苗药了哥王中瑞香烷二萜原酸酯类成分及其抗肿瘤活性研究

目的:研究苗药了哥王Wikstroemia indica(L.) C.A.Mey.中瑞香烷二萜原酸酯类成分及其抗肿瘤活性。方法:采用硅胶柱色谱、RP-C_(18)反相柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱和半制备液相色谱等分离纯化技术获得了哥王中的瑞香烷二萜原酸酯类成分,再根据其理化性质和波谱数据鉴定各化合物的结构,并采用MTT法对化合物1、3、5进行抗肝癌HepG_(2)细胞株的活性评价。结果:从苗药了哥王中分离得到5个瑞香烷二萜原酸酯类化合物,分别鉴定为:6α,7α-dihydyoxyhuratoxin(1)、simplexin(2)、12β-acetoxyhuratoxin(3)、excoecafolin D(4)、pimelea factor P_(2)(5)。此类化合物对肝癌HepG_(2)细胞的增殖均有明显的抑制作用。结论:其中,化合物1为新化合物,化合物2~5为首次从该植物中分离得到,化合物3对肝癌HepG_2细胞增殖的抑制作用最佳,IC_(50)值为(5.75±0.15)μg/mL。

了哥王叶绿体基因组分析

【目的】阐明药用植物了哥王Wikstroemia indica的叶绿体基因组结构特点及系统进化地位,为了哥王的资源保护和可持续利用提供科学依据。【方法】采用Illumina测序平台进行了哥王叶绿体基因组测序,并通过生物信息技术和软件进行序列拼接、注释以及比对和系统进化分析。【结果】了哥王叶绿体基因组全长为149864 bp,由86347 bp的大单拷贝区(LSC)、10601 bp的小单拷贝区(SSC)以及穿插在它们之间均为26458 bp的一对反向重复区(IR)构成,具有环状双链四分体结构,包含124个基因。在了哥王叶绿体基因组中共找到64种24180个密码子,其中30种为高频使用密码子,高频使用密码子中又有29种是以A/T结尾;搜索到93个简单重复序列(SSR),其中单核苷酸重复居多(72个),且以A或T及两者组合形成的基序为优势基序。了哥王与近缘植物的叶绿体基因组IR边界存在较为明显的变异。序列比较和系统进化树显示了哥王与同属细轴荛花W.nutans具有最高的序列同源性。【结论】了哥王叶绿体基因组具有植物叶绿体基因组的典型结构,有密码子使用偏好性,含多态性较为丰富的SSR,且与细轴荛花的亲缘关系最近。

了哥王叶功能性状特征及其对土壤因子的响应

为探究了哥王Wikstroemiaindica的叶功能性状特征及其影响因素,在海岛植被调查的基础上对了哥王叶片进行取样并测定其功能性状指标,利用变异系数法和Pearson相关性分析探讨叶功能性状之间的差异与联系,运用冗余分析研究了哥王叶功能性状对土壤因子的响应。结果表明,了哥王的叶功能性状变异系数介于9.76%~23.73%,其中叶体积变异幅度最大(23.73%),叶干物质含量变异幅度最小(9.76%),整体上了哥王叶功能性状保持相对稳定。了哥王各项叶功能性状之间具有一定的相关性,联系较密切。了哥王叶功能性状主要受土壤中有机质、全氮、碱解氮的影响,土壤中有机质、全氮、碱解氮的含量与比叶面积呈正比,与叶厚度、叶体积成反比。了哥王的叶片可以通过一定的性状变异和组合来适应外部环境的变化,以较好地适应海岛恶劣的环境。该研究结果可为了哥王野生种质资源的保护、利用以及人工栽培提供参考。

了哥王(Wikstroemia indica)的生态生物学特征

对了哥王的生态生物学特征研究表明 ,了哥王分布区气候条件温暖湿润 ,生境主要为草坡和开旷林地 .了哥王耐贫瘠 ,是一种阳生性灌木 ,其光合速率平均为 7.33μmolCO2 ·m-2 ·s-1.其竞争力明显弱于同在灌草丛中分布的桃金娘 .因而在灌草丛阶段的演替过程中 ,其种群减少 ,桃金娘种群增长 .了哥王体内加权平均养分含量为N 0 .6 6 7% ,P 0 .0 81% ,K 0 .5 4 0 % ,Ca 0 .776 % ,Mg 0 .2 5 9% .种群生物量分析表明 ,荒坡上野生了哥王生物量较低 ,仅 0 .0 2 73t·hm2 .若要大量开发了哥王资源 ,需要人工种植以提高生产量 .

