乳腺BI-RADS3-5类良恶性结节超声造影增强形态模式及时间-强度曲线类型差异性分析

目的:分析乳腺BI-RADS3-5类良恶性结节超声造影(CEUS)增强形态模式及时间-强度曲线(TIC)类型差异。方法:选取医院乳腺外科收治的131例女性乳腺BI-RADS3-5类病变患者,根据病理结果将其分为良性组(61例)和恶性组(70例)。所有患者均为单发结节,术前行常规超声及超声造影检查,记录并比较两组患者观察区域的造影增强特点、TIC类型及相关参数,分析乳腺BI-RADS3-5类良恶性结节CEUS增强形态模式及TIC类型差异。结果:恶性结节超声造影增强特征多为高增强、血管行走紊乱、增强边界不清晰、增强面积>50%、造影剂分布不均匀以及病灶范围增大;良性结节多为等低增强、血管行走规则、增强边界清晰、增强面积<50%、造影剂分布均匀以及病灶范围未见明显变化。两组乳腺结节TIC类型差异无统计学意义;恶性组乳腺结节峰值强度、相对峰值强度、相对曲线下面积、相对达峰时间以及相对上升斜率水平明显高于良性组,相对开始增强时间明显低于良性组(t=4.731,t=6.757,t=2.950,t=2.997,t=3.137,t=3.652;P<0.05)。logistic回归分析得知,增强边界、病灶范围增大及相对峰值强度对乳腺恶性结节的诊断具有显著意义。受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析得出,造影TIC评估乳腺恶性结节的AUC为0.785;增强模式评估乳腺恶性结节的AUC为0.719。结论:CEUS增强边界、病灶范围增大及相对峰值强度有助于乳腺良恶性结节病灶诊断,造影TIC与增强模式在鉴别乳腺BI-RADS3-5类良恶性结节具有一定价值。

点压乳腺摄影在数字化乳腺X线中鉴别BI-RADS3类病灶的应用价值

目的评价点压乳腺摄影在数字化乳腺X线中乳腺影像报告数据系统(BI-RADS)分类为3类的病灶中的应用价值.方法回顾性分析131例BI-RADS分类为3类的可疑病灶行点压乳腺摄影后的乳腺X线影像,对比点压乳腺摄影前后乳腺BI-RADS分类的变化.结果131例病例中,表现为不对称致密96例,可疑不定形钙化26例,可疑结构扭曲9例.经点压,乳腺摄影BI-RADS分类3类降为1类35例,降为2类51例,保持不变36例,升为4类9例.结论点压乳腺摄影可以对不对称致密、可疑不定形钙化及结构扭曲提供更准确的BI-RADS分类,提高诊断准确性.

亲情式护理对超声检查BI-RADS 3类乳腺增生结节患者焦虑抑郁状态及疾病认知水平的影响

目的 观察亲情式护理改善超声检查BI-RADS 3类乳腺增生患者焦虑、抑郁心理及对提高疾病认知水平的影响。方法 选择石家庄市第四医院和张家口市第二医院接受治疗的150例超声检查BI-RADS 3类乳腺增生结节患者,随机分为2组,每组75例,对照组给予常规护理,观察组给予亲情式护理,比较2组负性心理状态、对疾病认知程度及生活质量的影响。结果 观察组护理后的SAS、SDS评分分别为(32.17±3.64)分、(30.09±3.27)分,分别低于对照组的(45.03±3.41)分、(44.96±3.05)分(P均<0.05)。观察组护理后的疾病认知评分为(90.36±4.62)分,高于对照组的(65.28±3.71)分(P<0.05)。观察组护理后的SF-36评分为(82.56±4.32)分,高于对照组的(63.18±4.91)(P<0.05)。结论 对超声检查BI-RADS 3类乳腺增生结节患者实施亲情式护理可进一步改善患者负性情绪状态,并有助于提高患者对疾病的认知程度,且可改善生活质量。

