第二代杂交捕获法检测人乳头状瘤病毒DNA在宫颈癌筛查中的应用

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,2008年诺贝尔医学奖研究成果证明：子宫颈癌是由高危型人乳头状瘤病毒（HR-HPV）持续感染引起的恶性肿瘤,是唯一病因明确的肿瘤[1]。本文对我院开展第二代杂交捕获法（HC2）检测HPV DNA进行回顾性分析,探讨其在宫颈癌筛查中的作用及应用中的质量控制问题。

宫颈病变患者第二代杂交捕获-人乳头瘤病毒-DNA检测结果分析

宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。宫颈癌的发生、发展及转归受多种因素共同调控，宫颈的局部感染是最普遍的高危因素［1］，人乳头瘤病毒（HPV）感染可能是引发宫颈癌的因素。宫颈癌从宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithe-lial neoplasia，CIN）至原位癌早期浸润癌直至浸润癌的一系列由量变到质变连续发展的过程，早期发现、早期诊断、早期治疗对于从宫颈炎性病变到癌前病变以及宫颈癌就显得尤重要［2］。为了解第2代杂交捕获（HCⅡ）-人乳头瘤病毒（HPV）-DNA 检测（HCⅡ-HPV-DNA）在宫颈癌及 CIN 诊断中的预测价值，本研究对272例患者的宫颈分泌物作了13种高危型HPV 检测，并将结果同宫颈活检组织检查进行了对比，报告如下。

杂交捕获二代法检测在宫颈癌筛查中的应用价值

目的探讨杂交捕获二代(HCⅡ)法检测高危型人乳头瘤患者(HPV)DNA的临床应用价值。方法对1 189例患者进行HCⅡ法HPV检测和液基细胞学(TCT)检测,对高度怀疑病变的患者进行阴道镜多点活检。结合病理结果进行分析。结果1 189例样本中,经TCT检测ASC-US 32例(2.69%),ASCUS-H35例(2.94%),LSIL76例(6.39%),HSIL17例(1.43%)。病理证实炎症70例(49.65%),CINⅠ19例(13.48%),CINⅡ22例(15.60%),CINⅢ17例(12.06%),浸润癌5例(3.55%),湿疣8例(5.67%)。HPV阳性组年龄明显小于阴性组(P<0.01)。各病理组HPV感染率分别为炎症59%、CINⅠ68%、CINⅡ77%、CINⅢ100%、浸润癌100%、湿疣62%。141例阴道镜下多点活检结果:TCT和HPV均(-)者无高度病变发生;TCT(-)和HPV(+)者中≥CINⅡ的检出率为17%,在TCT异常和HPV阳性同时存在的病例中最高(41%);仅TCT异常的HPV(-)者为13%,且5例均为CINⅡ,无原位癌和浸润癌的发生。结论持续的HR-HPV感染与宫颈病变的演进有关,HC-Ⅱ法HPV检测是宫颈癌有价值的辅助诊断技术,与细胞学联合检测,为最佳宫颈癌筛查方案。

第二代捕获杂交法(HC-Ⅱ)检测HPV-DNA在宫颈癌筛查中应用

目的:寻找一种方便、有效的检测宫颈HPV(人乳头瘤病毒)感染及其分型的检验方法。方法:以自愿的方式选择聚合酶链反应(PCR)检测法和第二代杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测HPV感染率。对其结果进行统计学分析,检验HC-Ⅱ与PCR的结果是否存在差异。结果:第二代杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测人乳头瘤病毒(HPV)DNA检出率达98%以上,与PCR检出率基本相符,通过统计学方法检验无差异性。结论:HC-Ⅱ检测HPVDNA可成为一种广泛应用的临床检验技术,作为筛查宫颈癌及癌前病变的首选方法。

