α-熊果苷对酪氨酸酶二酚酶激活动力学的研究

采用酶动力学方法,以L-多巴为底物,通过酪氨酸酶二酚酶催化反应体系,研究α-熊果苷对二酚酶活性的影响。实验结果表明:α-熊果苷对酪氨酸酶的二酚酶催化反应产生激活效应,反应过程没有迟滞时间;由Lineweaver-Burk双倒数作图得知,在一定范围内,随着催化反应系统中α-熊果苷浓度的增大,动力学参数Km逐渐减小,而最大反应速率Vmax逐渐增大,表明α-熊果苷对酪氨酸酶二酚酶的激活作用为竞争及非竞争混合型;并且从酶的构象变化及减少酶的自杀性失活的角度,阐述了α-熊果苷对酪氨酸酶二酚酶的激活机制。

铜(II)酪氨酸乙酯络合物催化一锅法合成S(-)-1,1-′联萘-2,2′-二酚

利用“一锅法” ,以L 酪氨酸乙酯为原料和铜 (II)反应生成络合物 ,不对称催化氧化偶合 2 萘酚合成S ( -) 1,1′ 联萘 2 ,2′ 二酚 ,选择最佳反应条件 ,可使化学产率达到 67%,光学产率达到 62 %.

异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制机理

异鼠李素是沙棘果实和美白类中草药白蒺藜、白鲜皮的主要黄酮类活性成分,具有广泛的药理活性。酪氨酸酶是人体细胞产生黑色素和果蔬褐变的关键酶。本文研究了异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制机理。以L-多巴为底物,测定异鼠李素对酪氨酸酶二酚酶活性的IC50、抑制类型和抑制常数。抑制类型由Lineweaver-Burk双倒数作图法来判断,并计算相应的抑制常数(KI和KIS)。实验结果显示,异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力抑制效果显著,IC50为25μmol/L,是混合型可逆抑制,抑制常数KI为20.1μmol/L,KIS为108.6 mol/L。总之,异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力有很好的抑制作用,是值得进一步研究的美白类候选药物和防止果蔬褐变的食品添加剂。

注射用丹参多酚酸治疗缺血性脑卒中对患者同型半胱氨酸、D-二聚体、高敏C反应蛋白水平与血液流变指标影响

目的:探究注射用丹参多酚酸(SAFI)治疗缺血性脑卒中对患者同型半胱氨酸(Hcy)、D-二聚体(D-Dimer)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与血液流变指标影响。方法:选择2018年3月-2021年3月于本院接受治疗的106例缺血性脑卒中患者为观察对象,将2018年3月-2019年8月收治的患者纳入参考组(n=52),予以常规药物治疗(包括阿司匹林肠溶片、华法林);将2019年9月-2021年3月收治的患者纳入观察组(n=54),在参考组基础上予以SAFI治疗。对比两组治疗前、治疗2周后的Hcy、D-Dimer、hs-CRP水平;对比两组治疗前、治疗2周后的血液流变指标[包括血小板聚集率、全血高切黏度、血浆黏度(PV)];对比两组治疗期间的不良反应发生率。结果:治疗2周后,观察组Hcy、D-Dimer、hs-CRP水平均低于参考组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗2周后,观察组血小板聚集率、全血高切黏度、PV水平均低于参考组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SAFI治疗缺血性脑卒中可有效改善患者的病情及其血液流变指标,安全性良好。

二氢杨梅素对酪氨酸酶抑制作用研究

研究了二氢杨梅素对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶抑制作用和机理。结果表明,二氢杨梅素对单酚酶、二酚酶的抑制率分别为95.87%、69.01%;二氢杨梅素对单酚酶的抑制作用表现为酶催化反应的迟滞时间延长;二氢杨梅素对二酚酶的抑制作用表现为可逆混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为150μmol.L-1和83μmol.L-1。二氢杨梅素可作为天然的酪氨酸酶抑制剂。

异丙酚对N-甲基-D-天冬氨酸致PC12细胞损伤时氨基酸水平的影响

目的观察静脉麻醉药异丙酚对N甲基D天冬氨酸(NMDA)致PC12细胞损伤时氨基酸水平的影响,并探讨异丙酚细胞保护作用的可能机制。方法建立300μmol/LNMDA诱导的PC12细胞损伤模型,采用高效液相色谱分析法测定PC12细胞氨基酸含量。结果300μmol/LNMDA处理4h可使PC12细胞谷氨酸含量明显增加,但对天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸含量无明显影响;12.5和125μmol/L异丙酚与300μmol/LNMDA同时处理PC12细胞4h后,谷氨酸含量较单纯NMDA组明显降低(P<0.05)。结论异丙酚可明显抑制NMDA诱导PC12细胞损伤所致的谷氨酸合成或释放,提示异丙酚可能通过抑制谷氨酸的合成或释放而产生细胞保护作用。

