BRCA1阳性表达的影响因素。结果TNBC组病灶边缘毛刺、微钙化比例、BRCA1阳性表达比例均低于非TNBC组,TNBC组病灶富血供、P53阳性表达比例均高于非TNBC组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。P53阳性者后方回声增强比例和富血供比例均高于阴性者,BRCA1阳性者后方回声增强比例和富血供比例均低于阴性者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,血流分级是TNBC患者P53、BRCA1阳性表达的影响因素(OR=2.958、0.321,均P<0.05)。结论TNBC患者的超声图像特征表现为毛刺征、微钙化较少,以富血供为主,P53阳性表达较多,BRCA1阳性表达较少;且P53和BRCA1阳性表达均与血流分级有关。

231例乳腺癌患者乳腺癌易感基因BRCA1的突变检测及分析

目的:研究中国妇女BRCA1基因突变与遗传性、家族性和早发性乳腺癌的关系。方法:选取231例乳腺癌患者石蜡标本,显微切割提取癌组织,酚抽提法提取DNA,紫外光分光光度仪测定DNA纯度及含量,PCR扩增exon2、exon11和exon20片段直接测序,与基因库序列比对分析其突变情况。结果:231例乳腺癌中发现突变33例,突变率为14.28%,统计分析发现,≤35岁年龄组与36～45岁组比较,P值为0.724,无统计学差异。46～55岁年龄组与>55岁组比较,P值为0.868,亦无统计学差异。将上述两组合并后统计发现,≤45岁年龄组患者突变率高于>45岁组患者,P值为0.002,,有显著统计学差异。结论:BRCA1突变与乳腺癌尤其是早发性乳腺癌密切相关。

乳腺癌患者BRCA1基因启动子区甲基化模式的初步研究

目的:探讨在散发性乳腺癌患者中乳腺癌易感基因1(breastcancer1,BRCA1)启动子区13个CpG二核苷酸甲基化模式与肿瘤发生的关系。方法:用新发展的甲基化敏感单链构象分析法methylationsensitivesinglestrandconformationanalysis,MSSSCA及DNA测序技术,对66例乳腺癌患者的癌组织、癌旁组织、外周血细胞中的BR-CA1基因启动子区甲基化模式进行研究。结果:发现有3种不同的甲基化模式。其中16例(24.2%)为高度甲基化,3例(4.5%)为部分甲基化,其余为未甲基化。结论:在部分散发性乳腺癌中BRCA1基因是高度甲基化的,它可能是BRCA1基因表达下降的机制之一。

三阴型乳腺癌FOXA1和BRCA1的表达及其对预后的意义

目的:研究三阴型和非三阴型乳腺癌中叉头框蛋白A1(FOXA1)、BRCA1蛋白、P53和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况和预后意义。方法:收集暨南大学附属第一医院乳腺癌的标本113例,根据免疫组化检测雌激素受体、孕激素受体和HER-2的表达情况分为三阴型(A组)、luminal型(B组)及HER-2过表达型(C组)乳腺癌。应用免疫组化EnVision两步法检测3组样本FOXA1、BRCA1、P53和VEGF的表达情况。结果:FOXA1总的阳性表达率为63.7%(72/113),A组阳性表达率为45.2%(19/42),B组为88.0%(44/50),C组为42.9%(9/21),FOXA1在3组中的表达存在显著差异(P<0.01);BRCA1总的阳性表达率为47.8%(54/113),A组阳性表达率为66.7%(28/42),B组为44.0%(22/50),C组为19.0%(4/21),BRCA1在3组中的表达存在显著差异(P<0.01);FOXA1阳性表达率在Ⅰ～Ⅱ期临床分期和组织学1～2级中高于阴性表达组(P<0.05),FOXA1阳性表达率与P53、VEGF表达和复发率呈负相关(P<0.05);BRCA1阳性表达率在Ⅲ期临床分期和组织学3级中高于阴性表达组(P<0.05),BRCA1阳性表达率与P53、VEGF表达和复发率呈正相关(P<0.05)。结论:FOXA1和BRCA1在乳腺癌中表达存在差异。BRCA1可作为三阴型乳腺癌预后不良的指标。

