异源四倍体鲫鲤的受精细胞学

异源四倍体鲫鲤的成熟卵子处于第二次减数分裂中期 ,精子通过受精孔进入卵内。精子入卵以后 ,受精孔立即被受精塞堵住。受精后 8min ,受精卵出现明显的精子星光 ,同时进入第二次减数分裂后期 ,即将排出第二极体 ;13min时 ,精子头部开始膨胀 ,趋向核化 ;18min时 ,雌雄原核均已形成 ,并向胚盘中央靠近 ;2 3min时 ,雌、雄原核开始接触 ;33min时 ,雌、雄原核完全融合成为一个合子核 ;38min时 ,受精卵开始第一次卵裂 ,5 3min后分裂形成两个子核。该研究证明异源四倍体鲫鲤和大多数二倍体鱼一样 ,具有正常的受精细胞学程序 ,受精方式为单精受精。

用雄核发育方法制备改良异源四倍体鲫鲤群体

用UV照射金鱼的卵子使其卵核的遗传物质失活,再与异源四倍体鲫鲤(AT)产生的二倍体精子受精,在无雄核染色体加倍处理情况下,成功地获得了两性可育的二倍体雄核发育鱼(A0).Ⅱ龄性成熟的A0自交形成了雄核发育鱼自交子一代(A1).本研究对10月龄A1的染色体数目、性腺的显微和亚显微结构以及外型特征进行了观察,实验结果表明:(ⅰ)A1中包含有四倍体(A1-4n)、三倍体(A1-3n)以及二倍体后代(A1-2n),他们所占比例分别为85%,10%和5%,其染色体数目分别为4n=200,3n=150和2n=100.其中四倍体和三倍体的形成证明二倍体A0能产生二倍体配子.二倍体雄核发育鲫鲤杂交鱼产生二倍体配子的原因与早期生殖细胞的核内复制机制有关.(ⅱ)A1-4n的性腺为两性型且发育正常.其中雄性个体能挤出白色精液,其中的二倍体精子头部明显比红鲫的单倍体精子头部大.这些二倍体精子具有正常结构,由头部和尾部组成,头部与尾部交接处有多个线粒体,精子尾巴的中央轴有典型的"9+2"微管结构.A1-4n雌性个体的卵巢发育饱满,其中含有大量Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ时相的卵母细胞.在Ⅳ时相卵母细胞的放射膜上能观察到受精孔.同时期的A1-2n,A1-3n的性腺发育异常,均表现为不育.A1-2n的不育性与其为远源杂交二倍体有关,A1-3n的不育性与其为远源杂交三倍体有关.(ⅲ)与AT相比,A1-4n不仅具有生长速度快、抗逆性强的优点,而且在外型上具有体背高、尾柄短、头部小等优良性状.本实验说明运用雄核发育技术不仅能获得两性可育的四倍体鱼,而且能对异源四倍体鲫鲤进行有效的遗传改良,这在细胞遗传研究和鱼类育种方面都具有重要意义.

日本白鲫(♀)×四倍体鱼(♂)的受精细胞学研究

日本白鲫的卵球属端黄卵，盘状卵裂，接受精子的适当时期，是卵母细胞第二次分裂中期，二倍体的精子从受精孔进入卵内，二倍体的精子头部直径约为2．5um，日本白鲫的卵子受精孔内径约为5um，为单精受精。水温18℃—20℃下，二倍体精子进入日本白鲫卵后10—15min出现明显的精子星光，卵子排出第二极体；15—20min雌雄原核均已形成；35min后雌雄原核融合；40min后，开始第一次卵裂，以后的分裂每次间隔约15min。综上所述，此杂交具有正常的受精细胞学程序，生成三倍体合子。