二步法静脉冷冻保存维持时限研究

目的：直径１．０～１．４ｍｍ静脉经二步冷冻法保存（第一步－６０℃，第二步－１９６℃）与异体移植，观察维持时限对二步法静脉冷冻保存的影响。方法：家兔６０只，体重２．０～２．５ｋｇ，切取股静脉段（２０～２５ｍｍ），分成６组，每组１０只；对照组为自体静脉移植，余５组在－６０℃中按维持时限５ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ分组。用慢降温０．５～１．０℃／ｍｉｎ，快复温后作异体静脉移植。术后经光镜、电镜、血管造影、手术探查等对移植血管的组织学及通畅率检测，采用四格表确切概率法检验。结果：６０ｍｉｎ组内膜保存最好，远期（１２周）通畅率８９．９％与对照组差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）；其余各组静脉内膜损伤严重，通畅率与对照组差异显著（Ｐ＜０．０５）。结论：（１）静脉冷冻保存维持时限有一定选择性；（２）６０ｍｉｎ组为最佳维持时限；（３）为临床应用保存异体小静脉修复小血管缺损提供依据。

水稻悬浮细胞的超低温保存研究

本研究分析了水稻悬浮细胞的生理状态和各种冷冻前处理等因素对超低温保存后细胞存活率的影响。结果表明,继代后培养3—5天,处于对数生长期的细胞,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高。电镜超微结构观察显示,0.5mol/L山梨醇预培养,10%DMSO+0.5mol/L山梨醇复合保护剂处理,液泡显著变小,数目明显减少,从而降低了细胞内自由水含量,增强细胞的抗冷冻能力。在上述合适的前处理和冷冻-化冻条件下,超低温保存水稻悬浮细胞的恢复生长率为58%,恢复生长的细胞转移到分化培养基上,可再生健壮绿苗, 移植到盆钵,在温室中长成正常结实的植株。