散发性乳腺癌及乳腺不典型导管增生组织BRCA1基因启动子区甲基化分析

目的了解散发性乳腺癌及癌旁增生组织、乳腺不典型导管增生组织BRCA1基因启动子区甲基化状态,探讨其与乳腺癌发生的关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)结合巢式PCR技术,研究23例散发性乳腺癌及其癌旁增生组织、6例乳腺不典型导管增生组织及5例健康成人女性外周血淋巴细胞中BRCA1基因启动子区甲基化状态。结果5例健康成人女性外周血淋巴细胞均表现BRCA1基因启动子区甲基化阴性;23例原发性乳腺癌组织中,BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化率为65.22%(15/23);癌旁增生组织检出CpG岛甲基化者11例,甲基化率为47.83%(11/23),且均为癌组织阳性患者;6例乳腺不典型导管增生组织中,BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化阳性者2例,甲基化率为33.33%(2/6);统计学检验结果表明,乳腺癌、癌旁增生组织之间,BRCA1基因启动子区甲基化阳性率无显著差异。结论BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化是散发性乳腺癌发生过程中的早期事件,可能在乳腺癌发生中和乳腺增生病癌变过程中起重要生物学作用。

BRCA1基因在散发性乳腺癌中的表达及异常甲基化

目的通过检测乳腺癌易感基因1(BRCA1)基因在散发性乳腺癌中的表达情况及其启动子甲基化状态,探讨BRCA1基因与散发性乳腺癌的关系。方法应用实时荧光定量PCR的方法和免疫组织化学方法分别检测BRCA1mRNA和蛋白在60例散发性乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织及30例乳腺良性病变组织中的表达情况;应用重亚硫酸盐测序PCR(BPS)联合TA克隆测序方法检测上述组织中BRCA1启动子CpG岛的甲基化状态,分析BRCA1基因表达和启动子甲基化相关性。结果 BRCA1mRNA和蛋白在散发性乳腺癌组织中的相对表达水平分别低于癌旁正常组织及乳腺良性病变组织,差异有统计学意义(P<0.001)。乳腺癌组织中BRCA1蛋白的表达率为51.7%(31/60),明显低于癌旁正常乳腺组织的71.7%(43/60)及乳腺良性病变组织的66.7%(20/30),差异有统计学意义(P<0.001);散发性乳腺癌组织中BRCA1启动子甲基化率为31.7%(19/60),癌旁正常乳腺组织及乳腺良性病变组织均未检测出甲基化,差异有统计学意义(P=0.000);BRCA1蛋白表达与其启动子甲基化呈负相关(r=-0.345,P=0.007)。结论乳腺癌易感基因BRCA1启动子区CpG岛甲基化导致BRCA1基因表达显著下调,可能参与散发性乳腺癌的发生、发展。

散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变检测

目的:研究散发性乳腺癌患者中,乳腺癌易感基因-1(BRCA1)的突变情况,并探讨其临床意义。方法:采用聚合酶链反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)、标记染色双脱氧末端法DNA测序,对27例散发性乳腺癌患者以及正常对照组8例进行BRCA1基因全序列外显子突变检测。结果:27例患者中发现1例第16外显子基因突变,突变率为3.7%(1/27例);突变形式为4804C→G,突变结果引起单个氨基酸改变,使编码子1562由精氨酸代替脯氨酸。结论:在散发性乳腺癌患者中BRCA1基因突变率较低(3.7%),BRCA1可能通过突变以外的调节方式起作用。

BRCA1在散发性乳腺癌干细胞中的表达及意义

目的探讨乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)在散发性乳腺癌干细胞和分化细胞中的表达及意义。方法选取散发性乳腺浸润性导管癌新鲜标本30例,采用机械分离法将乳腺癌组织块制备成单细胞悬液,通过免疫磁珠两步法从中分离出乳腺癌干细胞(CD44+/CD24-细胞)和分化细胞(CD24+、CD44-、CD24-细胞),应用免疫细胞化学PV6000两步法分别检测两组细胞BRCA1的表达情况。结果乳腺癌干细胞所占比例平均为2.96%,乳腺癌干细胞BRCA1阴性组与阳性组相比,乳腺癌干细胞在乳腺癌中的比例明显升高,其差异有统计学意义(P<0.01);BRCA1在乳腺癌干细胞和分化细胞的阳性率分别为53.3%(16/30)8、3.3%(25/30),差异有显著性(P<0.05)。结论 BRCA1能够抑制乳腺癌干细胞的增殖,某些乳腺癌的癌干细胞在增殖分化过程中出现BRCA1的表达。