了哥王根茎中的酚性成分及其抗肿瘤活性研究

采用多种色谱手段,从了哥王根茎中共分离得到17个酚类化合物;通过理化常数和NMR、MS等光谱数据分别鉴定为：荛花酚（1）、罗汉松脂素（2）、丁香脂素（3）、松脂酚（4）、异落叶松脂素（5）、刺五加酮（6）、异鼠李素-3-O-刺槐双糖苷（7）、wikstaiwanone A（8）、wikstaiwanone B（9）、山奈酚（10）、芦丁（11）、西瑞香素（12）、triumbelletin（13）、赤杨二醇（14）、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（15）、绿原酸（16）、对羟基苯甲酸（17）,其中化合物3~9、13~16为首次从该植物中分离得到。体外抗肿瘤活性筛选实验表明,化合物1~4,6~9对人结肠癌SW480和SW620细胞均表现出不同程度的增殖抑制作用,其中化合物6对两种细胞的作用最为显著。

正交试验结合综合评分法优化苗药了哥王的提取工艺

目的:优化了哥王的提取工艺。方法:以了哥王的有效成分伞形花内酯、西瑞香素的含量和浸膏收率作为综合评价指标,以溶剂量、乙醇体积分数、渗漉速度为考察因素,采用单因素试验对了哥王的3种提取方法(渗漉法、煎煮法和回流提取法)进行比较,筛选最优提取方法;再用正交试验对最优提取方法的工艺条件进行优化并验证。结果:提取方法的综合评分排序为渗漉法>回流提取法>煎煮法,以渗漉法更优。渗漉法的最优工艺条件为渗漉溶剂70%乙醇,溶剂量为14倍药材量,渗漉速度为5m L/(min·kg);验证试验中3次试验的综合评分分别为98.3、99.3、98.8(RSD=0.51%,n=3)。结论:了哥王有效成分的提取方法选用渗漉法,优选出的渗漉法提取工艺稳定、重现性好。

了哥王挥发油的化学成分分析

用常规水蒸气蒸馏法提取出药用植物了哥王精油,经气相色谱-质谱联机分析,共分离出30多个峰,鉴定出其中37种化合物。挥发油主要成分是十六烷酸、9 十八碳烯酸、9, 12 十八碳二烯酸、9 十六碳烯酸、十五烷酸、十二烷酸、癸酸,其质量分数分别为60 44%、7 13%、5 48%、2 42%、1 21%、0 76%、0 51%,所鉴定的成分占挥发油总质量的77 95 %。

苗药了哥王不同炮制品乙醇提取物对小鼠的急性毒性作用比较

目的:比较苗药了哥王生品、不同炮制品乙醇提取物对小鼠的急性毒性,为了哥王汗渍法炮制工艺优选及其安全用药提供依据。方法:采用汗渍法对了哥王的饮片炮制30d得炮制品一,对了哥王粗粉分别炮制14、7d得炮制品二和炮制品三。以70%乙醇为溶剂,采用渗漉法对了哥王生品及不同炮制品进行提取,并对不同乙醇提取物进行小鼠急性毒性实验。结果:了哥王生品、炮制品一乙醇提取物的半数致死量(LD_(50))分别为4.05、6.65 g/kg,相当于临床70kg成人日用量的19、32倍。而了哥王炮制品二、炮制品三乙醇提取物的LD50无法测出;最大耐受量(MTD)分别为20.0、15.0 g/kg,相当于临床70 kg成人日用量的95、71倍;最大给药量(MLD)分别近似为30.0、20.0 g/kg,相当于临床70kg成人日用量的143、95倍。结论:了哥王炮制品的毒性明显低于生品,且了歌王粗粉炮制14d后毒性低于炮制7d。

了哥王片抗炎抑菌作用的实验研究

了哥王片是由了哥王提取浸膏制成,主要功能为清热、解毒,用于治疗支气管炎、肺炎、扁桃体炎等疾病。临床上疗效确切,为了进一步了解了哥王的抗炎抑菌作用,我们对该药进行药效学试验,研究报告如下。1 实验材料1.1 了哥王片由江西三越药业有限责任公司提供,每片含浸膏0.22g,含生药4.01g;阿斯匹林片,规格:25mg/片,由安徽华思制药有限公司出品。1.2 配药方法1.2.1 小白鼠试验用药 取了哥王片19粒,研成细粉,用蒸馏水将其配至101.7ml药液,每ml含生药0.75g。

了哥王抗肿瘤活性部位筛选

目的:研究了哥王95%、75%、50%乙醇提取物、水提物及95%乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用,确定了哥王抗肿瘤活性部位。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法考察了哥王不同提取物及95%乙醇提取物的不同溶剂萃取部位对Hela、SGC-7901、Bel-7402细胞的抗肿瘤活性。结果:了哥王95%乙醇提物对Hela、SGC-7901细胞有良好的抗肿瘤活性,其石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位对Hela、SGC-7901细胞均有不同程度的抗肿瘤活性。结论:石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位有较强的抗肿瘤活性,初步确定为了哥王抗肿瘤活性部位。

