原生二十二碳六烯酸纯牛奶对小鼠学习记忆功能的辅助改善作用

探讨了原生二十二碳六烯酸纯牛奶对小鼠学习记忆障碍的辅助改善作用。将SPF级昆明小鼠设置为正常小鼠、记忆获得障碍模型小鼠两个模型,每个模型中包含对照组,低(6.67 mg/kg体质量)、中(13.33 mg/kg体质量)、高(40.00 mg/kg体质量)剂量组。各组小鼠灌胃30 d的受试物后,依次进行跳台、避暗和水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力。跳台实验结果显示,与模型对照组相比,模型中、高剂量组测试期潜伏期显著延长(P<0.05)并且错误次数极显著减少(P<0.01);避暗实验结果显示,与阴性对照组相比,中剂量组消退期错误次数和错误动物数均显著减少(P<0.05);水迷宫实验结果显示,与模型对照组相比,模型中剂量组到达终点的总时间显著减少(P<0.05)。结论为原生二十二碳六烯酸纯牛奶可以通过延长测试潜伏期并减少错误次数和错误动物数起到辅助改善小鼠学习和记忆障碍的作用。

二十二碳六烯酸治疗癫痫的作用机制研究进展

癫痫是一种神经系统的慢性疾病,主要由大脑异常放电引起,可导致患者头痛、认知障碍及情绪异常波动等,严重影响患者身心健康,给家庭和社会带来沉重负担。目前关于癫痫的具体发病机制研究较少,且治疗癫痫的药物效果有限,还可产生一定的副作用,因此需寻找更多安全有效的天然产物预防和治疗癫痫。二十二碳六烯酸是人体必需的一种多不饱和脂肪酸,主要来源于海洋生物,具有提供能量、影响炎症反应、免疫反应和保护神经等多种生物功能。本文主要综述抑制细胞凋亡、抗氧化和抗炎等多种途径对二十二碳六烯酸治疗癫痫的研究,为癫痫治疗的新思路提供参考依据。

饲粮中添加富含二十二碳六烯酸和月桂酸单甘酯的复合物对公猪精液品质的影响

本试验旨在研究饲粮中添加富含二十二碳六烯酸(DHA)和月桂酸单甘酯(GML)的复合物对公猪精液品质的影响。选择48头19~24月龄杜洛克公猪,随机分成4组,每组12个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验1、2和3组分别在基础饲粮中添加0.18%、0.24%和0.30%富含DHA和GML的复合物。试验期16周。结果表明:1)试验2和3组的精子DHA、n-3多不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量均极显著高于对照组(P<0.01)。2)在第16周时,试验1、2和3组的总精子数和有效精子数均显著高于对照组(P<0.05),精子畸形率均极显著低于对照组(P<0.01)。3)在第4、12和16周时,试验1、2和3组的精子膜完整性均极显著高于对照组(P<0.01);在第10周时,试验2和3组的精子膜完整性显著高于对照组(P<0.05)。4)试验1组的新鲜精液旋转运动精子比率显著低于对照组(P<0.05);在储存72 h后,试验1组旋转运动精子比率极显著低于对照组(P<0.01)。5)试验2组的血清丙二醛(MDA)含量极显著低于对照组和试验1、3组(P<0.01)。试验1和2组的新鲜精子超氧化物歧化酶(SOD)活性极显著高于对照组(P<0.01),试验2组的新鲜精浆SOD活性显著高于对照组(P<0.05)。在储存24 h后,试验1、2和3组的精子MDA含量均极显著低于对照组(P<0.01)。6)试验1和2组的血清白细胞介素-6(IL-6)含量极显著低于对照组(P<0.01)。试验1和2组的粪便二胺氧化酶(DAO)含量极显著低于对照组(P<0.01),试验1和2组的粪便钙卫蛋白含量显著低于对照组(P<0.05)。由此可见,富含DHA和GML的复合物通过影响精子脂肪酸组成、氧化应激和炎症状态等方面对公猪精液品质产生了积极影响。