MicroRNA联合TCT、HC2-HPV检测高危人乳头瘤病毒对早期宫颈癌的诊断价值

目的分析micro RNA联合宫颈液基薄层细胞学检测(TCT)、二代杂交捕获法检测高危人乳头瘤病毒(HC2-HPV)与病理学分析对早期宫颈癌诊断价值。方法选取2016年3月-2017年3月于河南大学淮河医院进行就诊的疑似宫颈癌患者150例,根据病理学诊断结果分析TCT、HC2-HPV及micro RNA检测的诊断价值。结果 TCT诊断结果 [正常范围(NR)、意义不明的不典型鳞状细胞(ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌(SCC)]与病理学结果 [良性细胞改变(BCC),不典型增生轻度(CIN-I),中度(CIN-II),重度(CIN-III),鳞状细胞癌(SCC)]比较差异有统计学意义。TCT诊断结果≥ASCUS有73例呈阳性占48.67%(73/150),病理学结果≥CIN-I有79例,占52.67%(79/150)。病理学诊断结果(BCC,CIN-I,CIN-II,CIN-III及SCC)与HC2-HPV阳性率差异较大,且其随宫颈癌变严重程度逐渐升高,差异有统计学意义(χ~2=23.710,P=0.000)。病理学诊断结果与micro RNA相对表达量有关,Mi RNA-21与Mi RNA-193b表达量随宫颈癌变严重程度逐渐升高;而Mi RNA-124与mi RNA-195表达量随宫颈癌变严重程度逐渐降低。HC2-HPV阳性率随宫颈癌变严重程度逐渐升高,差异有统计学意义(χ~2=40.896,P=0.000)。micro RNA联合TCT、HC2-HPV检测的敏感性为98.73%,特异性为98.59%,诊断符合率为98.67%,均高于单项micro RNA、TCT、HC2-HPV或者联合micro RNA+TCT、HC2-HPV+TCT及micro RNA+HC2-HPV的比较,差异有统计学意义(P<0.05);此外,micro RNA的敏感性、特异性及诊断符合率优于单一TCT及HC2-HPV。结论采用micro RNA联合TCT、HC2-HPV,用于早期宫颈癌患者的诊断,具有较高的敏感性、特异性及诊断符合率。

高危型人乳头状瘤病毒检测在子宫颈癌筛查中的意义

目的:探讨高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测在子宫颈癌筛查中的意义。方法:对2 442例子宫颈疾病患者进行液基细胞学(TCT)检测,2 147例患者进行HPV杂交捕获法二代或核酸分子快速导流杂交技术检测(HPV检测),其中783例患者同时进行TCT和HPV检测。723例因细胞学异常或细胞学正常而HR-HPV检测阳性,或细胞学正常HR-HPV阴性临床高度怀疑病变的患者行阴道镜下多点活检、宫颈电圈切除术(LEEP),结合病理结果进行分析。结果:TCT联合HPV检测的样本中,TCT正常或炎症、不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞(不除外高度病变非典型鳞状上皮细胞5例,合并计算)、低度鳞状上皮内瘤变、高度鳞状上皮内瘤变的HR-HPV阳性率分别为22.39%、48.09%、74.47%和88.46%,差异有统计学意义(P<0.01);随着细胞学诊断级别的升高,HR-HPV阳性率显著上升。阴道镜下多点活检、LEEP病理结果:正常或炎症组、宫颈上皮内瘤变(CIN)1、CIN 2、CIN 3、鳞状细胞癌和湿疣中HR-HPV阳性率分别为23.72%、83.87%、85.19%、88.10%、92.86%、72.37%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:持续的HR-HPV阳性与宫颈病变的演进有关,HR-HPV检测在子宫颈癌筛查中具有重要意义。

人乳头状瘤病毒检测方法研究进展

人乳头状瘤病毒(Humanpapilloma virus,HPV)的持续感染是宫颈癌发生和发展的重要条件。HPV的检测对宫颈癌及癌前病变的早期诊断、治疗后随访具有重要意义。本文就HPV检测方法研究进展作一综述。

观察实时荧光PCR法在高危型人乳头瘤病毒检测中的应用

目的:观察实时荧光PCR法在高危型人乳头瘤病毒检测中的应用效果。方法:2018年6月-2019年8月收治高危型人乳头瘤病毒感染患者83例,分别采用实时荧光PCR法和二代杂交式捕获法(HCⅡ)进行2次检测,通过病理检测结果来判断两种方式的检测率并进行比较。结果:实时荧光PCR法对高危型人乳头瘤病毒的总检测率优于HCⅡ法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:相较于HCⅡ检测法,实时荧光PCR检测法在高危型人乳头瘤病毒上具有更高的准确率,应以其检测结果作为主要病症判断依据,可适当参考HCⅡ检测法的检测结果。

