基于HPLC-Q-TOF/MS多成分含量和指纹图谱的加味二妙颗粒质量评价

目的 建立加味二妙颗粒指纹图谱以及多成分含量测定方法,为其质量控制提供参考。方法 采用HPLC-Q-TOF/MS分析加味二妙颗粒中的化学成分。色谱柱为Wondasil C18Superb(250 mm×4.6 mm, 5μm)柱,流动相为乙腈-体积分数0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,对10批加味二妙颗粒进行指纹图谱和4种指标性成分含量测定。结果 HPLC-Q-TOF/MS技术共鉴定出加味二妙颗粒中144个化合物,指纹图谱中标定了15个共有峰,并通过对照品比对指认出(R,S)-告依春、去乙酰车叶草苷酸甲酯、盐酸黄柏碱、橙皮苷等9个峰,加味二妙颗粒指纹图谱的相似度均>0.95;测定(R,S)-告依春、落新妇苷、橙皮苷和小檗碱4个指标性成分含量,质量分数分别为0.021 1~0.056 8 mg·g^(-1)、0.200 9~0.552 3 mg·g^(-1)、0.274 1~0.719 1 mg·g^(-1)、0.237 1~0.704 9 mg·g^(-1)。结论 建立的加味二妙颗粒指纹图谱和多成分含量测定方法能够全面反映加味二妙颗粒的质量特征,亦为建立其制剂质量标准提供了依据。

当归二妙饮在老年性皮肤瘙痒症的应用研究

研究当归二妙饮在琉璃庙.镇社区卫生服务中心老年性皮肤瘙痒症的应用效果。方法 选定2010年至2013年间在琉璃庙社区卫生服务中心共观察90例病例,均为门诊患者,根据初诊顺序按2:1随机分为治疗组和对照组,治疗组使用当归二妙饮治疗,对照组行口服西替利嗪治疗,对比两组的临床效果、结果 治疗前,相较于对照组,治疗组患者的临床症状积分无差异,P>0.05;治疗后,相较于对照组,治疗组患者的临床症状瘙痒面积、瘙痒频率、继发性皮损积分更低,临床效果更高,(P<0.05)。结论 当归二妙饮治疗老年性皮肤瘙痒症患者可显著提升临床效果,积极改善临床症状,值得临床医生积极借鉴、推广。

半枝莲合二妙汤联合辛复宁治疗高危型HPV感染临床观察

目的探讨半枝莲合二妙汤联合辛复宁治疗高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床效果。方法筛选72例高危型HPV感染患者为研究对象,采用随机数字表法分成对照组(给予辛复宁治疗)和研究组(给予半枝莲合二妙汤联合辛复宁治疗),每组36例,分别按既定治疗方案治疗3个月,比较2组HPV转阴率、中医证候积分和中医证候疗效。结果治疗后,研究组HPV转阴率明显高于对照组(P<0.05),中医证候积分明显低于对照组(P<0.05);研究组中医证候总有效率明显高于对照组(P<0.05)。结论半枝莲合二妙汤联合辛复宁治疗高危型HPV感染的临床效果优于单纯辛复宁治疗,能有效提高HPV转阴率和改善中医证候疗效,是一种值得推广的中西医结合治疗方案。

二妙丸中黄柏薄层色谱鉴别方法的改进

目的:改进二妙丸中黄柏薄层色谱鉴别方法。方法:以盐酸小檗碱为对照品,考察不同展开剂、展开剂比例、点样量、环境温度、环境湿度对二妙丸中黄柏薄层色谱分析的影响,确定二妙丸中黄柏薄层色谱分析的最佳条件。结果:采用乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(10∶1∶1)作为展开剂,点样量1μL,在环境温度25℃,环境湿度范围30%~70%下进行薄层色谱鉴别实验,成分斑点清晰、分离度好,且阴性对照无干扰。结论:该薄层色谱方法操作简便,专属性强,可用于二妙丸中黄柏的薄层鉴别,适合作为制药工程专业药物化学实验项目开展实验教学。

