急性B淋巴细胞白血病儿童乳酸脱氢酶、前白蛋白及二者比值与化疗早期疗效的相关性

目的:探讨急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿乳酸脱氢酶(LDH)、前白蛋白(PA)及二者比值(LPR)与化疗早期疗效的相关性。方法:选取2020年5月至2022年5月我院收治的B-ALL患儿126例,观察患儿初诊时(化疗前,T0)、化疗第3 d(T1)、化疗第33 d(T2)的LDH、PA水平及LPR值。按照化疗第33 d微小残留病比例,将患儿分为疗效良好组(n=94)和疗效不良组(n=32),采用logistic回归分析化疗早期疗效的影响因素。结果:T1时患儿LDH及LPR低于T0,且T2低于T1(P<0.05);T2时PA高于T1(P<0.05)。临床危险度为高危、T0-WBC≥100×10~9/L、T0及T2时的LPR较高是患儿化疗早期疗效不良的危险因素(P<0.05)。结论:化疗后,B-ALL患儿LDH及LPR呈逐渐下降趋势,PA呈逐渐上升趋势,LPR与患儿化疗早期疗效具有相关性。

乳酸脱氢酶同工酶与恶性肿瘤关系的研究进展

乳酸脱氢酶(LDH)同工酶是糖酵解的关键酶,可催化丙酮酸和乳酸之间的可逆氧化还原,在多种恶性肿瘤中表达,目前是恶性肿瘤早期诊断与预后评估的研究热点。肿瘤细胞共有的代谢方式Warburg效应在肿瘤的发生发展中发挥重要作用,LDH同工酶可通过Warburg效应以及肿瘤免疫途径参与多种恶性肿瘤的能量代谢、存活、侵袭、转移及免疫逃逸。随着研究的深入,LDH很有可能成为癌症靶向治疗的新希望和恶性肿瘤辅助诊断的新靶点。因此,未来应进一步深入研究LDH同工酶与恶性肿瘤的关系,以为后续恶性肿瘤的诊断与治疗提供更多策略。

胸腔积液腺苷脱氨酶、乳酸脱氢酶及其比值在结核性胸膜炎胸腔闭式引流术治疗效果中的预测价值

目的探讨胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)水平及其比值在结核性胸膜炎患者胸腔闭式引流术治疗效果中的预测价值。方法选择2019年1月至2022年8月沧州市人民医院收治的110例结核性胸膜炎患者为研究对象,所有患者入院时均接受胸腔积液ADA、LDH水平检测,并行胸腔闭式引流术治疗,术后随访9个月,根据随访期间患者临床疗效分为有效组、无效组,比较2组患者的基线资料,分析胸腔积液ADA、LDH水平及其比值在预测结核性胸膜炎患者胸腔闭式引流术治疗效果中的价值。结果110例患者治疗后有效82例,无效28例。有效组和无效组ADA水平分别为(10.03±0.98)、(55.10±5.24)U·L^(-1),LDH水平分别为(130.58±15.27)、(549.12±50.52)U·L^(-1),LDH/ADA比值分别为(12.88±1.31)、(9.51±0.83),差异均有统计学意义(P<0.001)。Logistic多元回归分析结果显示,胸腔积液ADA、LDH水平及LDH/ADA比值均与结核性胸膜炎患者胸腔闭式引流术治疗效果有关(P<0.001)。ROC曲线结果显示,胸腔积液ADA、LDH水平及联合检测预测结核性胸膜炎患者胸腔闭式引流术后的临床效果AUC均>0.70,有一定诊断价值,且LDH/ADA比值价值最高。结论胸腔积液ADA、LDH水平及LDH/ADA比值与结核性胸膜炎患者胸腔闭式引流术后临床疗效密切相关,有一定预测价值。

