血浆中二氯二苯二氯乙烯与阿尔茨海默病患者脑脊液中生物标志物相关性分析

目的探讨血浆中二氯二苯二氯乙烯(DDE)水平与阿尔茨海默病(AD)患者脑脊液生物标志物的相关性。方法检索阿尔茨海默病神经影像学倡议数据库(ADNI),获得符合纳入标准的研究对象207例(男111例,女96例),分为AD组和健康对照组。采用多元线性回归分析分析血浆中DDE水平与AD患者脑脊液中生物标志物[脑脊液β-淀粉样蛋白(Aβ)、tau蛋白、磷酸化tau(p-tau)蛋白]的相关性,并将研究对象按照性别分为不同亚组,分析不同性别亚组中血浆中DDE水平与AD患者脑脊液标志物的相关性。结果两组研究对象血浆中DDE水平与AD患者脑脊液中生物标志物无相关性(P>0.05)。多元线性回归分析显示,在血浆DDE与性别交互作用下,血浆中DDE水平与AD患者脑脊液Aβ水平呈显著负相关(b=-20.913,P<0.05);亚组分析结果显示,血浆中DDE水平与男性AD患者脑脊液的Aβ水平呈显著负相关(b=-21.919,P<0.05),与女性AD患者脑脊液标志物均无显著相关性(P>0.05)。结论男性人群暴露在DDE环境下患AD的风险增加,可能与男性人群暴露于DDE环境的机会多、时间长有关。

双（对氯苯基）二氯乙烯与β-六氯化苯对大鼠睾丸支持细胞凋亡的影响

目的探讨双（对氯苯基）二氯乙烯[1，1-dichloro-2，2-bis（p-chlorophenyl）ethylene，p，p＇-DDE]、β-六氯化苯（β-benzenehexachloride，β—BHC）及其联合作用对大鼠睾丸支持细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）途径的影响及其作用机制。方法以不同浓度的p，p’-DDE、β-BHC（分别为10、30、50μmol／L）及其联合（10μmol／LP，p＇-DDE＋10μmol／LB—BHC，30μmol／LP，p’-DDE＋30μmol／L β-BHC，50μmol／LP，β-DDE＋50μmol／Lβ-BHC）处理大鼠睾丸支持细胞24h，设Caspase-3抑制剂组（先用100μmol／LCaspase-3抑制剂Ac—DEVD—CHO处理支持细胞2h，再用50tunoL／LP，p’-DDE＋50μmol／LB—BHC联合处理），采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定支持细胞的活性，吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）双重荧光染色测定支持细胞的凋亡率，RT—PCR法检测Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9mRNA表达量的变化。结果10、30、50、70μmol／LP，p＇-DDE组吸光度（A值）分别为0．498±0．039、0．481±0．065、0．397±0．032和0．286±0．049，相同浓度3-BHC组A值分别为0．518±0．103、0．490±0．060、0．454±0．054和0．302±0．030，10、30、50μmol／LP，p＇-DDE与B—BHC联合组A值分别为0．483±0．048、0．473±0．058和0．337±0．052，50μmol／L浓度组与对照组比较，A值降低，差异有统计学意义（t值分别为4．599、2．716、6．537，P〈0．05）。AO／EB双重荧光染色分析结果显示，10、30、50μmol／L各染毒组的支持细胞凋亡率明显升高，与溶剂对照组（9．83±0．95）％、Caspase-3抑制剂Ac—DEVD—CHO组（15．60±2．74）％比较，P，p＇-DDE处理组分别为（23．73±2．24）％、（30．03±2．84）％和（38．04±4．98）％，B—BHC处理组分别为（24．42±3．53）％、（30．64±1．06）％和（39．88±0．17）％，联合处理组分别为（37．08±1．71）％、（42．18±3．32）％和（41．25±3．36）％。逆转录（RT）．PCR结果表明，Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9mRNA表达量随着P，P’-DDE、β-BHC及其联合浓度的增加而增加。结论P，P’-DDE、β-BHC及其联合作用可通过激活启动Caspase-8和Caspase-9，进而激活下游效应Caspase-3引起支持细胞凋亡。

某市郊区养殖池塘水产品及底泥中环境内分泌干扰物的调查

目的了解某市郊区养殖池塘水产品体内环境内分泌干扰物(EEDs)含量。方法于2007年12月选择该市郊区20个养殖池塘,每个养殖池设定3个采样点。在每个取样点分别取约500g的三种水产品(鱼、虾、蟹),同时取500g底泥。采用反相高效液相色谱法检测鱼、虾、,蟹的肌肉和内脏及底泥中二氯二苯二氯乙烯(p,p’-DDE)、4-壬基酚(4-NP)、邻苯二甲酸-2-乙基己酯(DEHP)的含量。结果 20个养殖池塘的水产品中均检出p,p’-DDE,最高含量3.125mg/kg;10个养殖池塘的水产品中检出DEHP,最高含量2.375mg/kg,4-NP污染较轻,仅在3个养殖池塘中检出,最高含量1.258mg/kg。水产品和底泥中均检出p,p’-DDE、4-NP、DEHP。结论该市郊区养殖池塘水产品和底泥已受到EEDs的污染,且以p,p’-DDE污染最为严重。

甲状腺干扰物 p, p'-DDE抑制Nthy-ori-3-1细胞LHX4和DIS3L蛋白表达

目的:观察甲状腺干扰物4,4-二氯二苯二氯乙烯(p,p’-DDE)处理甲状腺Nthy-ori-3-1细胞后,其LHX4和DIS3L mRNA水平及蛋白表达量的变化。方法:取对数生长期Nthy-ori-3-1细胞,配制0、0.5、1.0、2.0和5.0μg/ml p,p’-DDE溶液,按浓度梯度给药,处理Nthy-ori-3-1细胞。显微镜观察细胞生长状态、细胞形态。基因芯片检测基因表达谱变化,通过实时荧光定量PCR检测LHX4和DIS3L mRNA水平,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LHX4和DIS3L蛋白表达量。结果:p,p’-DDE浓度为0、0.5、1.0和2.0μg/ml时,Nthy-ori-3-1细胞均生长正常。2.0μg/ml组细胞差异基因共33个,其中,13个基因表达下调,20个基因表达上调。与对照组比较,1.0、2.0μg/ml组细胞LHX4、DIS3L蛋白表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),1.0μg/ml组细胞LHX4和DIS3L蛋白mRNA相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:p,p’-DDE处理Nthy-ori-3-1细胞会影响LHX4和DIS3L蛋白表达水平。