二甲基亚砜对酪氨酸酶活性影响的研究

在30℃、pH6.8Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了二甲基亚砜(DMSO)对酪氨酸酶二酚酶活力的作用。试验结果表明,当DMSO溶液体积分数≤25%时,随着DMSO溶液体积分数上升时,酪氨酸酶(TYR)活性相应上升;而当DMSO溶液体积分数>25%后,TYR活性急剧降低。笔者探讨了DMSO对酪氨酸酶二酚酶活性作用机制,为TYR异常表达产生疾病的药物研发提供试验依据。

奥卡西平联合丹参多酚酸盐治疗脑梗死后癫痫的疗效

目的:探讨奥卡西平联合丹参多酚酸盐治疗脑梗死后癫痫的临床疗效。方法:选取肇庆市第一人民医院脑梗死后癫痫患者84例为研究对象,随机分为对照组与观察组各42例,对照组予以奥卡西平口服,0.6 g/次,1次/d;观察组在对照组的基础上予以丹参多酚酸盐静脉滴注,100 mg/次,1次/d。两组均连续应用奥卡西平6个月,观察组应用丹参多酚酸盐2 w。比较两组治疗前后神经功能缺损评分量表(CSS)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分,比较两组6个月内癫痫发作次数、每次持续时间、两组脑电图累及导联数和痫样放电情况。并比较血清非对称二甲基精氨酸(ADMA)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平,比较两组治疗总有效率。结果:治疗后观察组非对称二甲基精氨酸察组CSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),MoCA评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),6个月癫痫发作次数、持续时间及脑电图累及导联数、痫样放电情况均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清ADMA、MCP-1、NSE水平均低于对照组,治疗总有效率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:奥卡西平联合丹参多酚酸盐可减少癫痫发作次数,缩短持续时间,减少累及导联数和痫样放电,改善神经功能和认知功能,降低血清ADMA、MCP-1、NSE水平,治疗脑梗死后癫痫效果显著,安全性好。

BYDV侵染对燕麦抗氧化防御酶、苯丙氨酸解氨酶及多酚类氧化酶的影响

为探究燕麦在蚜虫和大麦黄矮病毒(Barley Yellow Dwarf Virus,BYDV)危害后的生理响应,本试验初步测定了接种蚜虫和大麦黄矮病毒后不同时间(0 d,7 d,14 d,21 d,28 d,35 d)叶片内抗氧化防御酶和苯丙氨酸解氨酶及多酚类氧化酶的活性变化。结果表明随着危害时间的增加,丙二醛含量呈明显上升趋势,蚜虫+BYDV处理在接种后35 d丙二醛含量达到对照的1.4倍;过氧化物酶活性呈上升趋势,在接种后35 d较对照高14.36%,而超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性总体先上升后下降,分别在接种后21d和14 d达到最大值,为对照的8.78和1.73倍;苯丙氨酸解氨酶和多酚类氧化酶活性均呈上升趋势,在接种后35 d分别较对照高36.33%和203%。和蚜虫处理相比,蚜虫+BYDV处理造成的损伤更大,丙二醛、抗氧化防御酶及苯丙氨酸解氨酶和多酚类氧化酶活性变化更剧烈。本研究结果为探讨BYDV与燕麦的互作机理提供了一定的参考依据。

酮咯酸氨丁三醇复合小剂量芬太尼与咪唑安定混合舒芬太尼在LC术后PCIA中的应用效果比较

【目的】比较酮咯酸氨丁三醇复合小剂量芬太尼与咪唑安定混合舒芬太尼在腹腔镜胆囊切除术（LC）术后患者静脉自控镇痛（PCIA）中的应用效果。【方法】选取2014年11月至2016年11月于本院就诊的行LC患者86例,随机分为2组各43例。A组予以咪唑安定混合舒芬太尼,B组予以酮咯酸氨丁三醇复合小剂量芬太尼,观察两组术后4 h、8 h、12 h、24 h PRINCE-ENRY评分,RAM-SAY镇静评分,总体镇痛效果,PCA镇痛次数及不良反应发生率。【结果】B组术后4 h、8 h、12 h、24 h PRINCE-ENRY评分和RAM-SAY镇静评分低于A组（P〈0.05）;B组术后总体镇痛效果在Ⅰ级所占比例明显高于A组,Ⅳ级所占比例明显低于A组（P〈0.05）;B组PCA总次数少于A组（P〈0.05）;B组不良反应发生率明显低于A组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。【结论】LC术后采用酮咯酸氨丁三醇复合小剂量芬太尼与咪唑安定联合舒芬太尼镇痛,均可达到一定效果,相较而言,酮咯酸氨丁三醇复合小剂量芬太尼术后镇痛效果更佳,同时还可抑制阿片受体所产生的不良反应。