乳酸脱氢酶与白蛋白比值与脓毒性休克患者预后的关系

目的 探讨乳酸脱氢酶与白蛋白比值(LAR)与重症监护病房(ICU)中脓毒性休克患者预后的关系。方法 收集美国重症监护医学信息数据库(MIMIC-Ⅳ)中在ICU住院的脓毒性休克患者的临床资料。依据患者28 d的生存情况分为存活组和死亡组,比较两组基本临床特征。通过限制性立方样条(RCS)分析LAR与患者28 d全因死亡风险的整体关系。根据RCS最佳截断值将患者分为低LAR组和高LAR组,绘制Kaplan-Meier生存曲线,并采用log-rank检验比较两组患者累积生存率。建立Cox回归模型分析LAR与28 d全因死亡率之间的关系。结果 共纳入患者1 659例。死亡组年龄,序贯器官衰竭评分,急性生理与慢性健康Ⅱ评分,肌酐,乳酸,天冬氨酸氨基转移酶,血镁,国际标准化比值,合并恶性肿瘤、心源性休克、急性肾损伤和慢性肾脏病的比例均高于存活组,而血白蛋白、血红蛋白、血小板值及合并急性胰腺炎的比例均低于存活组(均P<0.05)。LAR与患者28d全因死亡风险整体呈非线性趋势关系(χ~2=46.930,P<0.05),且死亡风险随LAR的升高而增加(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,高LAR组28 d的累积生存率低于低LAR组(log-rank χ~2=104.230,P<0.05)。Cox回归分析表明LAR升高(≥11.08)是影响脓毒性休克患者28 d全因死亡率升高的独立危险因素(HR=1.79,P<0.05)。结论 入院时LAR升高(≥11.08)与脓毒性休克患者28d全因死亡率升高独立相关,临床医生应该更加关注此类患者并及时进行干预以便改善其预后。

血清降钙素原、乳酸脱氢酶、中性粒细胞/淋巴细胞比值联合检测对儿童肺炎支原体肺炎病情的预测价值

目的分析血清降钙素原(PCT)、乳酸脱氢酶(LDH)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)联合检测对儿童肺炎支原体肺炎病情的预测价值。方法选取2023年3月至10月徐州市肿瘤医院收治的80例肺炎支原体肺炎患儿,按照病情严重程度分为重症组(n=35)、非重症组(n=45),另选取同期40例健康体检儿童为对照组。比较三组血清PCT、LDH、NLR水平,并分析其与临床肺部感染评分(CPIS)的相关性;采用受试者工作特征曲线分析血清PCT、LDH、NLR对重症肺炎支原体肺炎的预测价值。结果重症组及非重症组的血清PCT、LDH及NLR水平高于对照组(P<0.05),重症组血清PCT、LDH及NLR水平高于非重症组(P<0.05);重症组CPIS评分高于非重症组(P<0.05)。CPIS评分与血清PCT、LDH及NLR呈正相关(P<0.05);血清PCT、LDH、NLR联合检测的曲线下面积大于PCT、LDH、NLR单独检测,敏感度、特异度高于单独检测(P<0.05)。结论血清PCT、NLR、LDH水平与肺炎支原体肺炎的严重程度呈正相关,联合检测对病情严重程度的预测价值较高。

乳酸脱氢酶与白蛋白比值对脓毒症相关急性肾损伤患者短期预后的影响

目的探讨乳酸脱氢酶与血清白蛋白比值与脓毒症相关急性肾损伤患者的短期预后之间的关系。方法回顾性分析2018年1月至2022年6月在首都医科大学附属北京世纪坛医院重症医学科治疗的463例脓毒症患者。将患者分为两组:伴有继发性急性肾损伤组(sepsis patients with secondary acute kidney injury,AKI)和无急性肾损伤组(sepsis patients without secondary acute kidney injury,Non-AKI)。对比两组患者的急性生理学和慢性健康评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和白蛋白(albumin,ALB)等指标。采用多因素logistic回归分析确定脓毒症相关急性肾损伤预后的危险因素,以及通过ROC分析评估APACHEⅡ评分、SOFA评分、PCT、SCr、乳酸脱氢酶与白蛋白比值(lactatedehy-drogenase/albuminratio,LAR)对预测脓毒症相关急性肾损伤短期预后的价值。结果Non-AKI组ICU 28 d病死率低于AKI组(24.68%vs.35.76%,P<0.05),Non-AKI组重症监护病房(intensive care unit,ICU)住院时间短于AKI组[(8.36±2.47)d vs.(9.15±3.89)d,P<0.05]。APACHEⅡ评分、SOFA评分、PCT、SCr、LAR为脓毒症相关急性肾损伤患者28 d死亡的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,LAR水平对脓毒症相关急性肾损伤患者短期预后的预测价值高于APACHEⅡ评分、SOFA评分、PCT、SCr(AUC 0.819、0.762、0.655、0.615、0.803)。结论LAR是脓毒症相关AKI的独立危险因素,并且与患者的28 d病死率相关。