BI-RADS3-4类乳腺病变X线征象与病理对照分析

目的研究BI-RADS3-4类乳腺病变的X线征象与病理结果的相关性。方法对2014-01~2015-08被评估为BI-RADS3-4类的181例患者共220个病灶的X线征象,采用χ2检验分析其与良恶性之间的关系。结果被分类为BI-RADS3类的病变71例,经病理证实为良性者60例,恶性者11例;被分类为BI-RADS4类的病例共149例,经病理证实为恶性者97例,良性者52例。X线征象中,肿块形态、边缘、周围结构,钙化类型、钙化分布及淋巴结密度、形态在良恶性病变之间有统计学差异（P〈0.05）;腺体类型、肿块大小、密度及淋巴结大小、数目与病变良恶性之间无统计学差异（P〉0.05）。结论 BI-RADS3-4类乳腺病变的X线征象对良恶性病变的鉴别具有重要意义,其中肿块边缘征象及周围结构在良恶性病变的定性分析中更具诊断价值。

乳腺癌组织lncRNA CASC2、miR-532-3p表达水平与患者术后5年内生存的相关性

目的探究乳腺癌(BC)组织长链非编码RNA癌易感性候选基因2(lncRNA CASC2)、微小RNA-532-3p(miR-532-3p)表达与患者术后5年内生存的相关性。方法选择2015年1月—2018年6月大同市第五人民医院普通外科收治BC患者127例,术中收集BC组织及癌旁正常组织,荧光定量PCR法检测BC组织和癌旁正常组织中lncRNA CASC2、miR-532-3p表达;对BC患者术后进行为期5年的随访,记录患者5年内生存和死亡情况。比较癌旁正常组织和BC组织lncRNA CASC2及miR-532-3p表达,BC组织中lncRNA CASC2和miR-532-3p表达在不同临床病理特征中的差异,生存组和死亡组临床病理特征和BC组织中lncRNA CASC2及miR-532-3p表达的差异。分析BC组织lncRNA CASC2、miR-532-3p表达的相关性;BC组织中lncRNA CASC2和miR-532-3p表达与术后5年内生存的关系;影响BC患者术后5年内生存的因素;lncRNA CASC2、miR-532-3p对BC患者术后5年内生存的预测价值。结果BC组织中lncRNA CASC2表达水平低于癌旁正常组织,miR-532-3p表达水平高于癌旁正常组织(t/P=38.239/<0.001,49.406/<0.001);肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、淋巴结转移者比例lncRNA CASC2低表达组高于高表达组,而miR-532-3p低表达组低于高表达组(lncRNA CASC2:χ^(2)/P=17.361/<0.001、17.052/<0.001、14.694/<0.001、13.173/<0.001;miR-532-3p:χ^(2)/P=10.733/0.001、9.813/0.002、10.134/0.001、7.444/0.006);127例BC患者术后随访5年,生存99例(生存组),死亡28例(死亡组),肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、淋巴结转移者比例及miR-532-3p表达水平死亡组高于生存组,而lncRNA CASC2表达水平死亡组低于生存组[χ^(2)(t)/P=5.211/0.022、27.149/<0.001、27.990/<0.001、4.590/0.032、19.155/<0.001、10.818/<0.001];BC组织中lncRNA CASC2与miR-532-3p表达呈负相关(r/P=-0.561/<0.001);lncRNA CASC2高表达组BC患者术后5年内总生存率为89.23%(58/65),高于lncRNA CASC2低表达组66.13%(41/62)(χ^(2)/P=9.854/0.002);miR-532-3p高表达组BC患者术后5年内总生存率为65.57%(40/61),低于miR-532-3p低表达组89.39%(59/66)(χ^(2)/P=10.466/0.001);肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、lncRNA CASC2低表达、miR-532-3p高表达均是影响BC患者术后5年内生存的独立危险因素[HR(95%CI)=2.255(1.192~4.263)、2.143(1.252~3.666)、3.089(1.386~6.887)、2.219(1.223~4.026)、2.606(1.174~5.788)、2.855(1.592~5.120)];lncRNA CASC2、miR-532-3p及二者联合预测BC患者术后5年内生存的AUC分别为0.840、0.852、0.908,二者联合预测的AUC大于lncRNA CASC2、miR-532-3p各自单独预测的AUC(Z/P=2.246/0.025、2.033/0.042)。结论BC组织中lncRNA CASC2表达下调,miR-532-3p表达上调,且术后5年内死亡的BC患者较存活患者变化更显著,二者表达与临床病理特征相关,对预测BC患者术后5年内生存情况价值较高。

