金黄色葡萄球菌临床分离株功能基因及其二元分型研究

目的 研究一组金黄色葡萄球菌临床分离株毒力基因和耐药基因的存在状况.方法 连续收集浙江省宁波市第一医院2013年7至9月临床分离的金黄色葡萄球菌共40株,采用聚合酶链反应（PCR）的方法分析42种毒力基因和11种耐药基因,再以10类毒力基因和1种耐药基因mecA检测结果作二元分型.结果 40株金黄色葡萄球对青霉素的敏感率为12.5％ （5/40）,对红霉素的敏感率为42.5％（17/40）,对其余15种抗菌药物的敏感率均大于65.0％.除了人主要组织相容性复合体（M HC）类似蛋白编码基因map未检出,其他几类毒力基因：黏附素、细胞毒素、荚膜抗原、超抗原、丝氨酸蛋白酶均有检出,检出率为2.5％～100.0％.耐β-内酰胺类、氨基糖苷类、红霉素类、四环素类、季铵盐消毒剂、抗菌肽的耐药基因均有检出,检出率为2.5％～37.5％.40株菌株经二元分型可分为16种阳性基因检出模式,每株菌最少检出3类毒力基因,最多检出7类毒力基因和1类耐药基因mecA.结论 本组菌株耐药表型和耐药基因型符合率较高,菌株携带多种毒力基因和耐药基因.

联合应用分子血清分型与二元基因分型检测单核细胞增多性李斯特菌的研究

目的了解食品中单核细胞增多性李斯特菌(LM)的分子血清型分布,并探索二元基因分型方法在LM分型检测中的意义。方法对2005年-2012年间河北省分离自食品的154株LM进行分子血清分型与二元基因分型分析。结果 154株LM中,1/2a型菌株最多,占52.60%,其次为1/2c型(22.08%)、1/2b型(15.58%)和4b型(9.74%)。二元基因分型可将154株LM分为31个BT(Binary Type)型,分辨力(DI值)为92.28%。二元基因型与分子血清型综合分析,可将154株LM分为34个型别,DI值为92.56%。通过对进化树分析可见,大多数BT型仅见于一种血清型,仅少数BT型见于2种血清型,提示二元基因型和分子血清型是否存在一种紧密的关系,尚需进一步研究证明。结论分子血清分型与二元基因分型综合应用于LM的分型研究,分型能力强,且具有操作简便、快速、高通量的优势,便于推广,可应用于暴发确认与溯源检测。

69株食源性致病菌单核细胞增生李斯特氏菌的分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分型研究

目的对多种分子分型方法在单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分型中的应用进行分析和比较,确定适合于不同实验室的分型检测方法,并进一步掌握食源性Lm的病原特征。方法采用分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分型方法对分离自食品的69株Lm进行分型检测,并对结果进行分析。结果 69株Lm食品分离株中,1/2a型菌株有29株,1/2b型有19株,1/2c型有7株,4b型有14株。二元基因分型法将69株Lm食品分离株分为19个二元基因型(Binary type,BT型),DI值为91.60%;主要的BT型为BT146、BT254、BT222、BT82、BT159和BT190。多位点序列分型法将69株Lm食品分离株分为16个序列型(Sequencing type,ST型),DI值为89.98%;主要的ST型为ST8、ST87、ST2、ST1、ST3和ST9。结论分子血清学方法和二元基因分型方法具有操作简便、检测结果易于分析、较快提供检测结果的优点,可作为实验室的一线技术用以对李斯特氏菌病暴发的发现和确认。

血清人附睾蛋白4、糖链抗原125及卵巢恶性肿瘤风险算法在上皮性卵巢癌二元论分型中的应用价值

目的探讨血清HE4和CA125及ROMA在上皮性卵巢癌二元论分型中的价值。方法选择2016年1月-2018年6月温州医科大学第二附属医院因盆腔肿块收治而拟行手术的患者,其中上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)患者112例(Ⅰ型63例,Ⅱ型49例),卵巢良性疾病(Benign ovarian disease,BOD)患者169例,另包括同期体检后各项指标正常对照(Normal control,NC)100例;采用电化学发光法检测血清HE4、CA125水平,并计算ROMA指数值,分析3个指标在上皮性卵巢癌中的应用价值。结果EOC组HE4、CA125及ROMA指数水平显著高于NC组和BOD组(P<0.01),而NC组和BOD组3个指标水平无差异(P>0.05);EOC患者随着FIGO病理分期增加,HE4、CA125水平和ROMA指数逐渐升高,并且EOC-II患者HE4、CA125水平和ROMA指数显著高于EOC-Ⅰ患者;ROMA指数诊断卵巢癌效率优于HE4和CA125,并且ROMA指数区分EOC-Ⅰ和EOC-Ⅱ特异性优于HE4和CA125,而HE4和CA125敏感性更高。结论HE4和CA125在诊断EOC中的敏感性优于ROMA指数,但是ROMA指数在诊断EOC和EOC分型中更有效,特异度更高。