HPLC法测定云南省不同辣椒品种中辣椒碱及二氢辣椒碱的含量

利用超声提取法对云南省不同地区不同品种辣椒样品进行预处理,采用高效液相色谱法(HPLC)测定样品中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。具体方法为:采用色谱柱HanbonSci&Tech.LichrospherC18(250×4.6mm,5μm)分离,甲醇-3‰磷酸水溶液梯度洗脱(65%～90%,0～30min),检测波长280nm,辣椒碱和二氢辣椒碱的相对标准偏差都小于1%,平均回收率都在99%以上。该方法具有较好的分离效果和较高的稳定性,适用于云南省不同地区不同品种中辣椒碱和二氢辣椒碱含量的测定。测定结果显示云南省不同地区不同品种不同成熟度的辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱含量差异很大。

辣椒果实中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量研究

以辣椒中引起辛辣味的主要化学成分辣椒碱和二氢辣椒碱的含量为标准，利用HLPC法测定了不同辣椒品种果实整体及不同部位中辣椒总碱的含量。结果显示，辣椒总碱含量占干重变化范围为0.02%-0.582%；辣椒碱含量由高到低的顺序为朝天椒〉线辣椒〉羊角椒〉青椒〉彩椒，辣椒碱含量占辣椒总碱变化范围为37.0%-66%；二氢辣椒碱含量由高到低的顺序为朝天椒〉线辣椒〉羊角椒〉彩椒〉青椒，二氢辣椒碱含量占辣椒总碱变化范围为23.8%-53.1%。辣椒果实不同部位辣椒碱含量的趋势为胎座〉果皮〉种子。

离子交换纤维吸附二氢辣椒碱的动力学研究

首先采用SEM和IR方法表征了吸附二氢辣椒碱前后的ZB-2强碱性阴离子交换纤维,确定了可以吸附;然后测定了离子交换纤维吸附二氢辣椒碱的速率,确定了吸附在3 min时由液膜扩散控制转入离子交换纤维内扩散控制;最后考察了搅拌速度、溶液浓度、吸附温度和离子交换纤维直径对离子交换速率的影响,得到了离子交换纤维内扩散控制交换过程的表观活化能、反应级数、速率常数和动力学方程式。

二氢辣椒碱标准样品的研制

建立了二氢辣椒碱标准样品的研制方法。采用催化氢化还原辣椒碱提取物和重结晶的方法制备二氢辣椒碱,UV、IR、MS和NMR等方法对二氢辣椒碱结构鉴定,并进行了均匀性、稳定性检验,经国内8个具有分析资质的实验室进行协同定值,二氢辣椒碱标准样品的标准值为99.30%,置信度95%的不确定度值为0.32%。所制得二氢辣椒碱标准样品达到国家标准样品的技术要求,可用于有关二氢辣椒碱检测方法的校正和相关产品的质量控制。

HPLC法测定辣椒总碱中辣椒碱及二氢辣椒碱的含量

在 C6H5键合硅胶为填充剂的色谱柱上 ,以乙腈 - 0 .1% H3 PO4(33∶ 6 7)为流动相 ,检测波长为 2 80 nm,同时测定了辣椒总碱中辣椒碱及二氢辣椒碱的含量。结果表明 ,辣椒总碱中辣椒碱及二氢辣椒碱的含量约为5 8%和 30 % ,方法的平均加样回收率分别为 98.2 %和 97.6 %。

二氢辣椒碱诱导治疗性低体温对小鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用

目的探讨二氢辣椒碱(DHC)诱导治疗性低体温对小鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用及其机制。方法将20只成年野生型(WT)小鼠随机分为WT组和WT+DHC组,每组10只;20只瞬时感受器电位香草酸受体1基因敲除(TRPV1 KO)小鼠随机分为TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组,每组10只。所有小鼠建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型。WT组和TRPV1 KO组小鼠再灌注开始后皮下泵注生理盐水1.25 mg·kg^(-1)·h^(-1),WT+DHC组和TRPV1 KO+DHC组小鼠再灌注开始后皮下泵注DHC 1.25 mg·kg^(-1)·h^(-1)。所有小鼠再灌注90 min后全部移入22℃的鼠笼中,每隔5 min记录小鼠再灌注期的中心体温变化至再灌注后24 h。在麻醉开始前和再灌注后24 h对小鼠进行神经行为测试评分,测试结束后取小鼠脑组织切片行氯化三苯基四氮唑染色,计算小鼠的脑组织梗死率。结果4组小鼠再灌注0、30、60 min时中心体温比较差异均无统计学意义(P>0.05)。WT组、TRPV1 KO组和TRPV1KO+DHC组小鼠再灌注90 min时的中心体温与0、30、60 min时比较差异均无统计学意义(P>0.05),2、3、4、6、12、24 h时的中心体温与0、30、60、90 min时比较均显著降低(P<0.05);WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠2、3、4、6、12、24 h时的中心体温在3组同时间点之间两两比较及组内不同时间点之间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。WT+DHC组小鼠再灌注后90 min及2、3、4、6、12、24 h时的中心体温与0、30、60 min时比较均显著降低(P<0.05),且均显著低于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组同时间点(P<0.05)。麻醉前4组小鼠神经行为学测试总分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注后24 h 4组小鼠神经行为学测试总分均低于麻醉前(P<0.05),但WT+DHC组小鼠的行为学测试总分明显高于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组(P<0.05),而WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠的行为学测试总分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注后24 h,4组小鼠的自发性活动、攀爬实验、本体觉实验和对触摸触须的反应等4项神经行为学测试评分比较差异均无统计学意义(P>0.05);WT+DHC组小鼠的四肢运动对称性试验和前爪伸展试验评分显著高于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠(P<0.05);WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+DHC组小鼠的四肢运动对称性试验和前爪伸展试验评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注后24 h,WT+DHC组小鼠的脑组织梗死率显著低于其他3组(P<0.05);而WT组、TRPV1 KO组、TRPV1 KO+DHC组小鼠脑组织梗死率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠局灶性脑缺血再灌注后皮下泵注DHC可通过激活TRPV1受体诱导治疗性低体温,并减少脑组织损伤,改善脑神经功能。