乳酸脱氢酶与白蛋白比值及免疫炎症生物标志物预测转移性结直肠癌预后的临床意义

目的探讨乳酸脱氢酶与白蛋白比值(LAR)及免疫炎症生物标志物在转移性结直肠癌(mCRC)预后中的作用。方法回顾性分析2017年1月至2020年12月首都医科大学大兴医院对连续确诊为mCRC患者的临床数据和随访资料。采用受试者工作特性(ROC)曲线确定中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、营养预后指数(PNI)和LAR预测预后的最佳截断值。根据是否接受贝伐珠单抗作为一线治疗,患者分为化疗+贝伐珠单抗(CT+B)组和化疗(CT)组。采用Kaplan-Meier方法绘制生存曲线,生存差异行Log-rank检验。采用Cox风险比例回归模型分析影响转移性结直肠癌总生存时间(OS)和无进展生存时间(PFS)的因素。结果ROC曲线显示PLR、NLR、PNI和LAR诊断mCRC患者OS的最佳截断值分别为140.63、2.81、45.85和4.0。单因素Cox风险比例回归模型结果显示,吸烟史、多器官转移、PLR≥140.63、NLR≥2.81、LAR≥4.0、年龄和原发灶切除是影响OS的因素(P<0.05);吸烟史、多器官转移、PLR≥140.63、NLR≥2.81、LAR≥4.0是影响PFS的因素(P<0.05)。结合NLR和LAR开发新的风险预测模型,将患者分为:低风险(0因素:NLR<2.81和LAR<4.0)、中风险(1个因素:NLR≥2.81或LAR≥4.0)和高风险(2个因素:NLR≥2.81和LAR≥4.0)。多因素Cox风险预测模型显示了全体或CT+B一线治疗患者亚群OS和PFS的独立预后因素(P<0.05)。中低风险患者CT+B一线治疗比CT一线治疗可获得更长的中位OS(42.50个月vs.29.50个月,P=0.013)和中位PFS(44.50个月vs.23.50个月,P<0.001);高风险患者的OS和PFS差异无统计学意义(P=0.724,0.483)。结论预处理LAR和NLR可以作为mCRC患者一线CT的生存结局的良好指标,并且基于NLR和LAR建立的风险预测模型可能预测贝伐珠单抗对中低风险患者一线CT的临床益处。

氢氯噻嗪联合肺表面活性物质对早产儿支气管肺发育不良的治疗效果及对血清白细胞介素-6 肌酸激酶 肌酸激酶同工酶和乳酸脱氢酶的影响

目的探讨氢氯噻嗪联合肺表面活性物质(PS)对早产儿支气管肺发育不良(BPD)的治疗效果及对血清白细胞介素-6(IL-6)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响。方法回顾性分析2020年12月至2023年12月浙江省舟山市妇女儿童医院新生儿重症监护室(NICU)收治的78例早产儿资料,根据治疗方案分为2组,PS组(选择PS治疗的患儿)和PS+氢氯噻嗪组(选择氢氯噻嗪联合PS治疗的患儿),经倾向性评分匹配后获得39对病例,评定2组治疗72 h后的临床疗效,对比2组呼吸暂停时间、吸氧时间、机械通气时间、住院时间,比较2组治疗前后的血气指标[动脉血酸碱度(pH值)、动脉二氧化碳分压(PCO_(2))、动脉血氧分压(PO_(2))]和血清IL-6、CK、CK-MB及LDH水平变化。结果相较于PS组,PS+氢氯噻嗪组的临床总有效率较高(95%和77%,P<0.05);相较于PS组,PS+氢氯噻嗪组的呼吸暂停时间、吸氧时间、机械通气时间、住院时间均缩短(P<0.05);治疗后,PS+氢氯噻嗪组早产儿的pH值、PaO_(2)均高于治疗前和PS组(P<0.05),PCO_(2)均低于治疗前和PS组(P<0.05);治疗后,2组的血清IL-6、CK、CK-MB及LDH水平均较治疗前下降(P<0.05),其中PS+氢氯噻嗪组下降幅度较PS组更显著(P<0.05);2组均未见明显不良反应。结论氢氯噻嗪联合肺表面活性物质治疗早产儿BPD的疗效确切,能改善患儿临床指标和血气指标,降低血清IL-6、CK、CK-MB及LDH水平,减轻肺部炎症,对神经系统发育起到保护作用,临床安全性良好。

