甘蓝型油菜芥酸和二十碳烯酸含量的基因效应

以甘蓝型油菜的4种纯合芥酸基因型之间所有可能的6个杂交组合的P_1、P_2、F_1、P_2、B_1和B_2世代为材料,用生统遗传学方法研究了芥酸和二十碳烯酸的基因作用形式及效应。发现无论亲本是单基因差异还是二基因差异,F_1和F_2代的芥酸含量都接近中亲值,F_1略大于中亲值和F_(20)世代均值分析表明,芥酸含量的遗传符合加性显性模型,加性效应占绝对优势,显性效应不显著。用数量遗传学方法估计的芥酸基因数与已知的结果相近。

前列腺素E1对急性胰腺炎二十碳烯酸异常代谢调节的临床研究

目的:通过本次临床观察,了解急性胰腺炎时二十碳烯酸的异常代谢规律,并试图探讨前列腺素E1(PGE1)对此异常代谢的调节.方法:对于急性轻型及急性重型胰腺炎,根据是否使用PGE1的干预因素分别加以研究,患者在入院时即刻及入院满4d后取血清样本,测定6-keto-PGFIα及血栓烷素TXB2等,并进行组间比较.结果:6-keto-PGFIα在各组间及PGE1治疗前后均无统计学的显著性差异.关于TXB2,入院时,急性重型胰腺炎组均显著高于急性轻型胰腺炎组(P<0.01).经过PGE1的干预,4d后急性重型胰腺炎升高的TXB2明显回落,明显低于未使用PGE1的急性重型胰腺炎组(P<0.05).结论:急性胰腺炎特别在急性重型胰腺炎时二十碳烯酸出现了异常代谢如TXB2的明显升高,而PGE1对此有明显的调节作用,这对于改善微循环及改善预后等均有重要的临床意义.

重症胰腺炎二十碳烯酸类的异常代谢与大黄素、生长抑素的作用

重症胰腺炎(AHNP)胰组织出血、坏死被认为与二十碳烯酸类的异常代谢有关。在牛磺胆酸钠诱发大鼠AHNP模型,测定前列腺素E_1(PGE_2)、6-酮-前列腺素F_2(6-keto-PGF_2),血栓烷B_2(TXB_2)等变化,并以大黄素、生长抑素进行药物干预,以了解AHNP时二十碳烯酸类的异常代谢和上述药物的作用,结果显示,重症胰腺炎时血浆TXB_2显著增高,发病6小时达假手术组的4.5倍,而6-keto-PGF或PGE的测定值则呈降低趋势。应用大黄素或生长抑素后,TXB_2测定值显著降低,生长抑素组TXB_2测定值较之于大黄素组降低更为显著:6-keto-PGF_1和PGE_2则呈上升趋势。给药两组12小时生存率显著高于非治疗组:病理组织学评分及电镜超微结构观察示给药两组腺细胞坏死等病理损害减轻。作者认为,大黄素和生长抑素对AHNP时TXB_2等异常代谢有明显调整作用,与此相关的改善微循环和细胞保护机制可能是两药治疗AHNP的重要药理基础:联合应用大黄素与生长抑素可能会有协同作用。

二十碳烯酸和炎症性肠病

二十碳烯酸是一组可溶性脂类炎症介质前列腺素、白三烯等的总称。它们共同起源于花生四烯酸(AA)——一种含20个碳原子不饱和脂肪酸。AA从细胞内磷脂释出,至少有三种酶参与磷脂释放AA。证据显示,AA特异性磷脂酶A_2(PLA_2)可促进细胞膜释放AA。在PLA_2作用下,AA从细胞膜磷脂C-2位游离出来。游离AA主要通过两条代谢途径,环氧化酶途径和脂氧化酶途径,转变为二十碳烯酸类脂类炎症介质。