二妙丸衍生方在皮肤科疾病中的应用与研究

由苍术和黄柏组成的二妙丸一方,功效清热燥湿,用于湿热下注所引起的炎症、红肿、渗出等症,在内、外、妇、儿、皮肤科中均有应用。作为清热燥湿的基础名方,其加减化裁亦较多,本文对二妙丸及其衍生方的应用和研究予以综述,明确其在皮肤科疾病中的应用。

二妙丸合五味消毒饮加味熏洗辅助治疗湿热型肛门瘙痒症患者的效果

目的探讨二妙丸合五味消毒饮加味熏洗辅助治疗湿热型肛门瘙痒症(PA)患者的效果。方法选取120例湿热型PA患者,随机分为研究组与对照组,各60例。给予对照组患者外用糠酸莫米松凝胶治疗,研究组在对照组治疗基础上加用二妙丸合五味消毒饮加味熏洗治疗。比较两组患者治疗前后的临床证候评分、生活质量评分,比较两组患者治疗结束后的临床疗效,并记录两组患者治疗期间的不良反应发生情况。结果治疗后,两组患者肛门瘙痒、皮损情况、肛周渗液评分及皮肤病生活质量指标量表各维度评分较治疗前降低,且研究组的肛门瘙痒、皮损情况、肛周渗液评分,以及日常活动、休闲、工作学习维度评分低于对照组(P<0.05)。研究组治疗后临床总有效率高于对照组,治疗期间不良反应总发生率低于对照组(P<0.05)。结论采用二妙丸合五味消毒饮加味熏洗辅助治疗湿热型PA,可以改善患者肛门瘙痒、皮损、肛周渗液的临床症状,提高临床疗效及生活质量,安全性较好,值得临床应用推广。

二妙丸与三妙丸治疗痛风作用机制的研究进展

痛风是一种常见的风湿免疫病,急性发作时,肢体末端常出现红、肿、热和剧烈疼痛。传统中药具有毒副作用小和多靶点等优点,已成为研治痛风的新方向,但因其治疗机制尚未完全明确而未能普及。二妙丸、三妙丸是主治焦湿热痹证的古老中药复方,是至今治疗痛风的常用中药,但其成分、配比与作用机制的研究仍需不断完善与探索。本文对二妙丸、三妙丸治疗痛风的研究现状与进展进行综述,以期为临床研究提供参考。

二妙胶囊和二妙丸的药代动力学比较

目的:以盐酸小檗碱为主要考察指标进行二妙丸和二妙胶囊的药代动力学比较研究,从药代动力学角度看不同剂型在动物体内的血药浓度变化。方法:灌胃给药,采用HPLC法测定家兔体内盐酸小檗碱的血药浓度,血药浓度-时间数据经DAS2.0药代动力学分析软件处理,分别测得二妙丸和二妙胶囊中的盐酸小檗碱在家兔体内的药代动力学参数。结果:家兔血浆样品中,盐酸小檗碱的线性范围为0.0043～0.427μg/mL,提取回收率高,日内日间精密度试验RSD均小于10%,二妙丸的盐酸小檗碱在家兔体内最大血药浓度为0.082μg/mL,达峰时间为8h;二妙胶囊的盐酸小檗碱在家兔体内最大血药浓度为0.303μg/mL,达峰时间为5h。结论:建立了HPLC法测定黄柏中盐酸小檗碱血药浓度的方法,为二妙胶囊的合理用药提供了药代动力学数据,同时也为中药复方的药代动力学研究提供了可借鉴的方法。

苍术、黄柏及二妙丸超细微粉的生物药剂学的研究 Ⅱ.超细粉二妙丸的体外溶出度研究

目的 探讨超细粉体技术对中药制剂体外溶出度的影响 ,以及丸剂的粒径对溶出度的影响。方法 采用分光光度法 ,以盐酸小檗碱为指标成分 ,考察普通粉与超细粉二妙丸及不同粒径的超细粉二妙丸微丸的体外溶出度。结果 超细粉二妙丸的 T50 和 Td 分别为 6 1.6 0 ,19.48,17.84,8.97min和 10 2 .3,33.2 9,2 6 .98,14.77min;粒径为2 .4mm的普通粉二妙丸的 T50 和 Td 分别为 89.6 1,15 5 .6 8m in。结论 超细粉二妙丸的溶出速率明显快于普通粉 ,且随着丸剂自身粒径的降低 ,体外溶出速率加快。