基于MIMIC数据库分析乳酸脱氢酶/白蛋白比值与脓毒性休克合并急性肾损伤患者预后的相关性

脓毒症是感染引起的全身炎性反应综合征,是由机体对感染的反应失调所致,最终出现多器官功能障碍、休克甚至死亡,死亡率极高^([1-2])。作为脓毒性休克的一个常见并发症,急性肾损伤(AKI)的发生与危重患者的高死亡率相关^([3-4])。因此,寻找早期的预测因子以识别脓毒症高风险患者尤为重要。乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)是一种参与细胞能量代谢的常见酶,催化丙酮酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应。

血清乳酸脱氢酶、β2微球蛋白、铁蛋白联合改良WHO预后积分系统预测骨髓增生异常综合征预后不良的价值

目的探讨血清乳酸脱氢酶(LDH)、β2微球蛋白(β2-MG)、铁蛋白(SF)联合改良WHO预后积分系统(WPSS)评分对骨髓增生异常综合征(MDS)预后不良的预测价值。方法选取110例MDS患者作为研究对象,均检测血清LDH、β2-MG、SF水平。根据生存情况将患者分为病死组与存活组,比较2组血清LDH、β2-MG、SF水平和改良WPSS评分。分析MDS预后不良的危险因素及血清LDH、β2-MG、SF水平和改良WPSS评分单独及联合对MDS预后不良的预测价值。结果MDS预后不良发生率为40.20%(41/102)。病死组血清LDH、β2-MG、SF、改良WPSS评分和染色体核型预后不良比率均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归模型分析结果显示,血清LDH、β2-MG、SF水平和改良WPSS评分升高、染色体核型预后不良是MDS预后不良的危险因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,血清LDH、β2-MG、SF水平联合改良WPSS评分预测MDS预后不良的灵敏度和曲线下面积(AUC)分别为95.12%、0.918,均显著高于各指标单独预测(P<0.05)。结论血清LDH、β2-MG、SF水平和改良WPSS评分对MDS预后不良均具有一定的预测价值,但4项指标联合预测价值更高。

血清乳酸脱氢酶与转移性胃癌预后关系的Meta分析

目的:系统评价血清乳酸脱氢酶(LDH)在转移性胃癌患者预后作用中的价值。方法:计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、CNKI、WanFang Data、VIP和CBM数据库,搜集从建库至2021年9月1日发表的关于LDH对转移性胃癌患者预后影响的国内外文献;由两位研究者独立对文献进行筛选,并提取资料、评价偏移风险后,运用RevMan5.4软件进行Meta分析。结果:共入选8篇文献,累计转移性胃癌患者3139例。Meta分析结果显示,LDH水平升高的转移性胃癌患者的总生存期(OS)短于LDH水平正常患者[HR=1.46,95%CI(1.09,1.96),P=0.01],差异有统计学意义。按照治疗方式、样本量、发表时间、研究区域进行亚组分析,结果显示:在对照组是化疗+手术、样本量≥300、发表时间≥2015、国外的研究中相关性无统计学意义。结论:LDH水平升高可能是转移性胃癌的预后不良因素,检测LDH有助于进行合理的预后评估,可以协助临床决策。

乳酸脱氢酶/白蛋白对多发性骨髓瘤患者硼替佐米化疗耐药的影响

目的 探讨乳酸脱氢酶(LDH)/白蛋白(ALB)对多发性骨髓瘤(MM)患者硼替佐米化疗耐药的影响。方法 回顾性分析商丘市第一人民医院2021年5月至2023年5月收治的124例MM患者的临床资料。所有患者均已接受4个周期的硼替佐米联合地塞米松化疗。依据MM疗效评价标准评定化疗耐药情况,将发生耐药患者资料纳入发生组(16例),未发生耐药患者资料纳入未发生组(108例)。比较两组性别、Durie-Salmon分期、MM病程等一般资料;比较化疗前测得的LDH、ALB及其他实验室指标,并计算LDH/ALB值。通过受试者工作特征(ROC)曲线和点二列相关性分析探讨LDH/ALB对MM患者硼替佐米化疗耐药的影响。结果 发生组Ⅲ期占比、LDH、LDH/ALB高于未发生组,ALB低于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05)。经点二列相关性分析显示,LDH/ALB、LDH、ALB与MM患者硼替佐米化疗耐药发生有关(P<0.05)。绘制ROC曲线,结果显示,LDH、ALB、LDH/ALB预测MM患者硼替佐米化疗耐药发生的曲线下面积值分别为0.791、0.780、0.849,LDH/ALB预测价值最高。结论 LDH/ALB可对MM患者硼替佐米化疗耐药产生影响,其值越高,化疗耐药发生率越高。

碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶及Gleason分级用于评估低风险转移性激素敏感型前列腺癌预后的价值

目的探究碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)及Gleason分级用于评估低风险转移性激素敏感型前列腺癌(mHSPC)预后的价值,为低风险mHSPC患者的诊疗提供科学参考。方法回顾性分析2015年至2021年丽水市人民医院低风险mHSPC患者,以出现去势抵抗性前列腺癌(CRPC)作为不良预后的主要结局指标,将48例出现CRPC的患者纳入观察组,未出现CRPC的48例患者纳入对照组。比较两组患者ALP、LDH和Gleason分级状况,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ALP、LDH、Gleason分级对mHSPC出现不良预后的预测作用。结果观察组患者ALP和LDH水平明显高于对照组,观察组Gleason分级4~5级患者占比明显高于对照组(P<0.05)。高ALP(≥300 U/L)、高LDH(≥200 U/L)、高Gleason分级(4~5级)三者联合曲线下面积为0.879,灵敏度为92.1%,特异度为87.6%。结论高ALP、高LDH、高Gleason分级是低风险mHSPC患者发生不良预后的相关因素,联合使用可为低风险mHSPC患者的临床诊治方案提供重要参考。

H型高血压合并冠心病患者24h动态血压变异系数及乳酸脱氢酶水平与冠状动脉粥样硬化病变程度的相关性

目的 探究H型高血压合并冠心病患者24 h动态血压变异系数及乳酸脱氢酶(LDH)水平与冠状动脉粥样硬化病变程度的相关性。方法 对40例H型高血压合并冠心病患者进行冠状动脉造影检查,以Gensini积分表示冠状动脉粥样硬化病变严重程度,以酶联免疫吸附法检测患者LDH水平,监测患者24 h动态血压,计算24 h动态血压变异系数。比较不同冠状动脉病变程度患者24 h动态血压变异系数及LDH水平。24 h动态血压变异系数及LDH水平与动脉粥样硬化病变程度的相关性采用Pearson相关分析,对重度冠状动脉粥样硬化的影响因素行多因素Logistic回归分析。结果 入组冠状动脉粥样硬化轻度病变患者12例,中度和重度病变患者各14例。重度及中度病变患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、LDH水平及24 h血压变异系数均高于轻度病变患者(P<0.01),重度病变患者血清Hcy、LDH水平及24 h血压变异系数均高于中度病变患者(P<0.01)。Pearson相关分析显示,血压变异系数、LDH水平与Gensini积分均呈正相关(P<0.05或0.01)。多因素Logistic回归分析显示,24h血压变异系数(OR=1.326,95%CI为1.040~1.691,P<0.05)及LDH水平(OR=1.311,95%CI为1.048~1.639,P<0.05)为重度冠状动脉粥样硬化发生的危险因素。结论 H型高血压合并冠心病患者24 h动态血压变异系数及LDH水平较高,且可能与冠状动脉粥样硬化病变程度加重有关。