HPLC法同时测定了哥王中罗汉松脂酚和牛蒡子苷元的含量

目的建立同时测定了哥王中罗汉松脂酚和牛蒡子苷元含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱：依利特C18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：甲醇-水（体积比为45∶55）,流速：1.0 mL.min-1,检测波长：280 nm,柱温：30℃。结果罗汉松脂酚和牛蒡子苷元质量浓度分别在10.0~200.0（r=0.999 8）、5.00~100.0 mg.L-1（r=0.999 7）内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.6%（RSD=2.3%）和100.6%（RSD=2.6%）。结论该方法适用于了哥王药材的质量控制。

了哥王化学成分研究

目的:对了哥王的茎皮进行化学成分研究。方法:硅胶及ODS柱色谱分离,光谱分析鉴定化合物结构。结果:分离了6个化合物,分别鉴定为西瑞香素-7-O-β-D-葡萄糖苷(1),槲皮苷(2),大黄素甲醚(3),山柰酚-3-芸香糖苷(4),芫花苷(5),伞形香青酰胺(6)。结论:6个化合物均为首次从该植物中分离得到。

了哥王芳香类化学成分研究

目的:对了哥王的化学成分进行研究。方法:采用硅胶柱层析法从了哥王乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中分离化合物,采用光谱分析和文献对照的方法,确定它们的结构。结果:共分得4个化合物,分别为:邻苯二甲酸二丁酯(Ⅰ)、对羟基苯甲酸甲酯(Ⅱ),2,4,6-三羟基苯甲酸甲酯(Ⅲ)和芫花素(Ⅳ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为首次从该植物中分离得到,亦首次从瑞香科植物中得到。

了哥王中的1个新双香豆素

目的:研究了哥王茎皮的化学成分。方法:通过硅胶、ODS柱色谱分离化合物,利用质谱、核磁共振等现代波谱技术鉴定化合物结构。结果:分离鉴定了7个化合物,分别鉴定为西瑞香素(Ⅰ)、5,7,4′-三羟基-3′,5′-二甲氧基黄酮(Ⅱ)、胡萝卜苷(Ⅲ)、β-谷甾醇(Ⅳ)、伞形花内酯(Ⅴ)、芫花素(Ⅵ)、6-′OH,7-O-7′-双香豆素(Ⅶ)。结论:化合物Ⅶ为新化合物,化合物Ⅲ,Ⅴ为首次从该植物中分离得到。

了哥王饮片包装材料研究

目的确定了哥王饮片的包装材料。方法采用加速实验和留样观察实验,考察两种包装材料对了哥王饮片中的水分、醇溶性浸出物和西瑞香素等指标的影响,并进行综合分析评价。结果两种包装材料对了哥王饮片的质量均有一定影响。结论在两种包装材料中,选择双向拉伸PP/LDPE复合膜作为了哥王饮片的包装材料。

汗渍法炮制了哥王饮片的质量标准研究

目的:通过对10批次汗渍法炮制了哥王饮片质量标准的研究,建立其质量标准。方法:对10批次汗渍法炮制了哥王饮片进行了薄层鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、含量测定等研究,进行分析评价。结果:建议汗渍法炮制了哥王饮片质量标准中的水分不得过14.5%,总灰分不得过3.5%,酸不溶性灰分不得过1.0%,醇溶性浸出物不得少于9.0%,西瑞香素(C19H12O7)含量不得少于0.2%。结论:初步建立汗渍法炮制了哥王饮片量化质控标准评价体系。

了哥王不同提取部位抑菌作用研究

目的比较了哥王不同提取部位的体外抑菌作用。方法采用二倍稀释法测定不同提取物对11种细菌的最低抑菌浓度。结果乙酸乙酯提取物的抑菌效果显著强于正丁醇提取物,且两者对葡萄球菌属的细菌抑菌作用最强,水提取物基本没有抑菌作用。结论了哥王乙酸乙酯提取物抑菌效果显著,具有广谱抗菌作用。

了哥王片抗炎消肿及镇痛作用研究

目的 :探讨了哥王片的药理学作用。方法 :采用二甲苯所致小鼠耳部炎症试验、大鼠足跖肿胀试验 (蛋清法 )对了哥王片进行抗炎消肿作用的研究。结果 :了哥王片有明显抗炎消肿作用 (P<0 .0 5 ) ;对化学因素引起的疼痛有镇痛作用。结论 :了哥王片具有抗炎消肿。