二乙氨乙基交联葡聚糖和季氨基琼脂糖色谱分离植物脂多糖的比较

比较了应用QSepharoseFastFlow凝胶和DEAE SephadexA5 0凝胶柱色谱分离米糠提取物中米糠脂多糖 (LPSR)的效果。结果表明 :通过改变体系的离子强度 ,两凝胶都可使LPSR 与一般多糖分离 ,但仅QSepharoseFastFlow柱色谱可实现LPSR 与米糠色素的有效分离 ,并获得淡黄色、99.5 %纯度的LPSR 产品 ,而且耐盐性能好于DEAE SephadexA5 0。

反离子对牛血清白蛋白在荷电葡聚糖接枝介质中色谱行为的影响

从前期开发的具有极高的吸附容量及传质速率的二乙氨乙基葡聚糖接枝离子交换介质中选取FF-D50-Dex D100和FF-Dex D100为典型代表,利用Cl~–、SCN~–、SO_4^(2–)、HPO_4^(2–)为模型反离子,以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白,以商品化介质(Q Sepharose FF、Q Sepharose XL、DEAE Sepharose FF)为对照,在离子强度为0.06mol/L下,系统研究反离子对二乙氨乙基葡聚糖接枝介质的蛋白质吸附与洗脱行为的影响。结果表明,二乙氨乙基葡聚糖接枝介质对不同反离子的偏好性存在差异,且该偏好性差异与基团所处位置(接枝链配基或表面配基)无关。同时,介质偏好性弱的反离子会通过促进二乙氨乙基葡聚糖接枝介质的"链传递"效应加快蛋白质的传质速率,从而提高动态吸附容量。因此,在使用二乙氨乙基葡聚糖接枝介质进行蛋白质色谱柱分离过程中,可在吸附操作中使用HPO42–,在洗脱操作中使用SCN–来优化分离效果。

含卟啉基葡聚糖大分子磁共振成像造影剂的研究

将肿瘤靶向基团5-(4-氨基苯基)-10,15,20-三(4-磺酸苯基)卟啉钠(APTSPP)与二乙三胺五乙酸(DTPA)分别键接在葡聚糖侧链上,再与钆Gd(III)离子配合,从而研制出一种新型含卟啉基葡聚糖大分子磁共振成像造影剂(APTSPP-Dextran-DTPA-Gd).对所合成的配体及钆配合物分别进行了核磁共振氢谱、紫外可见光谱、傅里叶变换红外光谱等结构表征,分析了钆配合物在水溶液中的粒径分布和Zeta电位,测试了钆配合物的体外弛豫率与新西兰大白兔体内肿瘤磁共振成像性能.与Gd-DTPA相比,所得钆配合物具有较高的弛豫率,对VX2肿瘤有良好的磁共振成像性能与靶向性,能对磁共振成像的对比度与清晰度有较好的提高.

化学合成的几丁寡糖类似物诱导黄瓜对镰孢霉枯萎病的抗性

报道3种化学合成的寡糖(β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖,β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖和Lewis^a三糖)诱导黄瓜对镰孢霉枯萎病(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerium)的抗性.在黄瓜胚根期,β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖浸泡种子胚根后,表现抗病性,相对诱导抗性效果分别为21.9和22.3,β-1,3-乙酰氨基葡聚糖的最低有效诱导浓度为5μg·mL-1;而Lewis^a三糖处理不表现抗病性.在黄瓜幼苗期,用β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖叶面喷雾,均表现抗病性,相对诱导抗性效果分别是28.5和23.5,β-1,3-乙酰氨基葡聚糖的最低有效诱导浓度为10μg·mL-1;而Lewis^a三糖同样处理后不表现抗性.化学合成的几丁寡糖类似物(β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖)和Lewis^a三糖诱导黄瓜抗性的差异可能是由于糖残基、还原末端取代基及(或)其主链结构的差异.

几丁寡糖结构类似物的化学合成

合成了两个结构新颖的几丁寡糖结构类似物:β-1,3连接的乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3连接的乙酰氨基葡聚三糖,并通过核磁共振和质谱分析确证了其化学结构.与天然的几丁寡糖不同,本文所合成的葡聚二糖和葡聚三糖均采取了1→3糖苷键的连接方式,为研究几丁寡糖诱导植物抗病活性与寡糖区域异构体之间的关系提供有用材料.

含磺胺嘧啶基团的葡聚糖钆配合物的研究

将具有肿瘤靶向性的磺胺嘧啶(SD)、二乙三胺五乙酸(DTPA)与葡聚糖(dextran)大分子侧链羟基偶联,合成葡聚糖大分子配体(SD-Dextran-DTPA),再与金属钆离子Gd3+配合,从而制备肿瘤靶向性葡聚糖大分子钆配合物(SD-Dextran-DTPA-Gd).对所合成的配体及钆配合物进行FTIR、UV和1H-NMR等结构表征,测试了配体及钆配合物在水溶液中的粒径分布和zeta电位、钆配合物的体外弛豫率、细胞摄取与T1加权磁共振成像性能.与小分子钆-二乙三胺五乙酸(Gd-DTPA)相比,SD-Dextran-DTPA-Gd具有较高的弛豫率,对肺癌细胞系H460、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和T40D均有较好的亲和性,可被肿瘤细胞较好地摄取,并能获得较好的肿瘤细胞磁共振成像.

HIV-1假病毒包装及感染条件优化

目的对人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)假病毒包装及感染条件进行优化,获得高重复性、高稳定性和高滴度的假病毒包装方法和较高的感染效率。方法采用pSG3△env质粒与pcDNA3.1-SF162rev/env质粒共转染293T细胞包装病毒,对HIV假病毒骨架质粒与env真核表达质粒转染比例、转染试剂与质粒比例、假病毒收获时间对HIV假病毒包装滴度的影响进行实验,同时对感染过程中假病毒接种剂量与二乙氨乙基葡聚糖(DEAE-Dextran)使用浓度进行了优化。结果在包装过程中当HIV假病毒骨架质粒与env真核表达质粒转染比例为4∶1、转染试剂与质粒比例为3∶1,转染后培养48hHIV-1假病毒的滴度最高;在假病毒感染过程中,15μg/mL的DEAE-Dextran可有效增加假病毒的感染效率且不会对细胞造成较大毒性。结论通过对包装和感染过程中关键条件的优化,可以有效提高HIV-1假病毒的包装和感染效率,增加实验技术稳定性,为新型抗艾滋病药物筛选和艾滋病疫苗评价等研究奠定了基础。

DEAE-磁性纳米粒子提纯质粒的研究

目的应用纳米磁性粒子纯化质粒。 方法将葡聚糖-DEAE通过共沉淀法包裹在纳米磁性粒子 表面,利用带正电荷的DEAE与带负电荷的核酸之间的电荷吸附作用,通过离子交换,在细菌裂解上清液中提纯质 粒。 结果可以提纯出高纯度的质粒。 结论在纳米磁性粒子外包裹上DEAE基团,可以提纯出高纯度的质粒。