磁共振成像联合脑脊液乳酸脱氢酶和C-反应蛋白检测对新生儿化脓性脑膜炎临床诊疗的影响

目的 分析磁共振成像(MRI)联合脑脊液乳酸脱氢酶(LDH)和C-反应蛋白(CRP)检测对新生儿化脓性脑膜炎临床诊疗的影响。方法 将2020年6月—2023年5月在莆田学院附属医院就诊的30例新生儿化脓性脑膜炎患儿纳入观察组,同期30例非中枢神经系统感染(包括新生儿窒息和新生儿缺氧缺血性脑病)患儿纳入对照组。所有患儿均进行MRI检查,比较两组的异常率。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)并计算ROC曲线下面积(AUC),考察MRI联合脑脊液LDH和CRP检测对新生儿化脓性脑膜炎的诊断效能。结果 观察组MRI异常率显著高于对照组(100.00%比36.67%,P <0.05),脑脊液LDH和CRP水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义[LDH(U/L):41.57±4.80比37.55±4.49;CRP(mg/L):7.83±2.49比5.27±1.68;均P <0.05]。ROC曲线分析表明,MRI、脑脊液LDH、CRP诊断新生儿化脓性脑膜炎的AUC分别为0.817[95%可信区间(95%CI)为0.703~0.931]、0.737(95%CI为0.609~0.866)、0.793(95%CI为0.676~0.909),均有一定诊断价值,各指标联合检测的AUC为0.843(95%CI为0.744~0.943),诊断价值比各指标单独应用更高。结论 MRI联合脑脊液LDH与CRP检测对新生儿化脓性脑膜炎具有较高的诊断价值,能有效指导临床诊疗。

基于乳酸脱氢酶建立上皮性卵巢癌铂耐药复发预测模型

目的构建预测上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)铂耐药复发的风险模型。方法回顾性分析2012年1月1日至2022年6月30日在云南省肿瘤医院行手术治疗的1392例EOC患者的临床病理资料。对可能影响铂耐药复发的16个因素进行单因素和多因素logistic回归分析并构建logistic回归预测模型。采用加强Bootstrap法对模型进行内部验证。模型表现通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under the curve,AUC)、敏感度、特异度和Brier得分评价,并将模型可视化为列线图和网页计算器。结果多因素logistic回归分析显示,血清乳酸脱氢酶水平、国际妇产科联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、术后化疗周期和血小板计数均是影响EOC铂耐药复发的独立影响因素(均P<0.05)。基于年龄和上述变量构建的logistic回归模型的AUC、敏感度和特异度分别为0.704、62.0%和68.4%。模型在内部验证中的Brier得分为0.002。结论基于乳酸脱氢酶开发的预测EOC患者铂耐药复发的列线图可用于指导临床实践。

厌氧表达乳酸脱氢酶以提高大肠杆菌产D-乳酸光学纯度

【目的】为解决在D-乳酸工业发酵生产中使用农业粗加工或废弃物等廉价原料(含有少量L-乳酸)而导致终产物D-乳酸光纯降低的问题。【方法】构建了带有不同启动子的L-乳酸脱氢酶基因lldD的表达质粒:pUC19-PLD(PpflBp6)、pUC19-NLD(PnirB)及pUC19-PNLD(PpflBp6-PnirB),并将它们分别转化入大肠杆菌D-乳酸工程菌HBUT-D中,得到菌株HBUT-D3、HBUT-D5和HBUT-D7。通过LldD的酶活检测以及对NBS培养基(添加1 g/L L-乳酸)发酵结果的TOPSIS多元评估,优选出可快速去除L-乳酸且不影响D-乳酸发酵的菌株,并使用农业廉价原料进行发酵。【结果】HBUT-D7的LldD比酶活为64 U/g,L-乳酸的消耗速率为34 mg/(L·h),D-乳酸的生产强度为4.09 g/(L·h),综合评估为最优菌株。以玉米浆为原料进行发酵时,HBUT-D及HBUT-D7的L-乳酸消耗速率分别为10.41 mg/(L·h)及34.75 mg/(L·h);D-乳酸生产强度分别为4.24 g/(L·h)及3.87 g/(L·h);D-乳酸光学纯度分别为99.07%及99.92%。以糖蜜为原料进行发酵时,HBUT-D及HBUT-D7的L-乳酸消耗速率为6.87 mg/(L·h)和17.18 mg/(L·h);D-乳酸生产强度分别为1.93 g/(L·h)及1.88 g/(L·h);D-乳酸光学纯度分别为99.22%及99.99%。【结论】厌氧诱导启动子的表达质粒可提高菌株HBUT-D7的L-乳酸脱氢酶酶活,使其在使用廉价原料发酵时能有效消除L-乳酸,提高发酵终产物D-乳酸的光学纯度。