脊柱手术术前单次输注不同负荷剂量氨甲环酸的止血疗效观察

目的对比观察脊柱手术术前单次输注不同负荷剂量氨甲环酸的止血效果及安全性。方法脊柱侧弯矫形手术患者150例随机分为C组、H组及L组,各50例。手术切皮前,H组和L组分别静脉输注负荷剂量TXA 20 mg·kg^(-1)、10 mg·kg^(-1),而后持续静脉泵注TXA 10 mg·kg^(-1)·h^(-1)至术毕;C组相同时间点静脉输注等量0.9%氯化钠注射液。记录术中输液量、出血量、红细胞输注量、尿量及术后不同时点引流量。检测术前术后凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、D-二聚体(D-D)、血小板数量(BPC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂^(-1)(PAI^(-1))。追踪术后下肢深静脉血栓(DVT)、肺栓塞、急性肾损伤(AKI)、癫痫、心肌梗死等不良事件。结果 H组、L组出血量、输血量低于C组(P<0.05),H组出血量、输血量低于L组(P<0.05)。3组术后1-3d引流量逐渐下降,H组、L组不同时点引流量均低于C组(P<0.05),H组不同时点引流量低于L组(P<0.05)。与术前比较,3组术后BPC、Hb、HCT下降(P<0.05),D-D、t-PA增高(P<0.05),H组、L组术后以上指标变化低于C组(P<0.05)、H组术后以上指标变化低于L组(P<0.05)。H组、L组术后PAI^(-1)无明显变化(P>0.05),而C组术后PAI^(-1)明显降低(P<0.05)。术后1 d、7 d、28 d双下肢B超检查未见DVT形成,术后28 d内追踪未发现肺栓塞、AKI、癫痫、心肌梗死等不良事件。结论脊柱手术中应用高负荷剂量TXA的止血效果更为突出,对术后近、远期不良事件的发生率亦无影响。

L-半胱氨酸对酪氨酸酶的抑制动力学研究

用酶动力学方法考察了L-半胱氨酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的抑制效应。结果表明,L-半胱氨酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的L-半胱氨酸浓度(IC50)分别为20.3μmol/L和52.0μmol/L。在降低蘑菇酪氨酸酶酶活的同时,L-半胱氨酸能明显延长单酚酶和二酚酶的延滞时间。探讨了二酚酶延滞时间产生的原因:L-半胱氨酸与酪氨酸酶催化氧化产物多巴醌反应,形成了无色的L-DOPA的L-半胱氨酸衍生物,从而阻断了多巴色素的形成,直至体系中的L-半胱氨酸反应完全后,多巴醌才开始转化为多巴色素。L-半胱氨酸对二酚酶的抑制作用表现为不可逆的竞争性抑制。

苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶抑制作用机理的研究

报道了苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力的影响以及抑制作用机理.研究结果表明,苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,其效应为可逆抑制效应.测定导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为1.20和1.00mmol/L.苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶的迟滞时间有明显的延长效应,4mmol/L苯甲酸使得单酚酶的迟滞时间从42s延长到200s.测定苯甲酸对二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制类型,测定抑制常数为0.95mmol/L.苯甲酸与酶的结合导致天然酶的内源荧光的量子产率下降,但荧光发射峰没有位移.作者提出抑制剂与酶分子的作用模型.

肉桂酸抑制酪氨酸酶催化反应的动力学研究

在30℃,pH=6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学。实验结果表明,肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用,对单酚酶和二酚酶活力的相对抑制率达到50%的肉桂酸浓度(IC50)约分别为0.37mmol·L-1和0.61mmol·L-1,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值5.3mmol·L-1小得多。肉桂酸能明显延长单酚酶的迟滞时间,0.4mmol·L-1肉桂酸能使迟滞时间由1.1min延长至2.3min。Lineweaver-Burk图显示肉桂酸对二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制,表观米氏常数(Km)为0.68mmol·L-1,抑制常数(KI)为0.58mmol·L-1。

香草醛对酪氨酸酶活性的抑制

在25℃,pH=6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了香草醛对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的抑制效应.实验结果表明:香草醛对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)约分别为2.7和4.1mmol/L;香草醛能明显延长单酚酶的迟滞时间,4 mmol/L香草醛能使迟滞时间由1.1 m in延长至3m in;Lineweaver-Burk图显示香草醛对二酚酶的抑制作用表现为混合性抑制,对游离酶的抑制常数和对酶-底物络合物的抑制常数分别为3.48和15.1mmol/L.

