乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞凋亡及bcl-2、bax表达和caspase-3活性的影响

目的:探讨不同浓度乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)对腹膜间皮细胞(HPMC)凋亡和bcl-2、bax表达及caspase-3活性的影响。方法:采用酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型,分别用浓度为1.50%、2.50%和4.25%的L-PDS与HPMC共同培养,同时设对照组。采用流式细胞术检测HPMC凋亡,采用RT-PCR法测定bcl-2及bax mRNA的表达,采用免疫荧光法检测caspase-3的活性。结果:与对照组比较,L-PDS各组HPMC凋亡率增加,bcl-2 mRNA的表达降低,bax mRNA表达升高,caspase-3活性增加,上述指标变化中2.50%及4.25%L-PDS组与对照组比较差异有显著性(P<0.05),4.25%L-PDS组与2.50%L-PDS组比较差异也有显著性(P<0.05),而1.50%L-PDS组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:L-PDS可诱导HPMC凋亡,其机制可能是通过对bcl-2及bax mRNA表达的改变以及激活caspase-3活性而实现。

人参总皂甙抑制乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞的损伤

目的观察人参总皂甙(TSPG)对乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)致人腹膜间皮细胞(HPMC)损伤程度的影响,为其保护HPMC提供实验依据。方法采用酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型后分5组,F12完全培养液对照组、腹膜透析液组(2.5%L-PDS组)、2.5%L-PDS+TSPG组(终浓度为500μg/ml)、2.5%L-PDS+TSPG组(终浓度为50μg/ml)、单纯TSPG组。经各种因素处理后的细胞在培养60 min和300 min后用MTT法检测细胞的增殖,用自动生化分析仪检测各组培养液中乳酸脱氢酶的水平,来反映细胞的损伤程度。结果HPMC在终浓度为500μg/ml的TSPG和2.5%的乳酸盐腹膜透析液培养体系中培养1 h后,和对照组相比,HPMC增殖能力明显增强(P<0.05),培养体系中的LDH含量明显下降(P<0.05)。结论人参总皂甙能抑制乳酸盐腹透液导致的HPMC的损伤。

氨基胍对乳酸盐腹膜透析液致人腹膜间皮细胞损伤及血管内皮生长因子表达的影响

目的研究氨基胍(AG)对乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)致人腹膜间皮细胞(HMr SV5)损伤及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用人腹膜间皮细胞株HMr SV5为体外实验模型,分为无血清DMEM培养液对照组、L-PDS组(2.5%L-PDS)、L-PDS+AG组(2.5%L-PDS+10 mmol/L AG)、单纯AG组(终浓度10 mmol/L)。各组以上不同干预因素与HMr SV5细胞共孵育。MTT法检测各组细胞增殖、评估细胞活力,Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF蛋白及m RNA的表达。结果 MTT试验表明,L-PDS组OD值为(0.120±0.019),明显低于对照组的(0.298±0.031),差异有统计学意义(P<0.05);L-PDS+AG组OD值为(0.289±0.022),明显高于LPDS组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot和RT-PCR结果均表明,与对照组比较,L-PDS组细胞中VEGF蛋白和m RNA表达明显增加,与L-PDS组比较,PDS+AG组VEGF蛋白和m RNA的表达明显减低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AG可拮抗乳酸盐腹膜透析液致人腹膜间皮细胞损伤并下调VEGF的表达。

观察黄芪注射液对含糖乳酸盐腹膜透析液所致水孔蛋白1表达异常的影响

目的探究黄芪注射液对含糖乳酸盐腹膜透析液所致水孔蛋白1表达异常的影响。方法选取70只SD雄性大鼠,分成7组,分别注射不同浓度的黄芪注射液及乳酸盐腹膜透析液,留取引流液及提取腹膜样本进行有关AQP1表达及AQP1 m RNA检测。结果高糖高黄芪组、高糖组BUN清除率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。高糖高黄芪组AQP1表达(11.01±1.76)低于对照组(13.12±2.02),差异有统计学意义(P<0.05);低糖高黄芪组AQP1 m RNA表达高于低糖组与高糖低黄芪组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论适量浓度的黄芪注射液对AQP1表达异常影响不明确。

腹膜透析液(乳酸盐)中葡萄糖和乳酸钠的含量测定方法改进

目的:建立HPLC法同时测定腹膜透析液(乳酸盐)中葡萄糖和乳酸钠的含量。方法:采用Carbomix H-NP 10:8%(7.8 mm×300 mm,10μm)色谱柱,流动相为水,流速0.5 m L·min-1,柱温55℃,示差折光检测器检测池温度为55℃。并将测得结果与国家标准中收载的碘量法(葡萄糖)与HPLC法(乳酸钠)进行比较。结果:葡萄糖和乳酸钠浓度分别在2.0918~7.3214 mg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.7954~2.7825 mg·m L-1(r=0.9999)呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.0%(n=9)、98.6%(n=9)。本法测得结果与国家标准中的碘量法与HPLC法的结果基本一致。结论:本方法简便、快速、准确,可用于腹膜透析液(乳酸盐)的质量控制。

HPLC法测定中性腹膜透析液(乳酸盐)中葡萄糖的含量

目的：建立高效液相色谱法测定中性腹膜透析液（乳酸盐）中葡萄糖含量的方法。方法采用 Waters Sugar ParkⅠ色谱柱（6.5 mm ＆#215;300 mm，6.5μm），流动相为水，流速：0.5 mL·min -1，柱温：80℃，示差检测器设置温度：40℃，进样量：20μL。结果葡萄糖在1.13378~6.80268 mg·mL -1范围内呈良好的线性关系（r =1.0000）。含1.5%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为99.1%，RSD =0.4%（n =9）；含2.5%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为100.1%，RSD =0.2%（n =9）；含4.25%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为100.2%，RSD =0.3%（n =9）。结论本方法简便、快速、准确，可用于中性腹膜透析液（乳酸盐）的质量控制。