气相色谱法快速测定藻油中二十二碳六烯酸及二十二碳五烯酸含量

文章建立藻油中2种主成分二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)及二十二碳五烯酸(Docosapentaenoic acid,DPA)(DPAn-6)的同时、快速定量检测方法。以十四烷酸甘油三酯为内标物,与样品同时进行甲酯化处理后上机分析,优化分离条件以建立定性定量分析方法。结果显示,与目前现行各类不饱和脂肪酸测定的国家标准相比(>18 min),该方法将单个样品检测时间缩短至8 min。DHA及DPAn-6分别在0.209~1.672 mg/mL、0.05045~1.009 mg/mL的范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9995、0.9999。DHA的检测限及定量限分别为6.27、20.9μg/mL,DPAn-6的检测限及定量限分别为4.97、16.6μg/m L,平均回收率分别为95.6%、100.1%。结论:该方法可快速、稳定、准确地对藻油样品中的DHA及DPAn-6进行定性定量检测,为藻油质量评价体系的完善提供参考。

富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸缓解环磷酰胺导致的小鼠肾损伤机制

目的:研究富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸(docosahexaenoic acid-enriched phosphatidylserine,DHAPS)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导小鼠肾损伤的改善作用及其机制。方法:32只雄性ICR小鼠随机分为正常组(CON组)、模型组(MOD组)、50 mg/kg mb DHA-PS组(50 DHA-PS组)和100 mg/kg mb DHA-PS组(100 DHA-PS组),每组8只。腹腔注射80 mg/kg mb CTX建立小鼠肾损伤模型,5 d后,MOD组和DHA-PS组分别灌胃等量生理盐水或DHA-PS,7 d后处死小鼠。测定各组小鼠肾脏指数、血清生化指标、肾脏氧化应激和炎症因子表达水平,分析组织病理变化及肾脏组织非靶向代谢组学。结果:与MOD组相比,DHA-PS可显著降低小鼠肾脏指数以及肌酐、尿素氮、胱抑素C和肾损伤分子-1水平(P<0.05);显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶等抗氧化酶活性(P<0.05),并显著降低丙二醛含量(P<0.05);显著下调白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α等促炎细胞因子的表达(P<0.05),显著上调抗炎细胞因子IL-10的含量(P<0.05)。染色结果显示,DHA-PS组小鼠肾脏组织结构明显恢复。此外,肾脏组织代谢组学分析结果表明,DHA-PS主要通过影响甘油磷脂代谢、嘌呤代谢及其代谢物缓解CTX导致的小鼠肾脏代谢紊乱。结论:DHAPS可通过减轻氧化应激和炎症反应、调节甘油磷脂代谢和嘌呤代谢等途径缓解CTX导致的小鼠肾损伤。

人体二十二碳六烯酸检测方法的研究进展

二十二碳六烯酸(DHA)作为人体必需的长链多不饱和脂肪酸之一,对儿童尤其是婴幼儿大脑发育、成人脑功能维持及心血管疾病预防等均有重要作用。DHA的人体来源主要依靠膳食补充,其缺乏人群较为普遍。因此,监测人体内DHA水平是预防因DHA不足或缺乏引起疾病的关键。目前人体DHA水平检测方法较多,但标准化的检测方法尚少见文献报道。该文通过综述近几年已发表的人体DHA水平评估或检测方法,主要包括膳食调查法、色谱法、核磁共振技术和近红外光谱技术,并对各种方法的优势和局限性进行分析总结,以期为人体DHA水平检测提供新思路及科学指导,并助力健康人群DHA水平参考区间的建立。

二十二碳六烯酸抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)对人结肠癌细胞系HT-29的影响及其作用机制。方法将人结肠癌细胞系HT-29分为对照组,25、50和100μmol/L DHA处理组,以及100μmol/L DHA+30μmol/L 740Y-P处理组。MTT检测HT-29细胞增殖,annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白以及p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达,RT-qPCR检测NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA相对表达量。结果与对照组相比,DHA 25、50和100μmol/L处理HT-29细胞后细胞存活率下降(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05),PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平均下降(P<0.05或P<0.01),NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA相对表达量均下降(P<0.05或P<0.01)。此外,DHA 100μmol/L和740Y-P 30μmol/L共同处理HT-29细胞后,细胞生存率、蛋白磷酸化水平(p-PI3K、p-Akt和p-mTOR)、mRNA相对表达量(NLRP3、Caspase 1和IL-1β)均低于对照组(P<0.05)和740Y-P 30μmol/L组(P<0.05),而高于DHA 100μmol/L组(P<0.05或P<0.01)。结论DHA抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖,作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR和NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号分子通路有关。