超声造影调整乳腺BI-RADS 3、4类肿块的临床价值

目的探讨超声造影检查调整乳腺BI-RADS 3、4类肿块的临床价值。方法选取我院经穿刺活检或手术病理证实的乳腺肿块患者71例(共76个肿块),良性肿块43个,恶性肿块33个,常规超声检查BI-RADS分类均为3类或4类。对其进行超声造影评分,根据评分结果重新调整乳腺BI-RADS 3、4类肿块分类,比较调整前、后BI-RADS分类对乳腺BI-RADS 3、4类肿块良恶性的诊断效能。结果(1)76个乳腺肿块中,调整后BI-RADS分类2类7个、3类12个(3类保持不变4个)、4A类20个(3类上调2个)、4B类15个、4C类11个、5类11个,BI-RADS 4类肿块活检率降至69.8%,误诊率仅为1.6%;(2)调整前、后BI-RADS分类诊断的敏感性、特异性、准确率分别为75.8%、76.7%、76.3%和97.0%、88.4%、92.1%;ROC曲线下面积分别为0.763、0.927,差异有统计学意义(Z=3.965,P<0.05)。结论超声造影检查可通过调整BI-RADS分类提高对乳腺BI-RADS 3、4类肿块良恶性的诊断效能。

乳腺癌患者血清微小RNA-135b、微小RNA-148a-3p、微小RNA-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果相关性研究

目的:探讨乳腺癌患者血清微小RNA-135b(miR-135b)、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果的相关性。方法:选取116例乳腺癌患者为病例组,均接受新辅助化疗,以21 d为1个周期,共化疗8个周期,根据化疗反应将患者分为耐药组(32例)和敏感组(84例),另选128例体检健康女性为对照组。比较病例组和对照组,耐药组和敏感组血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平。采用Pearson相关性分析血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p水平间的相关性。乳腺癌患者化疗效果的影响因素采用Logistic回归分析。血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p对乳腺癌患者化疗耐药的预测价值通过受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果:与对照组比较,病例组miR-135b、miR-148a-3p水平升高,血清miR-186-5p水平降低(均P<0.05)。耐药组血清miR-135b、miR-148a-3p水平高于敏感组,血清miR-186-5p水平低于敏感组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清miR-135b与miR-148a-3p呈正相关,与miR-186-5p呈负相关,血清miR-148a-3p与miR-186-5p呈负相关(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p是乳腺癌患者化疗效果的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p联合预测化疗耐药的曲线下面积(AUC)高于三者单独预测AUC(均P<0.05)。结论:乳腺癌患者血清miR-135b、miR-148a-3p水平呈高表达,血清miR-186-5p水平呈低表达,三者水平变化与新辅助化疗效果有关,且三者联合检测对患者新辅助化疗耐药的预测价值更高。

超声血流定量参数联合弹性成像鉴别诊断BI-RADS 3~4类乳腺良恶性肿块的诊断价值

目的探究血流相关参数联合超声弹性成像(ultrasonic elastography,UE)鉴别诊断乳腺影像报告和数据系统分级(breast imaging reporting and data system,BI-RADS)3~4类乳腺良恶性肿块的诊断价值。方法回顾性分析2021年1月-2022年8月以“乳腺肿块”就诊于淮南市第一人民医院并通过常规超声证实为BI-RADS 3~4类肿块的104例患者的资料,患者均行彩色多普勒超声与超声弹性成像检查,根据病理结果分为良性组41例和恶性组63例,比较两组超声血流分级情况、超声血流参数值[搏动指数(pulsatility index,PI)、收缩期峰值血流速度(peak systolic velocity,PSV)、阻力指数(resistance index,RI)]、UE相关参数(长径、长径变化率、面积、面积比值)、通过受试者特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估超声血流参数值联合UE相关参数值鉴别诊断BIRADS 3~4类乳腺良恶性肿块的价值。结果恶性组患者超声血流0级、Ⅰ级比率低于良性组,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅱ级、Ⅲ级比率高于良性组,差异有统计学意义(P<0.05)。恶性组患者PI、RI、PSV高于良性组,差异有统计学意义(P<0.05)。恶性组患者长径、长径变化率和面积、面积比值均高于良性组,差异有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,当超声血流参数值联合UE相关参数值时,其鉴别诊断BI-RADS3~4类乳腺良恶性肿块的AUC为0.920(95%CI:0.864~0.957,P<0.001),灵敏度为84.38%,特异度为87.50%。结论血流相关参数联合超声弹性成像鉴别诊断BI-RADS3~4类乳腺良恶性肿块的价值较高,两项技术联合应用更具优越性。