高危型人乳头瘤病毒检测在宫颈高度鳞状上皮内瘤变的应用价值

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测在宫颈高度鳞状上皮内病变(HSIL)中的应用价值。方法选取2011年10月至2013年6月因HSIL住院治疗的患者共119例。患者术后进行细胞学和HR-HPV检测,术后半年内每3个月随访1次,其后每6个月随访1次,随访至少18个月。结果 119例患者术后3、6、12、18个月总的HR-HPV转阴率分别为44.53%、83.19%、87.39%、90.76%,术后6、12、18个月总的HR-HPV转阴率均高于术后3个月,差异有统计学意义(P<0.05);术后6、12、18个月总的HR-HPV转阴率两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。CINⅡ级、CINⅢ级患者术后3、6、12、18个月HPV转阴率与原位癌比较,差异均有统计学意义(P<0.05);CINⅡ级和CINⅢ级患者之间HPV转阴率比较差异无统计学意义(P>0.05)。手术切缘阳性或术后复发者均有HR-HPV持续感染,但HR-HPV转阴的患者术后均无复发。结论 HR-HPV检测结果反复阳性是HSIL复发的高危因素。

高危型人乳头状瘤病毒感染与卵巢上皮癌相关因素的分析

目的探讨高危型人乳头状瘤病毒感染与卵巢上皮癌的关系。方法选择经术后病理确诊的90例标本,其中卵巢上皮癌30例、卵巢上皮良性肿瘤30例、卵巢正常组织30例。采用第二代杂交捕获法来检测高危型HPV-DNA病毒。结果①30例卵巢上皮癌中高危型HPV(HPV16,HPV18)阳性11例(36.67%);卵巢上皮性良性肿瘤中高危型HPV(HPV16,HPV18)阳性2例(6.67%);正常卵巢组织中无1例阳性。②卵巢上皮癌组与卵巢上皮良性肿瘤组、正常卵巢组织的高危型HPV(HPV16,HPV18)感染率相比,均有显著性差异(χ2=7.95,P<0.05;χ2=13.47,P<0.05)。③卵巢上皮良性肿瘤与正常卵巢组织的HPV(HPV16,HPV18)感染率相比,两者无显著性差异(χ2=1.40,P>0.05)。④卵巢上皮癌组织中7例(23.33%)HPV16阳性,4例(13.33%)HPV18阳性,两者比较无显著性差异(χ2=1.001,P>0.05)。结论高危型HPV的感染可能与卵巢上皮性癌有关。

乳腺导管内乳头状瘤高危型人乳头瘤病毒感染状况的临床研究

目的:研究乳腺导管内乳头状瘤中是否存在高危型人乳头瘤病毒(HPV)的感染。方法:采用二代杂交捕获技术(HC2)定量检测30例乳腺导管内乳头状瘤患者的肿瘤组织或乳头溢液和18例乳腺纤维腺瘤患者肿瘤组织中13种高危型HPV DNA的含量。结果:30例乳腺导管内乳头状瘤组织或溢液中有3例呈阳性(检测值>1),阳性率为10%,而18例乳腺纤维腺瘤患者肿瘤组织中未发现高危型HPV的感染。30例乳腺导管内乳头状瘤患者中中央型导管内乳头状瘤11例,周围型导管内乳头状瘤19例,3例阳性者均为中央型,中央型导管内乳头状瘤的HPV阳性率与周围型导管内乳头状瘤存在明显差异(P<0.05)。结论:乳腺导管内乳头状瘤存在高危型HPV的感染,HPV感染的来源可能是通过乳管的开口进入乳腺,不能支持高危型HPV感染与乳腺导管内乳头状瘤发展及癌变有关的观点。

惠州地区妇女宫颈感染高危型人乳头瘤病毒调查

目的研究高危型HPV-DNA检测负荷量与宫颈病变程度的相关性。方法分析2013年1月至2014年12月就诊于惠州市中心人民医院妇科（门诊和住院）并采用第二代基因杂交捕获法检测高危型HPV-DNA的患者9917例，从中筛选出1209例检测结果为阳性的患者，并同时行液基细胞学检查（TCT）。结果（1）9917例样本中，HPV感染率12．19％，21-50岁年龄段感染率总体高于其他年龄段（P〈0．05）。（2）l209例高危型HPV-DNA阳性患者中，细胞学诊断：未见上皮内病变835例（69．07％），炎性反应细胞改变179例（14．8l％），ASC33例（2．73％）,LSIL59例（4．88％），HSIL103例（8．52％）。将高危型HPV-DNA检测结果阳性负荷量分为1-100、10-300,301-600,601-1000、〉1000pg／mL组，看不同TCT结果的负荷量分布情况，可见每组的比率并不完全随宫颈病变的加重雨呈递增趋势。（3）宫颊细胞学病变程度与HR-HPv-DNA负荷量相关系数r=0．245（P〈0．01）。结论高危型HPV—DNA负荷量与宫颈病变程度并不完全相符，高危型HPV-DNA负荷量并不能作为预测宫颈痛变严重程度的指标。