β-乳球蛋白与二十二碳六烯酸互作效应对β-乳球蛋白致敏性机制的影响

β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-LG)是牛乳中的主要过敏原,以β-LG为原料,采用三维荧光光谱法、圆二色谱法、分子模拟对接法和间接竞争酶联免疫吸附测定法探究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)与β-LG互作效应及其对β-LG致敏性的影响。结果表明:DHA与β-LG结合后显著改变了β-LG中芳香族残基的微环境,使其极性增加;DHA通过疏水作用力与β-LG结合形成稳定复合物,且结合后,β-LG的二级结构发生改变,蛋白质骨架发生折叠,随着DHA浓度的增加,β-折叠相对含量先增加后减少,α-螺旋相对含量的变化与β-折叠相反,β-转角、无规卷曲相对含量变化没有明显规律;此外,在两者结合后,β-LG的抗原性降低,DHA浓度为3 mmol/L时,免疫球蛋白E结合能力抑制率约为29%。

二十二碳六烯酸标准样品的研制

建立了二十二碳六烯酸标准样品的研制方法。以裂壶藻为原料,利用高速逆流色谱制备分离,通过紫外吸收光谱、红外光谱、质谱和核磁共振等技术对二十二碳六烯酸进行结构确定与表征。标准样品通过高效液相色谱-紫外检测法进行了均匀性、稳定性检验和8家实验室联合定值。结果表明,该标准样品在95%的置信区间内均匀性良好;在4℃条件下可储存9天,在-20℃条件下可储存24个月;定值结果确定其纯度为98.95%,置信度为95%时扩展不确定度为0.17%。该标准样品达到了GB/T 15000.3—2008规定的技术要求,具有溯源性,可用于含有二十二碳六烯酸相关产品的质量控制和含量分析。

从深海鱼油中制备提纯二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)乙酯的研究

用尿素沉淀法和分子蒸馏法研究了二十碳五烯酸（ 简称 Ｅ Ｐ Ａ） 、二十二碳六烯酸（ 简称 Ｄ Ｈ Ａ） 乙酯的分离提纯。实验表明，尿素沉淀法能够将 Ｅ Ｐ Ａ、 Ｄ Ｈ Ａ 乙酯提纯到９０ ％ ，分子蒸馏法能提纯到７０ ％ 以上。两种方法对比，分子蒸馏法提纯工序简单，效率高，尿素沉淀法工序繁杂，效率低。

银离子络合法提取纯化大西洋鲑鱼中二十二碳六烯酸(DHA)用于特定位点碳同位素分析(PSIA-C)

尽管DHA(全顺式4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸)在许多人类生物过程中被证明具有重要作用,但关于这种全顺式长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)的来源和代谢仍然存在一定争议.作为利用核磁共振(NMR)测定分子内特定位点碳同位素分析(PSIA-C)进而解决人体DHA来源问题的第一步,本文报道了从大西洋鲑鱼(人类膳食DHA的主要来源之一)提取大量(>200 mg)高纯度(>95%)DHA的银离子络合法.采用有机溶剂提取鱼肉中的脂肪酸,用BF 3-CH 3OH进行甲基酯化,将甲基酯化脂肪酸混合物(脂肪酸甲酯,FAMEs)经硝酸银硅胶柱层析,按极性依次洗脱分离混合脂肪酸,获得高纯度的DHA.基于GC/MS和GC分析表明,采用银化硅胶柱层析法,AgNO 3和硅胶的重量比为1∶9,二氯甲烷和乙酸乙酯体积比3∶1洗脱,DHA纯度达到95%.

二十二碳六烯酸(DHA)复合物对胃腺癌细胞内H-Ras和p16 mRNA含量的影响

目的研究DHA复合物抗肿瘤作用机理。方法用RT-PCR法研究DHA复合物对胃腺癌细胞内H-Ras和p16mRNA含量的影响。结果与阴性对照组相比,DHA复合物使胃腺癌细胞内H-RasmRNA含量明显降低(P<0.05),p16mRNA含量明显增加(P<0.05).结论DHA复合物能显著降低H-Ras癌基因的转录,并能显著增加p16押癌基因的转录,从而抑制肿瘤细胞的增殖。

