提莫菲维小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代的SRAP分析

采用SRAP技术分析了提莫菲维小麦二倍体与野燕麦远缘杂交后代的真实性及其特点。结果表明,22对SRAP引物中,20对引物在双亲间扩增出多态性条带,其多态性比率为71.76%。me4-em1、me4-em3和me3-em33对引物在提莫菲维与二倍体野燕麦杂交的F3株系中扩增出双亲的特异带,表明该F3株系具有双亲的遗传物质,该F3株系是提莫菲维小麦和二倍体野燕麦成功属间杂交的真实杂种后代。在该F3株系的扩增结果中部分双亲带型消失,并且提莫菲维小麦消失的带数远少于野燕麦消失的带数;同时有非父母标记新带型出现。杂种后代DNA序列的这种变化可能有利于新形成异源多倍体小麦的快速进化、遗传协调和遗传稳定性。

野生二粒小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代的核型分析及进化关系

对野生二粒小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代进行染色体核型分析。结果表明:杂交后代084株系的核型公式为2n=6x=42=36m(4SAT)+6sm,核型为1A,为极对称核型,属于原始类型;野生二粒小麦、二倍体野燕麦及084株系的进化指数分别为1、4和1,表明084株系的进化程度与野生二粒小麦一致,低于二倍体野燕麦;084株系的染色体相对长度较亲本大,且其平均臂比、核型不对称系数及臂比大于1.7的染色体比例均在野生二粒小麦与二倍体野燕麦之间,说明远缘杂交在一定程度上对加速小麦属的进化有重要意义;084株系染色体臂比与母本的相近,且存在4对染色体与父本的相对长度和臂比极为相近,核型分析结果从一定程度上证明了野生二粒小麦与二倍体野燕麦杂交后代的真实性。

提莫菲维小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代的DNA斑点杂交分析

为了鉴定提莫菲维小麦与二倍体野燕麦属间远缘杂交后代的真实性,以地高辛标记的二倍体野燕麦DNA为探针、提莫菲维小麦为封阻剂对其远缘杂交后代进行了DNA斑点杂交分析。结果表明:杂交液中使用的探针浓度为25 ng/mL,探针与封阻DNA比例为1∶100时可完全避免假阳性现象,杂交后代出现了蓝紫色斑点杂交信号。提莫菲维小麦与二倍体野燕麦杂交后代中含有二倍体野燕麦的遗传物质,在一定程度上证实了其远缘杂交后代的真实性。

二倍体野燕麦染色体的C-带分析

采用C-带技术对二倍体野燕麦根尖细胞染色体进行了带型分析,以研究该野燕麦染色体的C-带特点。结果表明:二倍体野燕麦具有7对染色体,其上共有35条带,其中长臂具有带纹19条,包括13条中间带(I),6条末端带(T);短臂具有8条带纹,包括2条中间带(I),6条末端带(T),另外还有1条随体带(S)以及7条着丝点带(C),其带型公式为2n=14=2CIT++2CIT+8CI+T+2CI+T+S。二倍体野燕麦染色体组成为CC,核型为2A,属于较对称核型,进化指数为7。