二十碳五烯酸通过调节Nrf2通路抑制脂多糖诱导肾小球系膜细胞焦亡

目的:以核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)蛋白为切入点,基于Nrf2/NLRP3/GSDMD信号通路探究二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肾小球系膜细胞焦亡的调控作用,结合Nrf2激动剂(4-OI)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-bound oligomerized domain-like receptor protein 3,NLRP3)受体抑制剂(MCC950)探究EPA调控焦亡信号通路的机制。方法:LPS体外诱导肾小球系膜细胞(HBZY-1)焦亡模型,并根据不同药物处理分别设置空白对照组、LPS组、LPS+EPA组、LPS+EPA+4-OI组和LPS+EPA+MCC950组,其中LPS浓度为10μg/mL,EPA、4-OI和MCC950的浓度均为200μmol/L,按分组将药物同时加入培养板中处理48 h,利用CCK-8法、乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、TUNEL染色检测细胞损伤,ELISA检测细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-18释放量,蛋白免疫印迹法检测Nrf2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平。结果:LPS与EPA共处理HBZY-1细胞的细胞活力实验表明,10μg/mL LPS刺激48 h显著降低了细胞活力(P<0.05),但20~200μmol/L EPA对其有明显的保护作用(P<0.05)。采用200μmol/L EPA进行后续实验发现,EPA可明显保护LPS造成的细胞损伤(P<0.01),减少炎性因子(P<0.01)、LDH的释放(P<0.01)和DNA的断裂并抑制焦亡信号通路的激活,促进Nrf2蛋白的表达(P<0.01)。结合4-OI、MCC950共处理发现4-OI可以促进EPA对焦亡的抑制作用(P<0.05),减少相关蛋白的表达以及因子的释放(P<0.05),并增强EPA对细胞的保护(P<0.01),而MCC950对EPA发挥的作用无显著影响。结论:EPA通过Nrf2抑制LPS诱导的HBZY-1细胞焦亡信号通路各分子的表达,发挥细胞保护作用。

环氧二十碳三烯酸对肥胖大鼠白色脂肪棕色化的影响

为了研究环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids, EET)对肥胖大鼠白色脂肪棕色化的影响,试验将32只4周龄雄性SD大鼠随机分为对照组(n=8)和高脂组(n=24),高脂组大鼠连续饲喂高脂饲料15周,将建模成功的肥胖大鼠再随机分为模型对照组和EET组(11,12-EET组和14,15-EET组),每组8只。EET组大鼠每天按体重30μg/kg皮下分别注射11,12-EET和14,15-EET,对照组和模型对照组皮下注射同等剂量生理盐水,每周测量体重。10 d后采用ELISA、实时荧光定量PCR方法检测大鼠血脂含量、口服糖耐量及脂肪组织中棕色化相关指标解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors, VEGF)和过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome prolifertor-activated receptor-γ coactivator-1α,PGC-1α)基因的相对表达量。结果表明:高脂饲料饲养15周后,高脂组体重显著高于对照组(P<0.05)。与模型对照组相比,11,12-EET组和14,15-EET组大鼠在口服葡萄糖2 h后,血糖浓度缓慢恢复至正常值;11,12-EET组和14,15-EET组大鼠血清三酰甘油(TG)含量显著降低(P<0.05);11,12-EET组大鼠腹股沟脂肪组织中UCP-1基因相对表达量显著升高(P<0.05),14,15-EET组大鼠肩胛骨脂肪组织中UCP-1基因相对表达量显著升高(P<0.05);14,15-EET组和11,12-EET组大鼠腹股沟和肩胛骨脂肪组织中VEGF基因相对表达量均显著降低(P<0.05);14,15-EET组和11,12-EET组大鼠肩胛骨脂肪组织中PGC-1α基因相对表达量显著降低(P<0.05),腹股沟脂肪组织中PGC-1α基因相对表达量显著升高(P<0.05)。说明EET可能通过改善糖脂代谢促进肥胖大鼠白色脂肪棕色化过程。