比较两种黄柏组方二妙胶囊的抗炎作用

目的研究由关黄柏和川黄柏组成的二妙胶囊对急性炎症模型的影响。方法采用组织胺诱发大鼠皮肤通透性增加、二甲苯诱发小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等急性炎症模型,观察两种黄柏组成的二妙胶囊对3种炎症模型的抗炎作用。结果由关黄柏组方的二妙胶囊(A组)有抑制组胺所致大鼠皮肤通透性增加、二甲苯所致鼠耳肿胀、角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等作用。由川黄柏组方的二妙胶囊(B组)仅有抑制二甲苯所致鼠耳肿胀的作用。同剂量下,B组作用弱于A组。结论A组抗急性炎症作用强于B组。

黄柏生物碱成分在二妙丸类方中保护尿酸盐致人血管内皮细胞损伤作用及其配伍变化的研究

研究对二妙丸类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸和加味四妙丸)起重要作用的基本方二妙丸的物质基础及其配伍变化.正交组合二妙丸类方组方药有效部位,四氮唑盐(MTT)法评价优选出对保护尿酸钠结晶(MSU)致人血管内皮细胞(HUVEC)损伤起重要作用的二妙丸黄柏生物碱部位,HPLC/DVD法建立黄柏生物碱部位指纹图谱,HPLC-ESI-MS/MS分析共有峰成分,鉴定了12个生物碱成分,并比较了二妙丸类方有效部位群HPLC/DVD指纹图谱配伍类方前后黄柏生物碱共有峰相对峰面积比值的变化.结果表明,黄柏生物碱配伍二妙丸及其类方后总相对含量分别为122.9%,80.7%,60.2%和94.2%,小檗碱、巴马汀等重要生物碱也呈现较大的变化趋势,茵芋碱、5-羟基小檗碱和四氢巴马汀等成分配伍二妙丸类方后消失.研究显示,基本方二妙丸中的黄柏生物碱是二妙丸类方中保护HUVEC起重要作用的物质基础,其相对含量变化与配伍类方后的功效变化一致.

二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱比较研究

目的:为探索类方方剂配伍物质基础变化特征,研究二妙丸类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸)配伍物质基础的关联。方法:建立加味四妙丸抗湿热证痛风有效部位群HPLC指纹图谱,利用对照品确定指纹图谱共有峰成分、组方药有效部位色谱峰归属以及有效部位群共有峰的组方药有效部位来源,测定二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱,比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化。结果:加味四妙丸有效部位群有60个共有峰,分别来源于组方药生物碱、黄酮、有机酸部位。基础方与类方间有效部位群指纹图谱共有峰在数目及相对峰面积比值方面呈现一定的变化规律。结论:二妙丸及其类方有共同的物质基础,从基础方到各类方,抗湿热证痛风物质基础的配伍变化具有相关性。

HPLC法测定成药二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黄丸中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量

建立了反相高效液相法测定成药二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黄丸中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱含量的方法。固定相为Nova－PakC184μm，3．9mm（i.d）×150mmHPLC柱；流动相为乙腈-水（1：1，每1000mL含磷酸二氢钾3．4g及十二烷基硫酸钠1．7g）；检测波长为345nm；小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的加样回收率分别为98．67±2．38％，98．75±1．67％，98．38±2．31％。

离心超滤质谱法筛选中药复方二妙丸中黄嘌呤氧化酶抑制剂

采用离心超滤质谱分析技术(UF-UPLC/Q-TOF/MS),结合体外酶活性实验方法,对中药复方二妙丸提取物中的黄嘌呤氧化酶抑制剂进行了筛选.体外酶活性实验测得二妙丸水提液对黄嘌呤氧化酶的半数抑制浓度(IC50)为(0.218±0.0034)mg/mL,表明二妙丸具有较强的黄嘌呤氧化酶抑制活性.进一步采用离心超滤质谱技术对二妙丸水提物中潜在的黄嘌呤氧化酶抑制剂进行筛选,从中筛选并鉴定了9种具有潜在黄嘌呤氧化酶抑制活性的化合物,为开发黄嘌呤氧化酶抑制剂及阐明二妙丸治疗痛风和高尿酸血症的作用机制提供了一定的依据.