二十二碳六烯酸(DHA)复合物对移植性H_(22)肝癌小鼠癌细胞Bcl-2和c-myc蛋白含量的影响

目的研究二十二碳六烯酸(DHA)复合物对移植性H22肝癌小鼠癌细胞Bcl-2和c-myc蛋白含量的影响。方法以移植H22肝癌细胞的小鼠为模型,利用Western Blot方法测定Bcl-2和c-myc蛋白,研究DHA复合物对小鼠H22肝癌细胞内Bcl-2和c-myc蛋白含量的影响。结果实验发现,DHA复合物的体内抑瘤率可高达70%以上,55.0、37.5、20.0mg/kg DHA复合物剂量组,使得小鼠H22肝癌细胞内Bcl-2蛋白含量分别降低74.72%、74.05%、70.64%(P<0.01),5-Fu(30mg/kg)组降低了30.16%;c-myc蛋白含量分别降低59.20%、49.72%、38.25%(P<0.01),5-Fu(30mg/kg)组降低了11.72%。结论DHA复合物能明显降低小鼠H22肝癌细胞内Bcl-2及c-myc蛋白的含量。

二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)的开发与应用

本文综述了DHA和EPA的生理功能和作为功能食品添加剂的研究现状。

二十二碳六烯酸单细胞油(DHASCO)——婴幼儿及孕产妇的DHA营养补充剂

DHA是大脑中最丰富的长链多不饱和脂肪酸之一,也是视网膜光受体中最丰富的多不饱和脂肪酸。然而人体,特别是婴幼儿自身合成DHA的能力有限,缺乏DHA会影响大脑和视力的发育及其功能,故从饮食中摄取足够的DHA十分重要。鱼油是目前DHA的主要来源,但鱼油中与DHA同时存在的EPA会影响婴儿的生长发育,因此鱼油不适合添加进婴幼儿配方食品中。利用现代生物技术生产的二十二碳六烯酸单细胞油含有40%左右的高纯度DHA,几乎不含EPA,产品已能工业化生产,各种理化指标稳定,纯度和安全性优于鱼油,目前已开始应用于婴幼儿奶粉和作为功能性食品原料使用。评述了二十二碳六烯酸单细胞油的原料来源、制作过程、理化性状、吸收代谢、安全性以及在婴幼儿、孕产妇的临床功能研究等方面的研究进展,并对二十二碳六烯酸单细胞油在保健食品中的应用情况作了简单的介绍。

二十二碳六烯酸拮抗动脉粥样硬化预防脑卒中的机制

动脉粥样硬化是种慢性炎症性疾病,它损害动脉并可导致血管疾病,如缺血性脑卒中。ω-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)和ω-6 PUFAs都参与了炎症过程。ω-6 PUFAs刺激炎性反应,ω-3 PUFAs具有抗炎作用。实验研究和临床试验表明,补充ω-3 PUFAs可降低动脉粥样硬化的风险,二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)是重要的ω-3 PUFAs亚型之一。本文论述了DHA对动脉粥样硬化过程中所涉及的内皮细胞、巨噬细胞和血管平滑肌细胞这3种细胞类型的作用,以拮抗动脉粥样硬化、预防缺血性脑卒中。

二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸联合麦芽糊精对Ⅱ型糖尿病大鼠肠道菌群、有机酸及脂类分布的影响

该文探讨二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸联合麦芽糊精(maltodextrin,MED)膳食补充对Ⅱ型糖尿病大鼠肠道菌群、血液有机酸及脏器脂分布的影响。构建大鼠Ⅱ型糖尿病模型,以不同剂量MED灌胃患病大鼠,观察其对患病大鼠血糖水平、脏器指数及脏器脂类蓄积的影响,收集实验大鼠血液和粪便,利用高效液相色谱法检测大鼠血液的有机酸含量,通过16S rDNA扩增子测序获取各实验组肠道菌群的信息数据。MED灌胃尤其中剂量对糖尿病引起的多饮症状有一定的缓解作用,对于糖尿病导致的大鼠各器官脏器系数的增大有较好的改善趋势,但会引起脂类在心肝脾肺肾中的蓄积。对于糖尿病引起的肠道菌群的改变,中剂量MED有恢复某些优势有益菌群的相对丰度的趋势。MED可在一定趋势上缓解糖尿病引起的血液有机酸(如丙酸、丁酸、异戊酸和正戊酸)的变化。MED对Ⅱ型糖尿病引起的多饮、高血糖、脏器系数以及肠道菌群的改变有一定缓解作用,但会引起脂类在各脏器的蓄积,应谨慎使用。