乳腺癌根治术患者术后血清抗酒石酸盐酸性磷酸酶5b和糖类抗原15-3及白细胞介素-6水平与骨转移的关系

目的探讨乳腺癌根治术患者术后血清抗酒石酸盐酸性磷酸酶5b(TRACP5b)、糖类抗原15-3(CA15-3)、白细胞介素-6(IL-6)水平与骨转移的关系。方法选择2017年12月至2018年12月新乡市中心医院收治的122例行乳腺癌根治术患者为研究对象,术后1周检测患者血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平;随访1 a,记录患者骨转移发生情况;采用Pearson、Spearman相关性分析方法分析乳腺癌根治术后血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平与骨转移的相关性。结果122例患者中,无骨转移90例,骨转移32例,骨转移发生率为26.23%。骨转移患者术后血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平高于无骨转移患者(P<0.05),多发病灶患者术后血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平高于单发病灶患者(P<0.05)。乳腺癌根治术后患者血清TRACP5b、CA15-3水平与IL-6水平呈显著正相关(r=0.4126、0.4078,P<0.001)。乳腺癌根治术后患者血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平与骨转移程度呈显著正相关(r=0.5437、0.5328、0.3867,P<0.001)。结论乳腺癌患者术后血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平与骨转移的发生密切相关,且术后血清TRACP5b、CA15-3、IL-6水平越高,发生骨转移的程度越重。

circVANGL1/miR-134-5p/CDCA3轴调控乳腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

目的探讨circVANGL1/miR-134-5p/细胞分裂周期相关因子3(CDCA3)轴调控乳腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭的机制。方法收集2021年2月至2023年11月治疗乳腺癌患者的乳腺癌组织及相对应癌旁组织。体外培养乳腺癌MCF-7细胞干细胞亚群,根据不同处理方法将其分为Con组、si-NC组、si-circVANGL1组、pcDNA组、pcDNA-circVANGL1组、miR-NC组、miR-134-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-134-5p组、si-circVANGL1+anti-miR-134-5p组、si-circVANGL1+pcDNA-CDCA3组。采用qRT-PCR检测circVANGL1、miR-134-5p和CDCA3 mRNA在乳腺癌组织、癌旁组织及各组乳腺癌干细胞中的表达水平;Western blot检测CDCA3、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平。双荧光素酶报告实验验证circVANGL1与miR-134-5p、miR-134-5p与CDCA3靶向关系;CCK-8实验检测乳腺癌干细胞增殖活性,划痕实验检测细胞迁移能力,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中circVANGL1、CDCA3 mRNA、CDCA3蛋白表达水平较高,miR-134-5p表达水平较低(P<0.05)。circVANGL1可靶向调控miR-134-5p的表达,miR-134-5p可靶向调控CDCA3蛋白的表达。干扰circVANGL1表达后,乳腺癌干细胞增殖活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、侵袭细胞数以及MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。下调miR-134-5p表达或过表达CDCA3可部分逆转干扰circVANGL1对乳腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭的作用(P<0.05)。结论circVANGL1可能通过miR-134-5p/CDCA3轴调控乳腺癌干细胞的增殖、迁移、侵袭。