二妙丸多指标化学成分质量研究

目的:建立二妙丸(苍术,黄柏)挥发油中β-桉叶醇含量的气相色谱测定法;对二妙丸单煎合并与合煎的挥发油及提取干膏进行多指标化学成分的测定和比较。方法:以丹皮酚为内标物,采用内标法和程序升温的气相色谱条件对二妙丸单煎与合煎的挥发油中的β-桉叶醇含量进行测定和比较;采用高效液相色谱法对二妙丸中的小檗碱、巴马汀、药根碱成分进行含量测定和比较。结果:二妙丸合煎的挥发油中的β-桉叶醇含量比单煎中的含量略高,分别为73.34 mg/g和70.04 mg/g;但从图谱的峰数和保留时间进行比较,结果无明显差别。单煎合并的小檗碱、巴马汀、药根碱的含量明显高于合煎的含量。结论:确立二妙丸挥发油中β-桉叶醇含量测定的方法。并且说明苍术、黄柏配伍,彼此相互影响。

苍术、黄柏及二妙丸超细微粉的生物药剂学的研究Ⅰ.扫描电子显微镜技术对超细微粉的表征

目的 为了表征苍术、黄柏及二妙丸的超细微粉 ,了解其理化特性。方法 采用扫描电子显微镜、生物显微鉴别、粒径、松密度及比表面积测定等方法对中药普通粉和超细微粉进行了表征。结果 超细微粉颗粒大小均匀 ,90 %小于 2 0 μm,比表面提高 6 0 %～ 190 % ,松密度约为 0 .42 g/ cm3,绝大多数细胞被破碎。结论 苍术、黄柏及二妙丸经超细微化后 ,粉末颗粒大小均匀 ,球性度及均质度明显改善 ;松密度及比表面显著提高 ,植物细胞破壁率高。

二妙丸对痛风症大鼠血清炎症介质的影响研究

目的:在二妙丸降低血尿酸抗痛风的作用基础上,探讨二妙丸对痛风症大鼠血清中炎症介质的影响。方法:采用乙胺丁醇和腺嘌呤造模法,开展二妙丸抗痛风的药理药效的研究。同时采用高效毛细管电泳法,对大鼠血清蛋白含量进行测定。结果:二妙丸具有降低血尿酸抗痛风的药效,并初步探究二妙丸治疗痛风的作用与血清蛋白含量有关。结论:通过研究二妙丸对痛风大鼠炎症介质的影响,为二妙丸抗痛风作用机制的研究提供科学依据。

HPLC法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量

目的建立二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量。色谱柱为phe-nomenex Luna C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A:乙腈,流动相B:0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液-0.2%三乙胺溶液(磷酸调pH 3.0),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为284 nm。结果在一定浓度范围内,黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱峰面积与浓度呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.09%,98.04%,99.75%,102.74%和104.84%,RSD分别为1.04%,1.36%,0.14%,1.83%和0.62%。结论该方法简便准确,专属性强,可作为二妙丸质量控制方法。

HPLC法同时测定加味二妙颗粒中7种成分及指纹图谱建立

目的建立HPLC法同时测定加味二妙颗粒(黄柏、苍术、土茯苓等)中黄柏碱、盐酸小檗碱、盐酸药根碱、(R,S)-告依春、落新妇苷、橙皮苷、白术内酯Ⅲ的含有量,并建立指纹图谱。方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Amethyst C18-H色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以0.05 mol/L磷酸二氢钾-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长237、291 nm;柱温35℃。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r=1),平均加样回收率95.77%~110.36%,RSD 0.06%~2.94%。14批样品指纹图谱中有20个共有峰,相似度均大于0.990,有5个被鉴定出(5-羟甲基糠醛、黄柏碱、落新妇苷、橙皮苷、盐酸小檗碱)。结论该方法稳定可靠,重复性好,可用于加味二妙颗粒的质量控制。