HPLC法检测辣椒不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量

辣椒果实中的辣味成分包括辣椒碱及其衍生物(统称为辣椒碱类化合物),其中,引起辛辣味的主要化学成分辣椒碱和二氢辣椒碱约占总量的90%以上。本试验的目的是检测不同辣椒品种的不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱含量。因此建立了高效液相色谱方法,采用色谱条件为:C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),1‰磷酸水溶液—乙腈(600∶400)为流动相,流速为1.5mL/min,柱温为30℃,检测波长为281nm。该法简便,结果准确,可用于测定辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。利用该方法,检测了不同辣椒品种的不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量,结果发现印度Teja中辣椒碱和二氢辣椒碱含量最高;辣椒果实不同部位辣椒碱和二氢辣椒碱含量的趋势为胎座>果肉>种子,为合理选择果实不同部位生产辣椒碱提供参考。

HPLC法测定辣椒精中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量

目的建立同时测定辣椒精中2个主要成分辣椒碱及二氢辣椒碱含量的测定方法。方法采用高效液相色谱方法 ,C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(70:30)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm。结果辣椒碱及二氢辣椒碱分别在1.955～7.820μg(r=0.9999)、2.709～7.224μg(r=0.9955)范围内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为101.57%、108.87%。结论该法简便,结果准确、可靠,可用于测定辣椒精中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。

高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒碱和二氢辣椒碱

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱的检测方法。实验考察了仪器条件、不同流动相体系、流动相配比、柱温、流速等因素对分离的影响。确定了最佳色谱条件为ZORBAX SB–C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);二极管阵列检测器,辣椒碱、二氢辣椒碱的最佳检测波长为280 nm;色谱柱温度为20℃;最佳流动相配比为水–甲醇(体积比为35∶65),流速为1.0 mL/min;进样量为5μL。在最佳色谱条件下,建立了辣椒碱的标准曲线,相关系数r=0.9999。辣椒碱、二氢辣椒碱的加标回收率分别为94.1%～96.8%、92.6%～95.0%,测定结果的相对标准偏差小于2.0%(n=11)。该法实现了25 min内对辣椒碱、二氢辣椒碱的同时测定。

不同产地辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱与辣椒红色素的测定

目的通过测定不同产地辣椒中辣椒碱与辣椒红色素的量,为辣椒原料的选择提供科学依据。方法采用《中国药典》2010版方法测定辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱;采用GB10783-2008方法测定辣椒中红色素的色价。结果江西、云南产辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱的量较高,河北、河南产辣椒中红色素的量较高。结论不同产地辣椒中辣椒碱和红色素的量差异较大。

RP-HPLC同时测定代温灸膏中肉桂酸、桂皮醛、辣椒碱、二氢辣椒碱及6-姜酚的含量

目的:建立用高效液相色谱法同时测定代温灸膏中主要药效成分肉桂酸、桂皮醛、辣椒碱、二氢辣椒碱及6-姜酚的含量。方法:采用Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长280nm,柱温30℃。结果:肉桂酸、桂皮醛、辣椒碱、二氢辣椒碱、6-姜酚浓度分别在5.66～42.45,20.40～153.0,16.20～121.5,10.16～76.20,13.12～98.40μg.mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。上述化合物的回收率和RSD分别为98.2%,1.4%;100.0%,1.0%;99.2%,1.1%;99.2%,1.2%;100.1%,1.0%。结论:该方法能准确、快速分析代温灸膏中5个主要成分,灵敏度高,重现性好,可用于控制代温灸膏的质量。