桑黄素对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

研究桑黄素(Morin)对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响和抑制效应的结果表明:桑黄素对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用;导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为0.08和1.02mmol/L;桑黄素对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶的迟滞时间有明显的延长效应,0.175 mmol/L桑黄素使得单酚酶的迟滞时间从24 s延长到362 s,迟滞时间增加了14倍,酶的稳态活力下降了61.9%;桑黄素对二酚酶的抑制作用表现为竞争性可逆抑制作用,抑制常数为0.55 mmol/L.

苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制作用

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是生物黑色素形成的关键酶,该酶抑制剂在果蔬防褐变保鲜中具有重要的应用前景.在筛选酪氨酸酶活力抑制剂过程中,发现苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶活力有明显的抑制作用,对蘑菇防止褐变具有较好的保鲜效果.报道了苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力和二酚酶活力的影响和抑制作用.结果表明,苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶的效应不仅降低了酶促反应的稳定态活性,也延长了酶促反应的迟滞时间,并具有浓度依赖关系.当苯丙酸浓度达10.0mmol/L时,稳定态活力下降2/3,迟滞时间从100s延长到140s;苯丙酸对二酚酶活力的抑制也显示浓度效应,抑制效果更为显著,引起酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)为2.05mmol/L,苯丙酸对二酚酶活力的抑制显示可逆的效应,抑制类型为混合型,抑制常数(KI和KIS)分别为1.570和3.070mmol/L.

含三氟甲基1,2,3-三氮唑衍生物对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制动力学(英文)

研究表明,含三氟甲基1,2,3-三氮唑衍生物(TF-TZ)对蘑菇酪氨酸酶具有很强的抑制性:不仅抑制单酚酶活性,而且对二酚酶活性也是可逆性抑制,其半抑制浓度IC50分别为30.4和34.5μmol.L-1,并且单酚酶延滞时间随着TF-TZ浓度增加而延长.TF-TZ对二酚酶的抑制为抛物线型竞争性抑制,表明一分子的酶可以和两分子的TF-TZ相结合,从而形成两种酶-抑制剂复合物:EI和EI2,其抑制常数分别为76.9和9.71μmol.L-1.紫外-可见光谱表明,TF-TZ和酶相互作用后产成特征的"肩峰",说明TF-TZ能够作用于酶的活性中心.

光甘草定的制备及其对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

分别选用单酚酶与二酚酶为底物,评价硅胶柱层析(CHCl3/MeOH梯度洗脱)分离得到的光甘草定对蘑菇酪氨酸酶活性的影响。结果表明:实验室所分离得到的光甘草定纯度为85%以上,其对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的活性均有抑制作用,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为1.28μmol/L和1.56μmol/L,且Lin-eweaver-Burk图显示,光甘草定对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制作用表现为竞争型抑制。光甘草定发挥着显著的抑制酪氨酸酶活性,说明光甘草定可以通过抑制黑色素生成的限速酶-酪氨酸酶达到美白肌肤之功效。

秋茄叶缩合单宁对蘑菇酪氨酸酶的抑制机理

研究了红树植物秋茄叶缩合单宁对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力和二酚酶活力的影响和抑制动力学.结果表明秋茄叶缩合单宁不仅可以降低蘑菇酪氨酸酶单酚酶酶促反应的稳定态活力,也可以延长反应的迟滞时间,并具有浓度依赖关系,随着抑制剂浓度增大,稳定态活力下降,迟滞时间延长.当抑制剂质量浓度达33.00μg/mL时,稳定态活力从100%下降到74%,迟滞时间从32.7s增加到72.9s;秋茄叶缩合单宁对二酚酶的抑制也显示浓度效应,抑制效果显著,引起酶活力下降50%的抑制剂质量浓度(IC50)为30.00μg/mL,其对二酚酶的抑制显示可逆的效应,抑制类型为混合型,对游离酶的抑制常数(KI)为25.05μg/mL和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)为46.69μg/mL.本研究揭示了植物秋茄叶缩合单宁作为一种新型酪氨酸酶抑制剂的可能性.