重症胰腺炎二十碳烯酸的异常代谢与大黄素、施他宁的作用

目的：探讨重症胰腺炎（AHNP）胰组织出血、坏死与二十碳烯酸类的异常代谢关系。方法：以牛黄胆酸钠诱发大鼠AHNP模型，测定前列腺素E2（PGE2）、6-酮-前列腺素F1a（6－keto－PGE1a）、血栓烷B2（TXB2）等变化，并以大黄素、施他宁药物干预，以了解AHNP时二十碳烯酸类的异常代谢和上述药物的作用。结果：重症胰腺炎时血浆TXB2显著增高．发病6小时达假手术组的4．5倍，而6－keto－PGF1a或PGE2的测定值则呈降低趋势．应用大黄素或施他宁后，TXB2测定值显著降低，施他宁组TXB2测定值较之于大黄素组降低更为显著；6－keto－PGE1a和PGE2则呈上升趋势．给药两组12小时生存率高于非治疗组；给药两组胰腺细胞坏死等病理损害减轻．结论：大黄素和施他宁对AHNP时TXB2等异常代谢有明显调整作用，与此相关的改善微循环和细胞保护机制可能是两药治疗AHNP的重要药理基础；联合应用大黄素与施他宁可能会有协同作用．

二十碳五烯酸对糖尿病肾足细胞损伤保护机制研究

目的探究二十碳五烯酸(EPA)在模拟高糖诱导肾足细胞损伤中的作用及其潜在机制。方法体外培养小鼠MPC5肾足细胞,高糖诱导足细胞出现损伤,用不同浓度的EPA干预处理。采用CCK-8法评估MPC5细胞的活力,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blotting检测凋亡蛋白及足细胞标志蛋白表达,活性氧(ROS)荧光探针检测法分析高糖刺激后ROS的生成,ELISA进一步检测炎性因子分泌情况。结果CCK-8细胞活力显示,EPA能维持高糖诱导的细胞活力,EPA干预后足细胞标志蛋白podocin和synaptopodin的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);流式细胞术分析显示EPA干预后高糖刺激的足细胞凋亡率明显下降(P<0.01),促凋亡蛋白Bax和cleaved Caspase-3表达降低(P<0.05,P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增加(P<0.01);相较于高糖组,EPA干预后ROS生成明显降低(P<0.01),ELISA结果显示EPA干预降低高糖诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6炎性因子分泌(P<0.01);EPA干预后炎性信号通路蛋白TLR4和MYD88蛋白降低(P<0.05,P<0.01),EPA干预后脂质代谢蛋白SREBP1的表达下降(P<0.05,P<0.01);过表达SREBP1后,EPA对高糖诱导MPC5细胞上述检测结果被逆转。结论EPA可以抑制高糖刺激后足细胞内ROS的产生及减少足细胞凋亡,同时EPA可能通过调节SREBP1来抑制炎症通路激活,从而对糖尿病肾足细胞起到保护作用。

大黄素与善得定对重症胰腺炎二十碳烯酸类代谢的影响

目的;观察大黄素与善得定对重症胰腺炎(AHNP)二十碳烯酸类代谢的影响.方法:以牛磺胆酸钠诱发大鼠AHNP模型,观察前列腺素E_2(PGE_2)、6-酮-前列腺素F_1a(6-keto-PGF_1a)、血栓烷B_2(TXB_2)等变化以及大黄素、善得定的作用.结果:重症胰腺炎发病6小时血浆TXB_2增高达假手术组的4.5倍;6-keto-PGF_1a以及PGE_2则呈下降趋势.大黄素或善得定组TXB_2增高显著受抑制;PGE_2和6-keto-PGF_1a则见上升趋势.两治疗组12小时的生存率显著高于非治疗组;病理组织学评分及电镜超微结构观察示给药组胰腺细胞坏死现象减轻.结论:大黄素和善得定能调整AHNP时TXB_2等的异常代谢,胰循环与细胞保护机制的改善可能是两药治疗的重要药理基础.