二十二碳六烯酸对奶山羊乳腺上皮细胞转录调控机理研究

本试验旨在研究二十二碳六烯酸(DHA)对奶山羊乳腺上皮细胞(GMECs)转录调控机理。试验使用不同浓度的DHA(3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000μmol/L)对GMECs进行处理,并测定细胞活力,然后利用转录组测序(RNA-Seq)技术对DHA作用的GMECs进行测序,获得并分析相关基因表达。结果表明:1)与空白对照组(无DHA处理)相比,低浓度DHA(≤25.000μmol/L)对各时间点GMECs细胞活力无明显抑制作用;当DHA浓度高于50.000μmol/L时,GMECs细胞活力出现明显下降。在不同时间点,24 h时各浓度DHA处理GMECs细胞活力高于其他时间点。因此,选择处理时间为24 h、DHA浓度为25.000μmol/L用于后续试验。2)构建DHA在GMECs中作用的RNA文库,获得的碱基质量值≥20的碱基所占百分比(Q20)和碱基质量值≥30的碱基所占百分比(Q30)均在96%以上,鸟嘌呤和胞嘧啶(CG)占比为53%,各个组的比对效率为98.18%~98.43%,表明转录组信息质量较高。3)以|log10[差异倍数(FC)]|>1且P<0.05为筛选标准,共筛选出236个显著差异表达基因(DEGs),其中108个基因表达上调,128个基因表达下调。4)基因本体论(GO)富集分析发现,DEGs主要富集在铁离子结合、聚合细胞骨架纤维、中间丝状体细胞骨架和中间丝状体中,并参与Rho家族鸟苷三磷酸酶(Rho GTPases)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和Hippo等信号通路的信号转导。5)京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析发现,DEGs显著富集到视黄醇代谢、谷胱甘肽代谢、亚油酸代谢、化学致癌、药物代谢-细胞色素P450和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路。由此可知,DHA在GMECs的免疫、细胞骨架构建、抗炎、抗癌及代谢等相关通路中具有明显作用,其中亚油酸代谢、PPAR信号通路能够在脂代谢方面发挥作用。

二十二碳六烯酸对急性心肌梗死大鼠心肌损伤的影响

目的探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)预处理对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠的作用及机制。方法将96只大鼠按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、急性心肌梗死组(AMI组)、DHA预处理组(AMI+DHA组)、DHA预处理+氯喹(chloroquine,CQ)联合处理组(AMI+DHA+CQ组),每组各24只。心脏超声检测大鼠心功能指标,Masson染色检测大鼠心肌组织胶原容积分数,Western blot法检测微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、p62及GAPDH蛋白表达,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)的含量。结果与sham组比较,AMI组左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)及左心室短轴缩短率(left ventricular fraction shortening,LVFS)明显降低,心肌组织胶原容积分数明显升高,LC3-Ⅱ表达增加,p62表达降低,CK-MB含量升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与AMI组比较,AMI+DHA组LVEF及LVFS明显升高,心肌组织胶原容积分数降低,LC3-Ⅱ表达进一步增加,p62表达进一步降低,CK-MB水平降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与AMI+DHA组比较,AMI+DHA+CQ组LVEF及LVFS明显降低,心肌组织胶原容积分数明显增加,LC3-Ⅱ表达增加,p62表达降低,CK-MB水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论DHA通过调节自噬减轻AMI大鼠的心肌损伤。

二十二碳六烯酸海藻糖酯的分离纯化及鉴定

在叔丁醇中以二十二碳六烯酸(DHA)乙酯和海藻糖为原料,通过固定化脂肪酶催化合成DHA海藻糖酯,并对其分离纯化方法进行研究。确定DHA海藻糖酯的薄层层析(TLC)条件:展开剂为乙酸乙酯/甲醇/水(8.5/1/0.5,v/v/v),碘蒸气显色10min;硅胶柱层析条件:正己烷/异丙醇/甲醇(5/4/1和4/4/2,v/v/v)梯度洗脱,流速1.3mL/min,1管/7min收集洗出液;用半制备高效液相色谱(HPLC)进一步纯化单酯收集液,经分析型HPLC检测纯度后用核磁共振(NMR)方法进行结构鉴定,确定为DHA藻糖单酯。