RP-HPLC双波长同时测定关节止痛膏中硫酸阿托品、盐酸苯海拉明、辣椒碱和二氢辣椒碱的含量

目的：建立用高效液相色谱同时测定关节止痛膏中主要药效成分硫酸阿托品、盐酸苯海拉明、辣椒碱及二氢辣椒碱的含量。方法：采用RP-HPLC双波长法,色谱柱Alltima C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱程序;体积流量1 mL·min^-1;检测波长210,280 nm;柱温30℃。结果：硫酸阿托品在2.0150.25 mg·L^-1,盐酸苯海拉明在15.08377.00 mg·L^-1,辣椒碱在5.02125.50 mg·L^-1,二氢辣椒碱在5.03125.75 mg·L^-1与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率分别为99.00%（RSD 0.95%）,99.89%（RSD 1.2%）,100.13%（RSD 1.5%）,99.51%（RSD 1.4%）。结论：此方法准确、快速分析关节止痛膏中4种主要成分,灵敏度高,重复性好,可控制关节止痛膏的质量。

LC-MS/MS法测定兔血浆和组织中辣椒碱和二氢辣椒碱的浓度

目的：建立测定兔血浆和组织中辣椒碱（capsaicin,CAP）和二氢辣椒碱（dihydrocapsaicin,DHC）浓度的LC-MS/MS法。方法：100μL血浆或组织样品经液-液萃取后,以乙腈-0.1%甲酸（70∶30）为流动相,经Agilent Extend C18柱（150 mm×2.1 mm,5μm）分离,采用电喷雾电离源,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/z 306.4→m/z 137.3（CAP）,m/z 308.2→m/z 137.3（DHC）和m/z 494.0→m/z 369.1（内标格列本脲）。结果：测定血浆和组织中CAP和DHC的线性范围均为0.125～50 ng·mL^-1,最低定量限（LLOQ）均为0.125 ng·mL^-1。日内、日间精密度（RSD）均±15.0%,准确度（RE）均在±11.5%以内。结论：该方法专属性强、灵敏度高、快速,可同时测定兔血浆和组织中CAP和DHC的浓度,适用于CAP和DHC的药动学研究。

HPLC法测定广西指天椒中三种辣椒碱类物质的含量

用HPLC法测定了广西指天椒中的辣椒碱、二氢辣椒碱和降二氢辣椒碱含量。指天椒中辣椒碱类物质用65％乙醇溶液提取经膜过滤，采用GracesC18柱，以甲醇-水-磷酸（65：35：0．1）为流动相，流速0．6mL·min-1，检测波长281nm，柱温为30℃时直接测定。辣椒碱、二氢辣椒碱、降二氢辣椒碱线性范围分别为77．23-407．15μg·mL-1（r=0．9999）、14．03-75．80μg·mL-1（r=0．9999）、1．62～10．00μg·mL-1（r=0．9999），回收率在98％～100．5％之间，RSD（n=4）为0．95--2．2％。实验结果表明，该法快速、简便、准确可靠。

天然结晶辣椒碱的NMR谱研究

用一维１ＨＮＭＲ谱、１Ｈ１ＨＣＯＳＹ谱和一维１３ＣＮＭＲ谱、ＤＥＰＴ谱研究辣椒碱分子和二氢辣椒碱分子及其混合物，得到１Ｈ和１３Ｃ的化学位移。

辣椒碱类物质的荧光检测方法研究

建立了对辣椒碱和二氢辣椒碱及总量进行快速测定的荧光分析方法。在Ex均为282nm,Em分别为313nm和352nm,光电管负高压为400V下,辣椒碱及二氢辣椒碱含量在2.0~12.0μg/mL范围内其标准曲线方程为：I1=6.8883C1-4.1840,I2=4.802C2＋6.345,R2分别为0.9997和0.9976,线性关系良好。对样品进行总碱含量测定,精密度RSD为1.82%,回收率为103.5%,检测结果与HPLC-UV接近,能满足一般定量检测的需要且操作简便。

高效液相色谱法测定辣椒中的辣椒碱类成分

建立了高效液相色谱法同时测定辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱含量的方法。采用Ultimate AQ-C18型色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为水-甲醇(40∶60,V/V),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长280 nm。辣椒碱和二氢辣椒碱在0.001~0.150 mg/m L质量浓度范围内线性关系良好(R^2=0.999 9);加样回收率均值分别为99.35%和98.26%,RSD分别为0.82%和0.73%(n=9);稳定性试验RSD为0.27%;中间精密度RSD低于3.79%(n=18)。该法准确度高、重现性好,能快速测定辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。

复方辣椒碱乳膏的质量标准研究

目的改进复方辣椒碱乳膏的定量测定HPLC流动相。方法采用HPLC法测定辣椒碱、二氢辣椒碱及水杨酸甲酯的流动相分别为乙腈-0.1%磷酸溶液(40∶60),甲醇-水(80∶20);采用GC法测定樟脑、薄荷脑的量。结果辣椒碱在11.312 5～181.00μg/mL,二氢辣椒碱在6.437 5～103.00μg/mL,水杨酸甲酯在12.30～196.80μg/mL,樟脑在0.295 4～4.727 mg/mL,薄荷脑在0.283 7～4.539 mg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),回收率均在95%～105%之间,RSD均小于5%,分离度均大于1.5。结论改进后定量方法简便,准确,重复性好,出峰时间较《中国药典》推荐方法短。