二十碳五烯酸乙酯软胶囊溶出度测定方法研究

目的:建立二十碳五烯酸乙酯软胶囊溶出度测定方法。方法:采用桨法(沉降篮),转速75 r·min^(-1),以含4%曲拉通X-100的盐酸溶液900 mL(pH1.2)为溶出介质,高效液相色谱法测定,60 min时的溶出度应不低于80%。使用Welch Xtimate C_(18)(4.6 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(85∶15),流速为2.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为215 nm,进样量10μL。结果:空白辅料无干扰;二十碳五烯酸乙酯在0.2~1.4 mg·mL^(-1)的浓度范围内线性良好(r>0.999);在介质中回收率为98.0%~102.0%(n=9),RSD小于2.0%,准确度良好。仿制与原研软胶囊在60 min溶出度均可达到80%以上。结论:所建立的方法适用于二十碳五烯酸乙酯软胶囊的溶出度测定,可为其质量控制提供参考。

从深海鱼油中制备提纯二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)乙酯的研究

用尿素沉淀法和分子蒸馏法研究了二十碳五烯酸（ 简称 Ｅ Ｐ Ａ） 、二十二碳六烯酸（ 简称 Ｄ Ｈ Ａ） 乙酯的分离提纯。实验表明，尿素沉淀法能够将 Ｅ Ｐ Ａ、 Ｄ Ｈ Ａ 乙酯提纯到９０ ％ ，分子蒸馏法能提纯到７０ ％ 以上。两种方法对比，分子蒸馏法提纯工序简单，效率高，尿素沉淀法工序繁杂，效率低。

除草剂精喹禾灵用于硅藻过量产生二十碳五烯酸

硅藻Nitzschia laevis是EPA很好的替代来源。除了对硅藻进行高密度培养外,EPA的产量还能利用除草剂来提高。本文研究了除草剂精喹禾灵对硅藻的生长和产EPA的影响。DMSO作为除草剂的溶剂,会对硅藻的生长造成抑制,DMSO在培养基中的添加量最好不要超过0.2%。除草剂能对硅藻的细胞形态造成损害,随着除草剂浓度的增加,硅藻的产量减低了,但脂质和EPA的含量提高了。当除草剂浓度为0.1mmol/L时,EPA的含量从3.00%增加到3.58%,提高了19.3%,EPA占总脂肪酸的含量也由25.15%提高到了32.88%。实验表明,除草剂精喹禾灵能促进硅藻EPA的积累,因而在筛选过量产生EPA微藻方面有重要用途。

11，12-环氧二十碳三烯酸预处理与后处理对缺血／再灌注大鼠心肌的保护作用

采用Langendorff离体灌流装置,通过停灌40min/复灌30min复制大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)损伤模型,观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acid,11,12-EET)预处理和后处理对心肌线粒体功能以及心功能的影响,探讨11,12-EET预处理和后处理对IR大鼠心肌的作用及其机制。将30只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、IR组、EET预处理组(Pre-EET)、EET后处理组(Post-EET),每组6只。除对照组外,其它各组全心缺血40min,再灌注30min。监测左心室内压差(ΔLVP)和左心室内压升降的最大变化率(±dp/dtmax)等心功能指标,测定灌流液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性。灌流结束后,测定心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性以及心肌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malon dialdehyde,MDA)含量。结果显示:(1)与IR组相比,Pre-EET组及Post-EET组Na+-K+-ATPase和SDH活性均增强,Ca2+-ATPase活性均减弱,有显著性差异(P<0.05);而Pre-EET与Post-EET组间没有显著性差异。(2)与IR组相比,Pre-EET组及Post-EET组心功能明显改善,LDH漏出显著减少,心肌SOD活性明显增强,MDA含量明显降低,有显著性差异(P<0.05);而Pre-EET与Post-EET组间没有显著性差异。结果表明,11,12-EET预处理及后处理均可通过上调心肌线粒体Na+-K+-ATPase、SDH活性以及下调Ca2+-ATPase活性改善线粒体功能和心肌能量代谢,拮抗心肌IR损伤;11,12-EET预处理及后处理还可通过提高心肌SOD活性、降低MDA含量改善IR心肌的氧化应激。