实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值分析

目的:探讨实时荧光PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值。方法:选取笔者所在医院妇产科2013年4月-2014年4月收治的102例感染人乳头瘤病毒患者作为研究对象,使用对照性试验的方案对检验结果进行分析,分别使用实时PCR与第二代杂交式捕获法HCⅡ检测102例患者的取样标本,结合患者的病理资料及两种检测的结果对检测的准确性和特异性进行对比。结果:实时荧光PCR与HCⅡ关于CIN-HPV的阳性检出率分别为91.7%和86.1%,对鳞状上皮病变和慢性宫颈炎阳性的检出率分别为58.8%和35.3%,在对此项的阳性检出率上,实时荧光PCR明显优于HCⅡ,差异有统计学意义(P<0.05),实时荧光PCR的阳性检出率为71.6%,HCⅡ的为62.7%,两组患者的检出率进行比较,实时PCR患者明显优于HCⅡ组患者,差异有统计意义(P<0.05),经过统计,两种方法的总符合率是81.0%,两种方法在CINⅡ及CINⅢ程度的宫颈病变具有较好相关性,同时发现实时荧光PCR的特异性与灵敏性均明显优于HCⅡ,差异均有统计意义(P<0.05)。结论:第二代杂交捕获法和实时荧光PCR技术均为临床上比较有效的检测人乳头瘤病毒的手段,这两种方法对HPV的诊断结果具有较高的相关性,然而,实时PCR技术相较HCⅡ有更好的特异性和灵敏性。

人乳头瘤病毒核酸检测技术进展及其应用

当今,随着分子学生物技术的不断发展,人们用于人乳头瘤病毒检测的手段也越来越多,其中核酸检测主要包括第2代杂交捕获、聚合酶链反应、原位杂交、Southern杂交和斑点杂交等方法.临床应用的有第2代杂交捕获和荧光定量聚合酶链反应.第2代杂交捕获法为一种半定量方法,是目前美国食品与药物管理局唯一批准能够在临床使用的人乳头瘤病毒DNA检测技术.该法具检测效能高,并可对人乳头瘤病毒进行高危型和低危型分析,为临床人乳头瘤病毒(特别是高危型人乳头瘤病毒)感染的早期诊断和监测提供了新的手段.

长春地区38260例女性高危型人乳头瘤病毒感染现状研究

目的了解长春地区女性高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)近4年来的感染现状,分析其与时间、年龄的关系以及门诊和体检女性进行HR-HPV检测的年龄构成比等。方法回顾性分析2017.05-2021.05就诊于吉林大学第一医院的38 260例女性HR-HPV检测结果(其中门诊35 568例,体检2 692例)。使用χ;检验进行统计学分析。结果2017.05-2021.05,长春地区女性进行HR-HPV检测的总人数及总阳性人数逐渐增加,但HR-HPV的阳性率逐渐下降。门诊女性HR-HPV检出阳性率在4-6月份最高,7-9月份最低。进行HR-HPV检测的人群以41-45岁最多(门诊19.01%,体检21.77%),其次是35-40岁(门诊16.96%,体检19.24%)。门诊人群检出阳性率具有年龄差异,体检人群检出阳性率无年龄差异。结论长春地区女性HR-HPV检出阳性的人群以41-45岁居多。门诊女性HR-HPV检出阳性率具有季节性,各年龄组间检出阳性率差异有统计学意义。预防HR-HPV感染,定期体检与常规宫颈癌筛查是必要手段。

实时荧光PCR在人乳头瘤病毒临床检测中的应用

目的分析和探讨实时荧光PCR技术在人乳头瘤病毒(HPV)中的检测价值。方法随机选取2010年10月～2011年10月于本院妇产科接受诊治的人乳头瘤病毒感染患者102例,分别使用第二代杂交捕获法(HCⅡ)和实时荧光PCR对102例患者的标本进行检测,结合患者的病理资料对两种检测方法的结果进行比较分析。结果病理资料显示本组病例中宫颈上皮内瘤变(CIN)的有38例,慢性宫颈炎和鳞状上皮病变的36例,HCⅡ和实时荧光PCR对CIN的HPV阳性检出率分别为86.84%和94.74%,对慢性宫颈炎和鳞状上皮病变的阳性检出率分别为36.11%和58.33%;HCⅡ的HPV总阳性检出率为62.75%,实时荧光PCR为71.57%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05),两种方法的总符合率为82.35%;两种手段在高危型宫颈病变的检测具有较好的相关性,实时荧光PCR的灵敏性和特异性要略好于HCⅡ。结论实时荧光PCR和第二代杂交捕获法是临床上检测人乳头瘤病毒的有效方法,实时荧光PCR具有较好的灵敏性和特异性,为宫颈类疾病的早发现和治疗提供可靠的依据。

