中华绒螯蟹第二次卵巢发育期间卵巢和肝胰腺中主要生化成分的变化

2005年3—5月,在室内养殖条件下对第一次产卵后的中华绒螯蟹进行连续采样,系统研究了其第二次卵巢发育期间的卵巢指数(GSI)、肝胰腺指数(HSI)、卵巢外部特征的变化,并测定了卵巢和肝胰腺中的主要生化成分(水分、蛋白、脂肪和碳水化合物)的变化。结果表明:1.中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中,卵巢指数(GSI)显著增加(p<0.05),肝胰腺指数(HSI)先增加后减少,GSI与发育天数呈显著正相关性(p<0.01),HSI和GSI的变化呈显著负相关性(p<0.05)。2.第二次卵巢发育过程中,卵巢中的水分含量显著下降,脂肪、蛋白质和碳水化合物的含量显著上升(p<0.05);肝胰腺中的水分含量显著增加(p<0.05),脂肪和碳水化合物的含量显著下降(p<0.01),蛋白质含量基本不变。3.第二次发育过程中,卵巢中的脂肪、蛋白质和碳水化合物的含量与GSI呈正相关(p<0.01),卵巢中的水分含量与GSI呈显著负相关(p<0.01);肝胰腺中的脂肪和碳水化合物的含量随着HSI的下降而显著下降,肝胰腺中的水分含量与HSI呈显著负相关(p<0.01);肝胰腺中的脂肪含量与GSI及卵巢中脂肪含量均呈显著负相关(p<0.01),这说明中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中肝胰腺中的部分脂肪转运到二次卵巢中去。

三疣梭子蟹EcR基因的克隆及表达分析

为研究蜕皮激素受体（EcR）在甲壳动物生长和生殖过程中的作用，采用反转录PCR（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术，克隆了三疣梭子蟹蜕皮激素受体（PtEcR）基因全长cDNA序列（GenBank登录号：KC354381），运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法，分析该基因在不同组织、蜕皮时期和二次卵巢发育阶段的表达特征。结果表明，PtEcRcDNA全长2231bp，包含1269bpORF，编码422个氨基酸；推导的PtEcR氨基酸序列与已公布的其他甲壳动物EcR进行比对，发现一致性达67％-97％；系统进化树分析PtEcR与其它甲壳动物EcR聚为一支，而昆虫EcR聚为另一支。PtEcR在检测的三疣梭子蟹10个组织中均有表达，其中在Y-器（YO）表达量最高。在蜕皮周期中，自蜕皮后期至蜕皮前期D2亚期PtEcR在YO中的表达量一直较低；至D3亚期和D4亚期，PtEcR表达量显著升高，这与血淋巴中20-羟基蜕皮酮（20E）浓度在D3／D4亚期显著升高相协同，表明PtEcR在三疣梭子蟹蜕皮过程中起着重要的作用。二次卵巢发育阶段，ptEcR在YO和肝胰腺（Hp）中的表达量自Ⅱ期逐渐升高至Ⅳ期达到最高；卵巢（Ov）中，则在Ⅰ、Ⅲ期较低，Ⅱ、Ⅳ期较高，表明PtEcR可能参与卵巢发育和卵黄发生。