凝胶层析分离纯化乳酸菌菌体蛋白条件的优化

采用凝胶过滤层析分离纯化乳酸菌菌体蛋白,选择不同的凝胶过滤介质、过滤柱高度、洗脱流速、样品上样量对经过Sephadex G-25脱盐处理的乳酸菌菌体蛋白进行洗脱,观察洗脱峰。结果表明,凝胶过滤介质、过滤柱过度、洗脱流速和样品上样量均不同程度的影响菌体蛋白的纯化效果。在本试验中,分离纯化乳酸菌菌体蛋白的凝胶过滤层析参数为:Sephadex G-75的层析介质以45 cm的柱床高度,洗脱流速0.75 m L/min,样品上样量为5%CV时,对乳酸菌菌体蛋白可达到最佳的分离纯化效果。

酶法破碎乳酸菌细胞壁提取菌体蛋白的研究

本实验旨在使用溶菌酶破碎乳酸菌菌体细胞壁,从中筛选出最佳的破壁条件,获得最高的蛋白得率。以单因素实验为基础,根据单因素实验确定好中心点后,按照Box-Behnken设计建立模型,通过响应面法优化提取工艺。结果表明:酶解pH7.73,酶解温度52℃,酶解时间1.7h,酶用量3.0mg/g时的蛋白得率最高。影响乳酸菌菌体蛋白得率的工艺因素按主次顺序为:酶解时间>酶用量>酶解pH>酶解温度。在最佳条件下,蛋白得率为49.43%。