猪肺炎支原体乳酸脱氢酶在诱导猪支气管上皮细胞凋亡中的作用

猪肺炎支原体感染会引起宿主上皮细胞的损伤及凋亡。上皮屏障的破坏往往导致细菌和病毒的继发感染,给养猪业造成严重的经济损失,但具体的致病机制及毒力因子尚未完全阐明。前期研究发现猪肺炎支原体乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)不仅参与猪肺炎支原体的代谢还与猪肺炎支原体的毒力相关。因此,本研究通过原核表达及亲和层析获得猪肺炎支原体乳酸脱氢酶重组蛋白(recombinant LDH, rLDH),之后分别用不同浓度的rLDH与猪支气管上皮细胞(porcine bronchial epithelial cell, PBEC)孵育,经显微镜观察rLDH对细胞形态的影响,通过CCK-8法检测rLDH对细胞活力的影响。选取对细胞形态及活力影响不显著的50和100μg·mL^(-1) rLDH分别与PBEC孵育,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率,反转录荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法和免疫印记检测凋亡相关基因caspase 3、caspase 8、caspase 9、Bax、BCL-2的转录水平和蛋白水平。结果显示:猪肺炎支原体rLDH呈剂量依赖性地诱导PBEC凋亡,其作用与猪肺炎支原体菌株一致。用rLDH及Mhp 168孵育后,PBEC的促凋亡因子Bax、caspase 3和caspase 9的mRNA水平显著上调,凋亡抑制因子BCL-2的mRNA水平显著下调,caspase 8的mRNA水平未发生显著变化。促凋亡因子Bax、caspase 3的蛋白表达水平显著上调,凋亡抑制因子BCL-2的蛋白表达水平显著下调。结果表明,猪肺炎支原体可能通过LDH诱导PBEC内源性细胞凋亡,凋亡相关因子caspase 3、caspase 9、Bax和BCL-2在其中发挥重要作用。

复合诱变条件优化结合过表达乳酸脱氢酶高效合成苯乳酸

乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)作为新型生物防腐剂苯乳酸(phenyllactic acid,PLA)的天然生产菌,在自然界中普遍存在,但由于其胞壁较厚、机械强度较大,导致外源基因难以导入。为使LAB自身高效合成PLA,该研究以实验室筛选的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici GM)作为出发菌株,采用复合诱变选育出活力更高、产量更大的突变菌株,即先采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变50 s,再采用0.8%硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)诱变25 min,并在培养基中加入PLA以提高菌株抗性,进行摇瓶发酵验证和遗传稳定性验证。为解决外源基因难导入的问题,使外源DNA得到高效转化,该研究通过单因素试验对氨基酸、缓冲液、溶菌酶、菌体生长状态和电转化参数进行优化,得到最优电转化条件:添加0.75%L-苏氨酸的MRS培养基培养菌体至OD600=0.8,使用洗涤缓冲液Ⅲ(0.5 mol/L蔗糖,7 mmol/L Na_(2)HPO4,7 mmol/L NaH_(2)PO_(4),20 mmol/L MgCl_(2))洗涤菌体,溶菌酶浓度30 mg/mL于37℃处理菌体30 min,电场强度20 kV/cm。为进一步提高LAB合成PLA的产量,本研究利用基因工程手段,将质粒载体pMG36e自带启动子P32(强度低)替换为Pldh(强度高),构建L型乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)过表达质粒,并在最优电转化条件下成功转化于P.acidilactici GM中,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析表明LDH基因ldh表达上调,经过5 L罐发酵培养,添加苯丙酮酸(phenylpyruvic acid,PPA)后,PLA产量提高至56.3 g/L,转化率提高至94.8%。

乳酸脱氢酶在胃癌诊治中的研究进展

我国是世界第一胃癌大国,胃癌发病率及死亡率在我国的各种恶性肿瘤中均居第三。研究发现肿瘤细胞有自身的能量代谢特点,即使在氧气充足的情况下,肿瘤细胞也更倾向于利用糖酵解产生能量,又称为“有氧糖酵解”。有氧糖酵解可导致乳酸增加,促进肿瘤细胞的增殖及侵袭,而驱动这种现象的关键酶是乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)。在胃癌患者中LDH水平显著升高,并且LDH可在许多方面促进胃癌的发生发展。本文将论述LDH在肿瘤糖酵解中的作用、与胃癌的相关性及临床应用价值,并讨论LDH在胃癌靶向治疗中的研究进展。