妊娠期妇女高危型人乳头瘤病毒感染与宫颈病变的相关性研究

目的：探讨妊娠期妇女高危型人乳头瘤病毒（HR‐HPV）感染与宫颈病变的相关性。方法选取重庆华西妇产医院就诊的18～43岁妊娠期妇女486例，行第二代分子杂交捕获技术（HC2‐HPV‐DNA）和超微病原体可视检测技术（TH）2种方法联合检测及电子阴道镜下病理活检，以病理活检结果为诊断宫颈病变的金标准。结果486例妊娠期妇女 HR‐HPV 检测阳性患者161例，阳性率33．12％（161／486）；病理组织学诊断出宫颈癌（ICC）及癌前病变（CIN）24例；HPV 阳性患者的宫颈癌及癌前病变22例，敏感性91．67％（22／24）。 HR‐HPV 感染情况在不同年龄段分布，差异有统计学意义（P＜0．05），HR‐HPV 病毒载量及阳性表达率越高，宫颈病变的程度越高。结论妊娠期妇女不同年龄段的 HR‐HPV 感染率不同；HR‐HPV 阳病毒载量与 CIN 及 ICC 发生有关，与宫颈病变的发生过程有关，但与宫颈病变的严重程度无关；妊娠期妇女 HPV 感染的宫颈病变阳性率和病毒载量与非妊娠期妇女相似；HC2‐HPV‐DNA 法是目前筛查癌前病变及宫颈癌的最佳方法。

高危型人乳头瘤病毒诊断中实时PCR检验的应用研究

目的探析实时聚合酶链式反应(PCR)检验在高危型人乳头瘤病毒诊断中的临床价值。方法200例高危型人乳头瘤病毒患者,均采用实时PCR检验法、第二代杂交式捕获法进行检验。比较两种不同检验法对不同程度宫颈病变患者高危型人乳头瘤病毒阳性检出率;两种不同检验法对高危型人乳头瘤病毒的阳性检出率。结果70例患者伴有不同程度的宫颈上皮内瘤病变(CIN),65例患者伴有鳞状上皮病变和慢性宫颈炎。实时PCR检验法对鳞状上皮病变和慢性宫颈炎患者高危型人乳头瘤病毒的阳性检出率为63.08%,显著高于第二代杂交式捕获法的43.08%,差异具有统计学意义(P<0.05);实时PCR检验法与第二代杂交式捕获法对CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者高危型人乳头瘤病毒的阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实时PCR检验法对高危型人乳头瘤病毒的阳性检出率为72.00%(144/200),显著高于第二代杂交式捕获法的62.50%(125/200),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在高危型人乳头瘤病毒的临床诊断中,运用实时PCR检验可获得理想效果,阳性检出率较高,可为疾病的诊断提供科学依据,值得推广应用。

实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒诊断中的价值分析

目的研究高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)应用实时聚合酶链式反应(PCR)检验诊断的临床价值。方法选取73例高危型人乳头瘤病毒患者,分别进行实时PCR检验、第2代杂交式捕获法检验,对比两种检验不同程度宫颈病变检出率、人乳头瘤病毒(HPV)阳性检出率及诊断效能。结果73例患者中不同程度宫颈上皮内瘤变35例,鳞状上皮病变和慢性宫颈炎32例。实时PCR检验鳞状上皮病变和慢性宫颈炎检出率高于第2代杂交式捕获法检验,差异有统计学意义(P<0.05),但两种检验宫颈病变检出率对比差异无统计学意义(P>0.05)。实时PCR检验HPV阳性检出率为75.34%,明显高于第2代杂交式捕获法检验的58.90%,差异有统计学意义(P<0.05)。实时PCR检验诊断准确率、特异性均高于第2代杂交式捕获法检验,差异有统计学意义(P<0.05),两种检验方法敏感性对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论高危型人乳头瘤病毒患者应用实时PCR检验诊断价值较高,其特异性和敏感性较高,在临床患者病情诊断中具有重要作用,值得临床推广。