乳腺癌影像报告和数据系统(BI-RADS)3~4级乳腺病变超声征象与病理结果对照分析

目的:探究超声征象用于乳腺癌影像报告和数据系统(BI-RADS)3~4级乳腺病变患者中的诊断价值。方法:选取2020年3月—2021年3月陇南市第一人民医院收治的64例(69个病灶)BI-RADS 3~4级乳腺疾病患者为样本,以病理结果为金标准,均开展乳腺超声检查,分析超声诊断BI-RADS 3~4级乳腺病变患者价值。结果:69个病灶经BI-RADS分级,50个为BI-RADS 3级,病理诊断结果为49个(98.00%)良性病灶、1个(2.00%)恶性病灶;19个为BI-RADS 4级,病理诊断结果为5个(26.32%)良性病灶、14个(73.68%)恶性病灶;超声诊断BI-RADS 3~4级乳腺病变患者诊断灵敏度为93.33%(14/15)、特异度为90.74%(49/54)、阳性预测值为73.68%(14/19)、阴性预测值为98.00%(49/50);超声评价BI-RADS 3~4级乳腺病变患者,良恶性肿瘤患者在病灶形态、病灶边缘、内部回声、后方回声、周围组织变化、病灶内部血流等征象中存在显著差异(P<0.05);但良恶性肿瘤内部钙化灶无显著差异(P>0.05)。结论:超声诊断用于BI-RADS 3~4级乳腺病变患者中,可准确评估患者病情,指导临床治疗。

miR-7-5p和miR-152-3p联合调控Wnt/β-catenin通路对乳腺癌细胞上皮-间质转化及化疗耐药的影响

目的探讨miR-7-5p和miR-152-3p协同抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及紫杉醇耐药的分子机制。方法采用生物信息学软件预测miR-7-5p和miR-152-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因检测两者与TCF4的靶向关系;Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键调控因子β-catenin及TCF4蛋白的表达;在转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics基础上给予Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl处理后,Western blot法检测MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达,Transwell小室实验检测MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力;MTT实验检测激活Wnt/β-catenin信号通路对MCF-7/TAX细胞紫杉醇耐药性的影响。结果TCF43′UTR区域存在能够与miR-7-5p及miR-152-3p互补的结合位点;转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后可使TCF4野生型(TCF4-WT)报告基因载体的荧光素酶活性较NC组明显降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与NC组相比,转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后各组紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),且两者共同转染后MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平较miR-7-5p组或miR-152-3p组进一步降低(P<0.05)。Western blot结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。Transwell小室结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力明显增强(P<0.05)。MTT结果显示,不同浓度紫杉醇作用下,miR-7-5p+LiCl组细胞增殖活力较miR-7-5p组明显升高;同时miR-152-3p+LiCl组和miR-7-5p/152-3p+LiCl组细胞的增殖活力较NC组均明显升高(P<0.05)。结论TCF4是miR-7-5p和miR-152-3p的共同靶标。miR-7-5p和miR-152-3p可共同抑制MCF-7/TAX细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活化。

茶树类黄酮3’,5’-羟化酶在大肠杆菌的表达和优化

儿茶素是茶叶主要特征和功能成分之一,其中B环三羟基儿茶素约占儿茶素总量的65%以上。类黄酮3’,5’-羟化酶是类黄酮合成中B环5’羟基化的唯一酶系,与B环三羟基儿茶素合成积累密切相关。采用RACE技术,克隆了茶树类黄酮3’,5’-羟化酶基因的1 944 bp的全长序列,开放阅读框区域为55～1 587 bp,编码510个氨基酸,推测其分子量为57.1 kDa,等电点为9.06。该基因重组至pET-32a(+)表达载体上,在大肠杆菌Rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中温度诱导条件;利用钴离子吸附柱纯化了目的蛋白。该研究为开展F3’5’H酶的反应动力学、酶的器官组织定位等研究奠定了基础。

miR-125a-5p通过GSK-3β/Snail信号通路抑制乳腺癌细胞的上皮-间充质转化

目的:探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)通过GSK-3β/Snail信号通路对乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:RT-qPCR检测人正常乳腺上皮细胞与乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量,同时检测miR-125a-5p质粒在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中的转染效率;趋化运动实验与Transwell侵袭实验检测趋化运动能力和侵袭能力;Western blot检测EMT相关标志物的变化,同时检测磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)的蛋白水平及Snail的转核情况。结果:乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P<0.05);miR-125a-5p在转染miR-125a-5p质粒的MDA-MB-231细胞中表达水平明显增高;MDA-MB-231细胞的趋化运动能力在表皮生长因子(EGF)浓度为10μg/L时最强;在EGF刺激下,与MDA-MB-231/NC细胞组相比,MDAMB-231/miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显降低,上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)表达量升高,波形蛋白(vimentin)和p-GSK-3β的蛋白水平明显降低,同时Snail转核受到明显抑制;与MDA-MB-231/miR-125a-5p+Con细胞组相比,MDA-MB-231/miR-125a-5p+GAB2细胞组的侵袭能力明显增强,E-cadherin表达量降低,vimentin和p-GSK-3β的蛋白水平明显升高,同时促进Snail转核。结论:miR-125a-5p可通过GSK-3β/Snail信号通路抑制乳腺癌细胞的EMT,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭能力。