二十碳五烯酸与表阿霉素联合应用对人胃癌细胞株MGC-803的作用

目的评估二十碳五烯酸(EPA)联合表阿霉素(EPI)对人胃癌细胞株MGC-803的作用。方法采用MTT法检测各种药物单用和联合应用对细胞的作用,电镜观察细胞超微结构的变化,等效线图解法判断两药合用效果,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果EPA可抑制MGC-803细胞的生长,且呈剂量及时间依赖性(P<0.01);倒置相差显微镜下可见经EPA培养的胃癌细胞核周存在大量异常颗粒,电镜下在核周及胞浆内可见异常电子致密物;EPA对人胚肺成纤维细胞(HPF)生长起促进作用,且呈剂量依赖性(P<0.01);EPA与EPI联合应用对MGC-803细胞生长的抑制具有协同作用(P<0.05);EPA有一定的G0/G1期阻滞作用,EPI有明显的S期阻滞作用,两者可从不同环节抑制细胞增殖。结论EPA对胃癌细胞株MGC-803有抑制作用,相同剂量对正常细胞无抑制作用。EPA与EPI对胃癌细胞的抑制具有协同作用,与单用EPI相比,联合应用可减少EPI的用药剂量。

超临界流体色谱法分离二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸

以二氧化碳单一作流动相,ODS柱为固定相,用超临界流体色谱法分离了二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),考察了操作温度和压力对容量因子(k′)和分离度(R)的影响，并根据EPA和DHA在超临界二氧化碳中溶解度的变化规律,对实验结果做了定性的解释。

硅藻变温发酵生产二十碳五烯酸的研究

考察不了同温度(10℃～30℃)对硅藻(Nitzschia laevis)合成二十碳五烯酸(EPA)的影响,对不同温度下的发酵过程进行动力学特性分析。在此基础上,提出了EPA合成的变温培养方法:延滞期及对数期初期温度控制在25℃,从对数期中期开始在20℃条件下进行培养。采用此变温培养进行发酵,EPA的含量和产量分别达到了6.00%和291.60mg/L,较采用单一温度(25℃)发酵的最大值分别提高了24.07%和18.81%。

二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸的生理功能

综述了二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸的来源及生理功能的研究新进展,指出了二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸应用中存在的问题及今后的发展方向,为其进一步的开发利用提供信息。

二十碳五烯酸抗拴作用的实验研究

对二十碳五烯酸(EPA)的抗栓作用及其机制进行了研究。结果表明,EPA在体内、体外均有明显抗栓作用,并能增强纤溶活力,缩短优球蛋白溶解时间,抑制花生四烯酸和胶原诱导的大鼠血小板聚集。放射免疫测定证明,EPA能降低小鼠血浆血拴素B_2(TXB_2)含量,提高6-酮前列腺素F_(1α)与TXB_2的比值。

二十碳五烯酸改变JurkatT细胞膜脂肪微区域脂肪环境的研究

目的:研究二十碳五烯酸(EPA)处理后T细胞膜脂肪微区域中脂肪酸组成改变及其对磷脂分子中脂肪酰基取代基团的作用。方法:用不连续蔗糖密度梯度超速离心法分离T细胞膜脂肪微区域,然后用气相色谱分析细胞膜亚区域中脂肪酸组成,高效液相质谱联用测定膜脂肪微区域磷脂分子脂肪酸酰基取代基团的构成。结果:EPA处理使T细胞脂肪微区域中多不饱和脂肪酸(PUFAs),n-3PUFAs和n-3PUFAs/n-6PUFAs的比值升高;磷脂分子中除了鞘磷脂以外,其他的磷脂分子如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇分子中一些脂肪酰取代基团有显著改变。结论:EPA处理明显改变T细胞膜脂肪微区域和可溶膜组分中脂肪酸的组成,改变磷脂分子脂肪酰基取代基团的构成,从而改变细胞膜脂肪微区域的脂肪环境。