乳酸菌固体制剂计数方法研究

从培养基、稀释剂的角度对乳酸菌固体制剂样品进行计数方法比较。昂立1号优菌多颗粒样品中嗜酸乳杆菌在改良MC培养基上培养（72±3）h后菌落形态非常小，很难进行计数，在改良MC培养基中添加0．1％吐温80将会刺激嗜酸乳杆菌的生长，利于计数；采用MRS液体溶解复水10～15min、0.1％蛋白胨盐水稀释的计数结果明显高于直接采用生理盐水复水、稀释方法，两者差异有非常显著性。

五种DNA提取方法对酸奶及菌粉中益生菌DNA提取效果比较

针对酸奶及菌粉样品,比较多种样品前处理条件,包括取样量、菌粉溶剂及溶菌酶孵育时间等,最大程度去除样品中的脂肪、蛋白质及多糖,比较五种DNA提取试剂盒对益生菌DNA的提取效果。提取的DNA经Nano Vue Plus测定浓度和纯度,PCR扩增综合评价提取效果。结果显示,酸奶取样量为100 mg时DNA浓度为49.00 ng/μL,A_(260)/A_(280)比值为1.8;采用纯牛奶溶解菌粉更为彻底,0.5 g/m L牛奶溶解菌粉后,提取DNA浓度可达到81.00 ng/μL;溶菌酶最佳孵育时间为1 h,增加孵育时间对细菌裂解没有明显帮助。同时,采用五种试剂盒所提取的DNA浓度均在20 ng/μL以上,A_(260)/A_(280)比值大于1.8或接近1.8,其中,Tiangen试剂盒提取的DNA浓度和纯度综合评价优于其他4种试剂盒。结果表明,实验建立的前处理方法能够有效的去除酸奶及菌粉中的脂肪、蛋白质及多糖,提高DNA提取的浓度及纯度;采用的五种商品化试剂盒均能用于酸奶和菌粉中益生菌DNA快速提取,在步骤、得率及纯度上各有差异,应按照不同的实验要求进行选择。