Ca15-3在乳腺外Paget病鉴别诊断中的价值

目的：探讨Ｃａ１５３ 在Ｐａｇｅｔ 病鉴别诊断中的价值。方法：对１１ 例阴囊Ｐａｇｅｔ 病回顾性地做Ｃａ１５３、ＥＭＡ、ＣＥＡ和ＨＭＢ４５ 免疫组化染色，并以４ 例Ｂｏｗｅｎ 病和１ 例恶性黑色素瘤做对照。结果：Ｃａ１５３ 、ＥＭＡ 在Ｐａｇｅｔ 病和大、小汗腺及皮脂腺均有较强的表达，４ 例Ｂｏｗｅｎ 病均无Ｃａ１５３ 表达，但其中２ 例有ＥＭＡ 表达。ＣＥＡ 在６ 例（５４．５ ％）Ｐａｇｅｔ 病中有表达。ＨＭＢ４５ 只在恶性黑色素瘤中表达。结论：Ｃａ１５３ 在Ｐａｇｅｔ 细胞的相对特异性表达提示它可作为Ｐａｇｅｔ 病与Ｂｏｗｅｎ 病鉴别诊断的标志物，其对诊断的敏感性与ＥＭＡ 相同，但特异性高于ＥＭＡ。同时还说明Ｐａｇｅｔ 病的发生可能与汗腺有关。

7-(7-氨甲基-5-氮杂螺[2,4]庚烷-5-基)-1-环丙基-6-氟-8-甲氧基-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸及其类似物的合成与抗菌作用

目的 寻找新的广谱、高效、低毒喹诺酮类抗菌药物。方法 设计合成 7 (7 氨甲基 5 氮杂螺 [2 ,4 ]庚烷 5 基 ) 1 环丙基 6 氟 8 甲氧基 1,4 二氢 4 氧代喹啉 3 羧酸及其类似物 ,测定其体内外活性。结果 共合成了 2 0个新化合物 ,经1 HNMR ,MS和HRMS确证其结构。其中 5个目标化合物 (2 2～ 2 6 )有广谱活性 ,尤其对革兰氏阳性菌具有很强的活性。其中化合物 2 4对所试的 13株革兰氏阳性菌的MIC值均 0 0 3mg·L- 1 ,其活性优于对照药克林沙星和加替沙星 ,对所试的 6株革兰氏阴性菌 ,其活性相当于或低于对照药。结论 化合物 (2 2～ 2 6 )值得进一步评价。

mi R-32-5p通过靶向Dickkopf相关蛋白3的表达调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的生物学行为

目的:通过生物信息学手段筛选乳腺癌中差异表达的关键miRNA及其靶基因,干预其在乳腺癌细胞中的表达并观察对乳腺癌细胞功能的影响。方法:利用GEO数据库筛选在乳腺癌中差异表达的miRNA,ENCORI数据库验证差异miRNA的表达,以选定最显著的差异表达miRNA为研究对象;利用Starbase、miRDB和miRWalk数据库预测miR-32-5p的靶基因,利用DAVID数据库对靶基因进行GO分析和KEGG分析,利用String数据库联合Cytoscape3.6.2软件进行PPI网络分析及核心基因的筛选,从核心基因中选择相互联系紧密"度值"最显著的Dickkopf相关蛋白3(DDK3)基因进行后续实验。qPCR检测miR-32-5p在人正常乳腺细胞MCF10A和人乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231、MDA-MB-453细胞中的表达。向MDA-MB-231细胞中转染miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor及各自的对照(NC)序列,分别用CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验检测过表达或抑制miR-32-5p对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果:从GEO数据库中获取的两个数据集共识别出两个差异miRNA,ENCORI数据库验证差异miRNA的表达发现miR-32-5p的表达水平与GEO数据库的结果一致,故选择其进行研究;预测得到198个miR-32-5p潜在的靶基因并鉴定出10个核心基因(DKK3、WNT2B、SFRP5、SFRP2、SFRP1、LRP6、WNT6、KREMEN1、NEDD4L、TRIP12),其中DKK3的度值最大可能在乳腺癌中较为重要,于是选择miR-32-5p/DKK3轴进行后续研究。miR-32-5p在3种乳腺癌细胞中的表达水平显著高于正常乳腺细胞(均P<0.01),其中以MDA-MB-231细胞中表达最高。双荧光素酶基因报告实验验证了miR-32-5p与DKK3基因的靶向结合及其对后者表达的负向调控。转染miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor后成功提高或抑制了MDA-MB-231细胞中miR-32-5p的表达。与对照组相比,过表达miR-32-5p可抑制MDA-MB-231细胞的凋亡而促进细胞增殖和侵袭(P<0.05或P<0.01),敲低miR-32-5p则起相反的作用(均P<0.01)。结论:miR-32-5p/DKK3轴可能是影响乳腺癌发生发展的关键通路,过表达miR-32-5p能够抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡而促进细胞增殖和侵袭。

Hsa-miR-98-5p/DKK3信号轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响

背景与目的:乳腺癌威胁着全世界女性的健康。虽然已发现大量微小RNA(microRNA,miRNA)在乳腺癌中异常表达,但仍需要构建一个完整的miRNA-信使RNA(messenger RNA,mRNA)网络。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载乳腺癌相关数据集,分析肿瘤组织与正常组织之间差异表达的miRNA。利用miRDB、miRTarBase和StarBase数据库分析差异miRNA靶向的基因。使用R语言中的ClusterProfiler包对靶基因进行富集分析。使用String数据库联合Cytoscape 3.6.2软件进行蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析及Hub基因的筛选;构建miRNA-Hub mRNA调控网络确定研究信号轴,然后通过细胞实验进行验证。结果:采用TCGA数据集识别出两个差异miRNAs。3个数据库取交集预测得到278个靶基因。共鉴定出10个Hub基因,从构建的miRNA-Hub基因网络图中发现,hsa-miR-98-5p/DKK3轴可能在乳腺癌的进展中起关键作用。细胞功能学实验证实hsa-miR-98-5p可抑制细胞凋亡,促进细胞的增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验进一步验证了hsa-miR-98-5p与DKK3的结合作用。结论:本研究首先通过生物信息学分析鉴定出一个与乳腺癌进展相关的hsa-miR-98-5p/DKK3轴,初步证实hsa-miR-98-5p可通过靶向DKK3抑制乳腺癌细胞凋亡,促进细胞的增殖、迁移和侵袭。

紫色马铃薯类黄酮3',5'-羟化酶基因(StF3'5'H)的克隆及分析

类黄酮3',5'-羟化酶(flavonoid 3',5'-hydroxylase,F3'5'H)是植物花青素生物合成途径中的一个关键酶,紫色土豆(Solanum tuberosum)F3'5'H基因的克隆将为花青素合成调控和花青素代谢工程研究提供优质基因资源。研究采用RACE技术克隆了紫色土豆F3'5'H基因的cDNA全长序列,用生物信息学方法对其核苷酸和蛋白质序列进行了分析,并用半定量PCR技术分析了F3'5'H基因在不同组织中的表达情况,同时研究了赤霉素和蔗糖处理后F3'5'H基因表达与花青素积累之间的相关性。研究结果表明,克隆的紫色土豆F3'5'H的cDNA全长为1854 bp,包含一个1530 bp的完整ORF,共编码509个氨基酸。生物信息学分析表明,StF3'5'H基因推测编码的氨基酸序列与其它植物的F3'5'H蛋白的相似性很高。StF3'5'H基因的表达具有组织特异性,在紫色土豆根、茎和叶柄中都有表达,其中在叶柄中表达最强,而在块茎、叶轴和叶片中几乎检测不到StF3'5'H基因的表达。赤霉素和蔗糖能促进紫色土豆StF3'5'H基因的表达,进而促进花青素的积累。